改良六胺銀染色法在真菌染色中的應用

邢 杰，吳佳君，葉 敏，秦 鋼，趙蘭香，余科科，張 杰，韓昱晨

近年來，隨著廣譜抗生素的濫用、免疫抑制劑和抗腫瘤藥物的廣泛使用，加之外科介入性治療的不斷發展與成熟，使得系統性真菌感染在原有的基礎上日益增多。尤以肺部真菌感染位居首位，超半數的真菌感染會侵犯支氣管、肺部，然而其癥狀和影像學表現均缺乏特異性，因此在病理上準確診斷出真菌感染顯得極其重要[1-4]。隨著診斷試劑盒不斷的更新，雖然染色方法越來越簡便，效果也越來越好，但同時也導致越來越多的技術員并不能很好的理解六胺銀特殊染色方法的原理和過程。上海交通大學附屬胸科醫院病理科至今仍然使用手工配制試劑進行染色，并且不斷改良配方，取得了很好的效果，現介紹如下。

1 材料與方法

1.1 材料 隨機選取2016年上海市胸科醫院病理科存檔的六胺銀陽性病例20例，為保證實驗結果評價的一致性，均選用手術切除標本。每例標本連續切片3張，分別用于原六胺銀試劑染色、改良六胺銀試劑染色、六胺銀試劑盒染色。

1.2 試劑配制 六胺銀染色試劑盒購自Baso公司。六胺銀染色試劑的配制[5]：(1)高碘酸溶液(原方法使用0.5%高碘酸溶液，改良法使用1%高碘酸溶液)；(2)六胺銀儲備液的配制，將3%六次甲基四胺水溶液100 mL加入到5 mL的5%硝酸銀溶液中即形成白色沉淀，搖動可使沉淀立即溶解，澄清后放置于4 ℃冰箱中保存；(3)六胺銀工作液的配制，將3 mL 5%的四硼酸鈉加入到25 mL的蒸餾水中混合均勻，然后加入15 mL的六胺銀儲備液，攪拌混合均勻后即可使用；……