Ube2s 在小鼠卵泡發育和黃體形成過程中的表達研究

吳 浩，于浩楠，倪 華

（東北農業大學生命科學學院，黑龍江哈爾濱 150030）

卵巢是雌性哺乳動物重要的生殖器官之一，其主要功能是產生卵子和分泌類固醇激素[1]。蛋白泛素化修飾屬于翻譯后修飾，受到該修飾的蛋白質參與細胞周期調控[2]、DNA 修復[3-4]、細胞凋亡[5]和癌癥發生[6-10]等一系列生理過程。有研究表明，泛素化參與卵巢生理過程，例如泛素連接酶CRL4 復合體可以維持卵母細胞的存活，在雌性生殖力維持中發揮至關重要的作用[11]。

蛋白泛素化由泛素活化酶E1、泛素結合酶E2、泛素連接酶E3 3 種酶共同完成[12]，其中E2 能夠控制泛素鏈的開始和延長轉換，調節鏈形成和持續合成能力，從而決定泛素鏈的長度和連接類型，對泛素鏈的組裝起重要的調控作用[13-14]。泛素結合酶E2 S（Ubiquitin Conjugating Enzyme E2 S，Ube2s）是E2 家族成員。有研究表明，Ube2s介導K11 連接的多聚泛素鏈，參與DNA 損傷修復[4]；Ube2s延長Ube2c 介導的泛素鏈，降解周期蛋白B1 促進有絲分裂[15]，但Ube2s在卵巢中的表達及功能研究沒有報道。本研究以小鼠為動物模型，利用原位雜交、免疫組織化學和實時熒光定量PCR 技術，結合不同日齡小鼠卵巢發育模型、孕馬血清促性腺激素（PMSG）誘導卵泡發育模型、人絨毛膜促性腺激素（hCG）誘導的排卵模型和黃體形成與退化模型，研究Ube2s在小鼠卵巢組織中的表達變化，為闡明泛素化在卵巢生理過程中的調控機制提供實驗依據。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 實驗動物 中國昆明白色近交品系小鼠。人工控制條件下飼養，室溫23～25℃，光照周期為12 h 光照，12 h 黑暗，自由取食及飲水。

1.2 實驗動物模型