原發(fā)性肝細胞癌組織中CYP2J2和EETs的表達及臨床意義

徐 強，宋 蒨，周 瑜，徐元豐，巢浩強， 石紅建

原發(fā)性肝細胞癌(hepatocellular carcinoma, HCC)是全球較為常見且惡性度較高的腫瘤，其病死率僅次于肺癌和胃癌，位居第3位，發(fā)病率居第5位[1-2]。由于HCC早期無明顯癥狀，且較早即發(fā)生肝內(nèi)外轉(zhuǎn)移，確診時大多已是中晚期，治療效果較差，嚴重影響患者的生存期[3-5]。環(huán)氧二十碳三烯酸(epoxyeicosatrienoic acids, EETs)是機體花生四烯酸的代謝產(chǎn)物，在促進組織再生和血管生成方面發(fā)揮重要作用，有研究顯示EETs可促進腫瘤細胞的增殖和腫瘤血管的生成[6]。細胞色素P450表氧化酶2J2(cytochrome P450 arachidonic acid epoxygenase 2J2, CYP2J2)屬于P450同工酶家族，是EETs的新型代謝途徑，具有調(diào)節(jié)血管活性和細胞增殖等功能[7]。相關(guān)研究結(jié)果顯示，EETs、CYP2J2與多種腫瘤的發(fā)生、發(fā)展有關(guān)，但在肝癌中的作用未見相關(guān)報道[5-7]。本實驗將探討HCC中EETs、CYP2J2的表達及其與臨床病理學(xué)特征、預(yù)后的相關(guān)性，旨在為肝癌患者的診療及評估預(yù)后提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料 收集2013年1月～2016年12月江蘇大學(xué)附屬武進人民醫(yī)院經(jīng)病理確診的86例HCC石蠟包埋組織為研究對象。收集患者的臨床病理資料?；颊吣挲g34～65(48.31±8.21)歲。入組標準：(1)臨床信息完整；(2)均接受根治性HCC切除術(shù)，經(jīng)病理確診為HCC；(3)均為初使治療，術(shù)前均未行放、化療；(4)診斷及分期符合美國癌癥聯(lián)合委員會(AJCC)第7版標準。

1.2 免疫組化 采用免疫組化SP法檢測HCC組織中EETs、CYP2J2的表達。具體步驟：將標本用10%的中性福爾馬林固定，石蠟包埋，4 μm厚連續(xù)切片，放入恒溫烤箱烤片。常規(guī)脫蠟脫水，PBS沖洗，檸檬酸高壓修復(fù)，滴加對應(yīng)一抗EETs(美國CST公司)、CYP2J2(美國Santa Cruz Biotechnol公司)，4 ℃冰箱過夜，PBS沖洗，滴加對應(yīng)二抗，PBS沖洗，滴加DAB顯色，蘇木精復(fù)染，中性樹膠封固。……