東莞地區(qū)幽門螺桿菌對(duì)常用抗菌藥物的體外耐藥情況

葉襯軒 虞瑞珠

在全球發(fā)生感染的菌種中幽門螺桿菌為一類感染率極高的細(xì)菌,且其隨年齡的增長(zhǎng)感染率呈現(xiàn)上升的趨勢(shì)。日常,幽門螺桿菌感染與消化科具有緊密的相關(guān)聯(lián)性,與此同時(shí),與胃黏膜相關(guān)淋巴組織淋巴瘤及胃癌具有密切相關(guān)性。臨床上,幽門螺桿菌為消化性潰瘍、慢性胃炎、反流性食管炎等病的主要致病菌,目前根除幽門螺桿菌為治療上述病的一種關(guān)鍵療法［1］。幽門螺桿菌感染臨床癥狀明顯,常先用質(zhì)子泵抑制劑給予緩解,患者病情控制后再根除幽門螺桿菌［1,2］。有研究顯示近來對(duì)幽門螺桿菌根除療效低,不理想,其發(fā)生的原因可能為幽門螺桿菌菌株對(duì)根除藥物耐藥外,還包括質(zhì)子泵抑制劑選擇應(yīng)用時(shí)機(jī)的影響。幽門螺桿菌相關(guān)性胃病治療后有不良反應(yīng),耐藥性強(qiáng)且藥物價(jià)格昂貴,依從性能較差,根治率逐年呈下降態(tài)勢(shì),生活質(zhì)量受到嚴(yán)重影響［3-5］。感染各類菌種中,幽門螺桿菌是感染率極高的細(xì)菌,隨年齡不斷增長(zhǎng),感染率呈大幅上升。幽門螺桿菌感染后首先需治療,可明顯降低潰瘍復(fù)發(fā)率,減少消化性潰瘍出血事件［6］。目前臨床中對(duì)根除幽門螺桿菌時(shí)仍存在系列問題。在臨床中藥物應(yīng)用較普遍,尤其對(duì)感染性治療發(fā)揮重要作用,醫(yī)學(xué)領(lǐng)域抗生素極大的促進(jìn)了各類疾病的治療。但近來,隨著各種抗生素的出現(xiàn),其濫用現(xiàn)象越來越明顯。濫用現(xiàn)象如光譜抗生素的生產(chǎn)應(yīng)用及抗生素不合理聯(lián)用等同時(shí)增加了耐藥菌種,并促進(jìn)其迅速播散,不僅使抗生素療效降低且存在較大的負(fù)面性,對(duì)控制感染性疾病具有較大難度,且在治療上存在一定的挑戰(zhàn)性,為感染患者康復(fù)帶來困擾［7,8］。

本實(shí)驗(yàn)是以東莞地區(qū)消化性潰瘍患者為研究對(duì)象,對(duì)患者的性別、年齡、職業(yè)、等進(jìn)行調(diào)查研究,通過提取臨床上病灶組織進(jìn)行研究,并對(duì)常見的幾種藥物進(jìn)行藥敏測(cè)試,分析這幾種藥物敏感性的差異,為臨床診斷和治療幽門螺桿菌提供有效治療方法。因此,本文通過對(duì)東莞幽門螺桿菌對(duì)常用抗菌藥物的耐藥性予以分析,希望今后經(jīng)干預(yù)后降低病發(fā)率、耐藥性,進(jìn)一步達(dá)到未病先防的目的,指導(dǎo)幽門螺桿菌的預(yù)防與控制。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇東莞院內(nèi)2018 年10 月～2019 年7 月進(jìn)行胃內(nèi)窺鏡檢查的88 例消化性潰瘍患者作為研究對(duì)象,其中男47 例,女41 例。見表1。患者符合《內(nèi)科學(xué) 》診斷疾病標(biāo)準(zhǔn)。患者均經(jīng)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)且同時(shí)簽署知情同意書。在此階段無嚴(yán)重的其他疾病如精神病、嚴(yán)重器質(zhì)性病或慢性病,排除需長(zhǎng)期服藥、妊娠及哺乳期婦女。

表1 88 例患者一般資料(n)

1.2 方法

1.2.1 培養(yǎng)菌株并分離 無菌條件下取出患者胃黏膜組織,2 h 內(nèi)接種于含選擇性抑制劑哥倫比亞培養(yǎng)基內(nèi),反復(fù)涂抹在培養(yǎng)基表面部位,盡可能使組織接觸到培養(yǎng)基。立即接種哥倫比亞培養(yǎng)基在培養(yǎng)罐內(nèi),使微需氧產(chǎn)氣袋放于密封培養(yǎng)罐后置在35℃恒溫培養(yǎng)箱,培養(yǎng)5 d 后,觀察結(jié)果［9］。

1.2.2 菌株的鑒定 打開培養(yǎng)皿觀察內(nèi)部菌落形態(tài),挑出優(yōu)勢(shì)菌落或疑似菌落為革蘭染色,革蘭染色陰性菌落做尿素酶、氧化酶、過氧化氫試驗(yàn),若試驗(yàn)結(jié)果顯陽性可鑒定出幽門螺桿菌。陽性菌落轉(zhuǎn)種四區(qū),然后劃線培養(yǎng)2 d,獲取單個(gè)菌落。根據(jù)菌種在特殊培養(yǎng)基上的生長(zhǎng)速度、菌落的形態(tài)、顏色以及在顯微鏡下菌絲的形態(tài)、生長(zhǎng)排列、孢子的大小和形狀等特點(diǎn)進(jìn)行鑒定。

1.2.3 藥敏試驗(yàn) 無菌棉簽蘸細(xì)菌配制成細(xì)菌懸液,菌液水平相當(dāng)2 麥?zhǔn)蠁挝弧Ｈ缓笥脽o菌棉簽蘸菌液,將管內(nèi)壁多余菌液旋轉(zhuǎn)擠去,M-H 瓊脂表面均勻三次接種,而每次旋轉(zhuǎn)平板的角度為60°,最后階段沿平板涂抹1 周時(shí)間。平板置室溫環(huán)境下,干燥5 min,用無菌鑷Etest 試紙條貼于瓊脂表面。在平板上迅速置培養(yǎng)罐中放快速微需氧產(chǎn)氣袋,最后蓋好,設(shè)置恒溫培養(yǎng)箱 35℃,培養(yǎng)5 d 后,觀察結(jié)果［10-13］。

2 結(jié)果

2.1 分離培養(yǎng)、鑒定結(jié)果 88 份胃黏膜標(biāo)本分離出63 株幽門螺桿菌菌株,觸酶、氧化酶、尿素酶生化反應(yīng)均為陽性,63 株菌株均達(dá)到了幽門螺桿菌鑒定標(biāo)準(zhǔn)。

2.2 藥敏試驗(yàn)結(jié)果 幽門螺桿菌對(duì)甲硝唑的耐藥性最高,為76.2%,其次為左氧氟沙星、克拉霉素,分別為46.0%、34.9%。見表2。

表2 63 株幽門螺桿菌菌株對(duì)5 種抗菌藥物體外藥物敏感性試驗(yàn)結(jié)果［n(%)］

3 討論

澳大利亞學(xué)者首從胃黏膜的活檢組織中分離出幽門螺桿菌,研究者對(duì)幽門螺桿菌 的一系列相關(guān)研究已深入探討,除公認(rèn)幽門螺桿菌感染與慢性胃炎、胃潰瘍、胃癌等多病變存在一定密切關(guān)聯(lián)外,有相關(guān)研究表明,近來在心腦血管、免疫性病、營(yíng)養(yǎng)代謝病、皮膚病等發(fā)病進(jìn)程中幽門螺桿菌感染也有一定作用。治療時(shí),根除幽門螺桿菌可大大降低潰瘍復(fù)發(fā)、消化性潰瘍出血。但目前臨床治療幽門螺桿菌感染仍有多類問題,如對(duì)藥物、劑量、治療時(shí)機(jī)的選擇。質(zhì)子泵抑制劑是一類較為有效的抑制胃酸類分泌性藥,聯(lián)合抗生素使用時(shí)可共同根除幽門螺桿菌［14-16］。在這方面報(bào)道中,采用質(zhì)子泵抑制劑后可對(duì)幽門螺桿菌造有多方面影響,包括治療時(shí)機(jī)、方法選擇不適宜等,可對(duì)幽門螺桿菌根除率有直接影響。而多數(shù)研究中,感染幽門螺桿菌的一種主要途徑是在進(jìn)餐中可能被細(xì)菌污染餐具、食物或飯前手臟等,經(jīng)口腔時(shí)幽門螺桿菌入胃部,并牢固附著于損傷胃黏膜,幽門螺桿菌病原微生物經(jīng)黏液層定位在胃上皮細(xì)胞表面,為病菌提供了優(yōu)越的繁衍條件［17］。全球已有的感染菌種中,幽門螺桿菌感染率極高,與此同時(shí),隨年齡增長(zhǎng)感染率上升幅度大。在亞健康人群中幽門螺桿菌存在普遍性,也是消化系統(tǒng)病的一類主要誘因［18］。對(duì)本區(qū)幽門螺桿菌感染相關(guān)性進(jìn)行系列相關(guān)調(diào)查研究,會(huì)有助于制定出幽門螺桿菌感染的診療方案,采用預(yù)防性手段干預(yù)針對(duì)性降低發(fā)病率及耐藥性,降低臨床抗生素使用量,達(dá)到未病先防目的［19,20］。

本研究的結(jié)果顯示知,88 份胃黏膜標(biāo)本分離出63 株幽門螺桿菌菌株,觸酶、氧化酶、尿素酶生化反應(yīng)均為陽性,63 株菌株均達(dá)到了幽門螺桿菌鑒定標(biāo)準(zhǔn)。幽門螺桿菌對(duì)甲硝唑的耐藥性最高,為76.2%,其次為左氧氟沙星、克拉霉素,分別為46.0%、34.9%。綜合以上研究結(jié)果在幽門螺桿菌感染治療中阿莫西林為本地根除幽門螺桿菌的主要治療藥物。因此,在治療幽門螺桿菌感染前,需檢測(cè)常見抗菌藥耐藥性,對(duì)臨床合理使用抗菌藥有重要的臨床作用。因此,在臨床治療中,若幽門螺桿菌根除失敗,其可能與耐藥性有關(guān),但也有必要考慮其他影響因素,為治療幽門螺桿菌提供新途徑。

綜上所述,在臨床感染幽門螺桿菌患者中采用抗菌類藥物進(jìn)行干預(yù)時(shí)選擇合理藥物,可有效提高抗菌類藥物利用率,預(yù)防不良反應(yīng)發(fā)生情況。