全自動固相萃取-GC/MS檢測蔬菜中的有機磷農藥

李婷婷 李玲 邢燕 王敏

摘 要：目的：采用全自動固相萃取—氣相色譜質譜聯用（GC/MS）檢測技術，建立蔬菜中14種有機磷類農藥的測定方法。方法：利用超聲波輔助乙腈萃取，經過全自動固相萃取凈化，氣相色譜質譜檢測。結果：實驗濃度范圍內，目標物濃度與峰面積線性關系良好，相關系數在0.997～0.999，檢出限為0.009～0.015 mg/kg；14種有機磷組分回收率為75%～111%。結論：該方法的自動化水平、靈敏度和準確度較高，適用于大批量樣品中有機磷類農藥的檢測。

關鍵詞：有機磷；蔬菜；GC/MS；全自動固相萃取

食品安全與人們身體健康密切相關，并影響著整個社會的和諧與穩定。近年來我國經濟發展速度很快，對蔬菜與水果等的需求變得更大，為了確保提升種植效益，各種農藥違規使用的狀況非常常見，加強對農藥殘留量的檢測非常關鍵。氣相色譜-三重四極桿質譜不僅非常靈敏，也具備較好的可選擇性，有效避免各類因素的影響，保證農藥殘留檢測更加準確與可靠。固相萃取凈化中影響農藥檢測的因素較多，因為處于有機溶劑的環境，將為工作人員身體健康帶來極大危害。全自動固相萃取儀可以實現自動凈化，保證實驗更加順利進行，準確性也可獲得保障[1]。

1 實驗部分

1.1 主要儀器與試劑

GC/MS-QP 2010 Plus氣相色譜-質譜聯用儀、Rtx-5MS 石英毛細管柱（30 mm×0.25 mm×0.25 μm）、KQ-250B型超聲波清洗器、ST16R型高速離心機、 Reeko Auto SPE—06C全自動固相萃取儀、CARB/NH2（500 mg/6 mL）固相萃取小柱。

試劑：丙酮、乙腈為色譜純試劑；純水；敵敵畏、滅線磷、甲拌磷、二嗪噥、乙拌磷、氯唑磷、甲基毒死蜱、殺螟松、喹硫磷、殺撲磷、丙溴磷、乙硫磷、三唑磷和伏殺硫磷濃度均為100 μg/mL，標準溶液定值單位均為農業部環境保護科研檢測所[2-3]。

1.2 色譜條件

載氣為高純氦氣（99.999 %）；柱流量：0.85 mL/min[4]；毛細管柱升溫程序：60 ℃保持1 min，以5 ℃/min升至290 ℃，保持2 min；進樣口溫度為260 ℃；不分流進樣，進樣體積1 μL。

1.3 質譜條件

離子化模式：電子轟擊（EI）離子源；離子源溫度：230 ℃；接口溫度：250 ℃；離子源能量：70 eV；掃描方式：SIM。優化后的有機磷的監測參數見表1。

1.4 樣品處理

樣品提取：精心選取蔬菜樣品，并將其粉碎，然后稱取10.0 g樣品，并同乙腈25 mL均勻混合，超聲萃取10 min左右。加入2 g NaCl、2 g無水MgSO4，渦旋10 s。40 ℃水浴下取15 mL上清液，使用氮將其風干。最后，加入2 mL丙酮-二氯甲烷溶液復溶，有利于接下來凈化工作的開展。

全自動固相萃取儀凈化：配齊固相萃取儀各項設施后，使用5 mL丙酮-二氯甲烷（1∶1）清洗各小柱，并開展萃取操作[5]。再選取科學合理的洗脫液，對樣品管進行全面清洗；選取5 mL丙酮-二氯甲烷（1∶1）淋洗固相萃取柱，慢慢推氣。使用氮氣將洗脫液吹干，再添加丙酮1.0 mL，取1.0 μL進樣測定。

2 結果與討論

2.1 提取溶劑的選擇

農藥殘留檢測中，目標物結構都不相同，類型也多種多樣，將微量、痕量等目標物提取出來，是第一步解決的問題[6]。乙酸乙酯、丙酮和乙腈是農藥殘留檢測中常用的萃取溶劑。乙酸乙酯極性不強，個別極性農藥無法充分提取有機溶劑。丙酮具備較強的溶解能力，可以充分溶解葉綠素、碳水化合物等物質，并有效提取其中的雜質。將丙酮和水充分融合，那么溶劑與樣品將無法徹底的分離。乙腈極性很強，穿透力也很大，使用中可以保證提取的有效性，色素與油脂類雜質也不能徹底提取，讓蛋白質等雜質沉淀下來，故而實驗中所選提取溶劑為乙腈。

2.2 超聲萃取時間的優化

萃取時間對萃取效率的影響非常大。實驗中分析了萃取時間不同時的萃取效率，實驗分別考察了5、10、20、30 min與40 min時的超聲萃取效果，提取時間超過10 min時，回收率變化不大，隨時提取時間的增加，液內雜質也越來越多，樣品重現性將發生變化。因此應將提取時間控制在10 min左右，這樣提取效果將得到保障，也降低了雜質的影響，處理效率大大提升[7]。

2.3 標準曲線及檢出限

溶劑以丙酮為主，使用有機磷類農藥，保證分析的有效進行，讓標準溶液測定更加準確與合理，圖1為標準的總離子流圖。在實驗濃度范圍中，目標物濃度與峰面積線性關系良好，相關系數范圍為0.997～0.999，表 2為統計到的相關試驗數據。以3倍噪聲值表示方法的檢出限，按10.0 g取樣量計算最低檢出濃度，檢出限為0.009～0.015 mg/kg，結果一并列于表2中。

2.4 方法回收率和精密度

在加標回收實驗過程中，基質以白菜空白樣品為主，濃度為0.01 mg/kg和0.1 mg/kg[8—9]。實驗前先處理樣品，選用適當的檢測方法，從而得出準確的回收率。各加標平行樣總共6個，計算平均回收率和相對標準偏差，相關數據如表2所示。各類有機磷組分回收率在75%～111%。

3 結論

本實驗用全自動固相萃取儀提取凈化蔬菜中有機磷類農藥，優化了提取溶劑、超聲提取時間，建立了全自動固相萃取-氣相色譜-質譜聯用技術檢測蔬菜中有機磷類農藥的方法。實驗濃度范圍內，目標物濃度與峰面積線性關系良好，相關系數在0.997～0.999，檢出限為0.009～0.015 mg/kg[10]。該方法自動化程度高，準確度高，適用于大批量樣品中有機磷類農藥的檢測。

參考文獻

[1]安靜.全自動固相萃取—氣相色譜質譜法監測地表水中的5種有機磷類農藥殘留量[J].中國測試，2019，45（11）： 61-65.

[2]李繼革，王玉飛，范建中，等.固相萃取-雙柱雙檢測器-氣相色譜法測定蔬菜中55種有機磷農藥殘留[J]. 中國衛生檢驗，2010，20（11）：2711-2716.

[3]王敏，李廣益，宋豐江，等.高效液相色譜法測定蔬菜中氨基甲酸酯類農藥[J].食品研究與開發，2018，39（1）：122-126.

[4] 孔維恒，邱燁，郝欣，等.全自動固相萃取-氣相色譜法同時測定茶葉中4種有機磷類農藥殘留[J].分析儀器，2019（4）：109-111.

[5]張慧.全自動固相萃取-氣相色譜法測定糧谷中11種農藥殘留的研究[J].糧食科技與經濟，2019，44（7）：89-91.

[6]邢燕，曹楷華，劉玉棟，等.超聲波輔助提取- GC/MS法測定蔬菜中18種農藥[J].食品研究與開發，2016，37（15）： 171-176.

[7]劉超，梅麗寶，張紹龍，等.全自動凝膠凈化-濃縮-固相萃取/氣相色譜-質譜法測定紫皮石斛中有機磷農藥殘留[J].中國無機分析化學，2015，5（4）：8-12.

[8]吳春英，谷風，白鷺，等.固相萃取-超高效液相色譜-三重四極桿質譜聯用同時測定水中菊酯類農藥多殘留[J].析科學學報，2017，33（1）：57-61.

[9]楊惟喜.全自動固相萃取儀分析蔬菜中5種有機磷農藥的方法研究[J].質量技術監督研究，2017（2）：6-9.

[10]高玲，鄭茜尹，楊元.氣相色譜-串聯質譜法測定大米中 36 種有機磷農藥殘留量[J].中國衛生檢驗雜志2013，23（3）：535-543.