PEBP4蛋白在復(fù)發(fā)性腦膠質(zhì)瘤患者中的表達及臨床意義

焦樂

摘要：目的? 探究磷脂酰乙醇胺結(jié)合蛋白4（PEBP4）在復(fù)發(fā)性腦膠質(zhì)瘤患者中的表達情況及臨床意義。方法? 選取2018年8月～2019年8月我院接收的150例復(fù)發(fā)性腦膠質(zhì)瘤患者作為研究對象，按照WHO膠質(zhì)瘤分級標準分為A組64例，B組52例，C組34例。檢查并比較三組患者腫瘤病灶標本PEBP4 mRNA、PEBP4相對表達量及PEBP4陽性表達情況。結(jié)果? A組、B組、C組患者PEBP4 mRNA和PEBP4蛋白相對表達量依次升高，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）;其中PEBP4陽性表達者143例，檢出率為95.33%。結(jié)論? PEBP4在不同等級復(fù)發(fā)性腦膠質(zhì)瘤患者中均有表達，其陽性檢出率相對較高，可以作為診斷與評估復(fù)發(fā)性腦膠質(zhì)瘤嚴重程度的參考依據(jù)。

關(guān)鍵詞：PEBP4蛋白;復(fù)發(fā)性腦膠質(zhì)瘤;信號通路

中圖分類號：R739.41? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 文獻標識碼：A? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? DOI：10.3969/j.issn.1006-1959.2020.08.042

文章編號：1006-1959（2020）08-0131-02

Abstract：Objective? To investigate the expression and clinical significance of phosphatidylethanolamine binding protein 4 （PEBP4） in patients with recurrent glioma.Methods? 150 patients with recurrent glioma received in our hospital from August 2018 to August 2019 were selected as the research object， and were divided into 64 cases in group A， 52 cases in group B， and 34 cases in group C according to WHO glioma classification.Examine and compare the expression of PEBP4 mRNA， PEBP4 and the positive expression of PEBP4 in tumor specimens of the three groups.Results? The relative expression levels of PEBP4 mRNA and PEBP4 protein in group A， group B and group C increased in turn， the difference was statistically significant （P<0.05）; 143 cases of PEBP4 positive expression， the detection rate was 95.33%.Conclusion? PEBP4 is expressed in patients with different grades of recurrent glioma， and its positive detection rate is relatively high， which can be used as a reference basis for diagnosis and evaluation of the severity of recurrent glioma.

Key words：PEBP4 protein;Recurrent glioma;Signaling pathway

腦膠質(zhì)瘤（glioma）是一種大腦或脊髓膠質(zhì)細胞癌性病變導(dǎo)致的原發(fā)性顱腦惡性腫瘤，臨床較為常見，發(fā)病率相對較高，臨床治療多采用開顱切除術(shù)清除腫瘤病灶。但因腦膠質(zhì)瘤具有高度的侵襲性，開顱切除術(shù)僅能切除部分病灶，對深度侵襲的腫瘤病灶無法全部切除，因此患者術(shù)后復(fù)發(fā)率較高，可以達到90%以上，復(fù)發(fā)性腦膠質(zhì)瘤病情的及時診斷對患者改善術(shù)后生活質(zhì)量具有重要意義[1，2]。PEBP4已被證實在多種腫瘤疾病中表達明顯，在腫瘤增生、分裂、轉(zhuǎn)移方面作用明顯[3]。腦膠質(zhì)瘤作為一種常見的惡性腫瘤，但國內(nèi)關(guān)于PEBP4表達與腦膠質(zhì)瘤關(guān)系的相關(guān)報道相對較少，本次研究旨在探究PEBP4在復(fù)發(fā)性腦膠質(zhì)瘤患者中的表達情況及臨床意義。

1資料與方法

1.1一般資料? 選取2018年8月～2019年8月佳木斯大學(xué)第一附屬醫(yī)院接收的150例復(fù)發(fā)性腦膠質(zhì)瘤患者作為研究對象，按照WHO膠質(zhì)瘤分級標準分為A、B、C三組，A組為Ⅰ級患者，64例;B組為Ⅱ級患者，52例;C組為Ⅲ級患者，34例。A組男性38例，女性26例;年齡42～67歲，平均年齡（56.35±3.68）歲;復(fù)發(fā)間隔時間6個月～7年，平均復(fù)發(fā)間隔時間（3.46±0.87）年。B組男性31例，女性21例;年齡41～68歲，平均年齡（56.63±3.42）歲;復(fù)發(fā)間隔時間6個月～8年，平均復(fù)發(fā)間隔時間（3.75±0.92）年。C組男性20例，女性14例;年齡42～69歲，平均年齡（56.86±3.74）歲;復(fù)發(fā)間隔時間6個月～8年，平均復(fù)發(fā)間隔時間（3.58±0.96）年。三組年齡、性別及復(fù)發(fā)間隔時間比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05），具有可對比性。本研究經(jīng)我院醫(yī)學(xué)倫理委員會批準，患者及家屬已簽署知情同意書。

1.2納入及排除標準? 納入標準：①所有患者均符合《腦膠質(zhì)瘤診療規(guī)范（2018年版）》[4]中腦膠質(zhì)瘤診斷標準并經(jīng)CT、MRI確診為腦膠質(zhì)瘤;②均有腦膠質(zhì)瘤治療史（手術(shù)、化療等）;③均為Ⅰ～Ⅲ級腦膠質(zhì)瘤患者;④無手術(shù)禁忌癥且再次接受腦膠質(zhì)瘤手術(shù)并且手術(shù)成功患者。排除標準：①初次診斷腦膠質(zhì)瘤患者且無腦膠質(zhì)瘤治療史患者;②伴有其他惡性腫瘤患者;③合并其他顱內(nèi)病變患者;④伴有嚴重心肝腎等功能障礙患者。

1.3方法? 采集三組患者手術(shù)切除的腫瘤病灶標本，使用聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）檢測法檢測三組患者腫瘤病灶標本的PEBP4 mRNA相對表達量;使用Western blot 法檢測腫瘤病灶標本，將腫瘤病灶標本研磨，離心處理后過濾掉沉淀物質(zhì)，取上層清液，使用考馬斯亮藍法，上海元析儀器有限公司提供的可見光分光光度計檢測清液中PEBP4蛋白的濃度;采用聚丙烯酰胺凝膠電泳法對清液進行蛋白分離處理，然后封閉60 min，加入上?？泼羯锟萍加邢薰咎峁┑纳窖蚩筆EBP4多克隆抗體（1：1000）、北京普利萊（Applygen）基因技術(shù)有限公司提供的兔免疫β-actin多克隆抗體（1：5000），低溫（4℃）保存12 h，使用上海信帆生物科技有限公司提供的TBST緩沖液洗滌，使用北京百奧萊博科技有限公司提供的化學(xué)發(fā)光試劑光澤精進行自顯影;對患者進行免疫組化分析，將腫瘤病灶標本進行包埋、切片、組織學(xué)染色處理，在高倍顯微鏡輔助下進行腫瘤細胞觀察，選取5個清晰的視野，每個視野選取100個腫瘤細胞進行觀察。

1.4觀察指標? 比較三組PEBP4 mRNA、PEBP4蛋白相對表達量及PEBP4陽性率。以陽性細胞染色強度評分與染色陽性細胞數(shù)評分之和為陽性判定依據(jù);陽性細胞染色強度：0分：細胞不著色;1分：細胞呈淡黃色著色;2分：細胞呈黃色著色;3分：細胞呈褐色著色。染色陽性細胞數(shù)率：0分：染色細胞占0%～5%;1分：染色細胞占6%～25%;2分：染色細胞占26%～50%;3分：染色細胞占50%以上。PEBP4陰性表達：總分在1～2分;PEBP4陽性表達：總分在3～9分。

1.5 統(tǒng)計學(xué)方法? 采用SPSS 20.0軟件進行數(shù)據(jù)處理，計量資料以（x±s）表示，組間比較用獨立樣本F檢驗，組內(nèi)比較用配對樣本t檢驗，計數(shù)資料用（%）表示，行？字2檢驗，P<0.05為差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1三組PEBP4 mRNA和PEBP4蛋白相對表達量比較? A組、B組、C組患者PEBP4 mRNA和PEBP4蛋白相對表達量依次升高，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），見表1。

2.2 PEBP4陽性表達情況? 棕黃色、黃色是PEBP4陽性表達的標志，鏡下可見腫瘤細胞細胞膜、細胞質(zhì)呈棕黃色、黃色顆粒狀。150例患者中PEBP4陽性表達143例，檢出率為95.33%。

3討論

腦膠質(zhì)瘤臨床具有高發(fā)病率、高復(fù)發(fā)率、高死亡率、低治愈率等特點，屬于惡性腫瘤，極易發(fā)生癌細胞轉(zhuǎn)移。在臨床治療時，無論是手術(shù)，還是放化療，均不能完全清除潛伏的腫瘤細胞，因此其復(fù)發(fā)率較高。臨床將復(fù)發(fā)性腦膠質(zhì)瘤分為四個等級，研究發(fā)現(xiàn)每個等級患者PEBP4表達差異明顯，因此將PEBP4表達作為復(fù)發(fā)性腦膠質(zhì)瘤患者病情診斷依據(jù)具有可行性[5]。

本次研究中，A組、B組、C組患者PEBP4 mRNA和PEBP4蛋白相對表達量逐漸升高，PEBP4陽性表達143例，檢出率為95.33%，PEBP4在不同等級復(fù)發(fā)性腦膠質(zhì)瘤患者中表達明顯，其陽性檢出率相對較高，可以作為臨床診斷與治療復(fù)發(fā)性腦膠質(zhì)瘤的參考依據(jù)。PEBP4是一種胞質(zhì)可溶性蛋白，參與多種信號通路轉(zhuǎn)導(dǎo)，能夠促進腫瘤的浸潤、增殖與轉(zhuǎn)移，患者機體內(nèi)PEBP4表達越高，表示患者病情越嚴重，有效生存期越短。另外，PEBP4能夠增加機體膽堿乙酰轉(zhuǎn)移酶分泌，而膽堿乙酰轉(zhuǎn)移酶是多種腫瘤發(fā)展的影響因子，因此PEBP4能夠從促進復(fù)發(fā)性腦膠質(zhì)瘤的發(fā)展，PEBP4表達量越高，患者腦膠質(zhì)瘤分級等級越高。PEBP4的高表達在非小細胞肺癌的癌細胞活力、生存周期、細胞凋亡以及癌細胞遷移擴散等方面起到促進作用，臨床參考價值巨大。本次研究發(fā)現(xiàn)復(fù)發(fā)性腦膠質(zhì)瘤病情越嚴重，患者PEBP4表達越高，與上述結(jié)論一致。

綜上所述，PEBP4在不同等級復(fù)發(fā)性腦膠質(zhì)瘤患者中表達明顯，其陽性檢出率相對較高，可以作為臨床診斷與治療復(fù)發(fā)性腦膠質(zhì)瘤的參考依據(jù)。

參考文獻：

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收稿日期：2019-10-23;修回日期：2019-11-07

編輯/王朵梅