白菜凍干粉降糖作用的初步藥效學研究

劉鈺瑩，王 宏，段玉樺，湯凌燕，陳曉青，黃 文，凌智群*

（1.江漢大學醫學院，湖北 武漢 430056；2.華中農業大學食品科學技術學院，湖北 武漢 430070）

《食療本草》：“菘菜，治消渴”，“菘菜”是指十字花科蕓薹屬白菜類蔬菜中的青菜（Brassica chineninL.）和結球白菜（B.pekinensisRupr.）[1-2]。文獻顯示在地中海飲食中，十字花科蔬菜（其中包含white cabbage）在防治慢性疾病如糖尿病、肥胖等中扮演著重要的角色[3-4]。

糖尿病屬于中醫“消渴病”的范疇，中醫藥在治療消渴病方面有獨特的優勢和療效。糖尿病前期是介于糖尿病與正常糖代謝之間的一種狀態，中醫學提倡“防未病”理念，在糖尿病前期這個階段若能及時運用具有中醫特色的干預措施，如藥食同源的食療，不僅能夠減少糖尿病進一步發展以及相關不良作用的產生，還能減輕社會經濟負擔[5]。鑒于國內沒有大白菜、卷心菜等白菜類蔬菜對糖尿病前期血糖影響的相關文獻報道，本文初步探討自制白菜類作物凍干粉（Chinese Cabbage Freeze-Dried Powder，CCFDP）對高糖高脂飼料飼養小鼠血糖、血脂的影響。

1 材料和方法

1.1 試驗材料

1.1.1 材料與試劑

新鮮白菜類蔬菜：市售白菜；無特定病原體（Specific Pathogen Free，SPF）級試驗動物雄性昆明小鼠（華中科技大學實驗動物中心提供，許可證號：SCXK（鄂）2016-0009）。

總膽固醇（T-CHO）、甘油三酯（TG）、高密脂蛋白（HDL-C）、低密脂蛋白（LDL-C）試劑盒（酶標儀法）：均來自南京建成生物工程研究所；高糖高脂滅菌全價飼料（萬千佳興生物科技有限公司，產品批號：190001104），配方如下：基礎料（47.71%），蔗糖（14.31%），豬油（10.50%），蛋黃粉（20.04%），膽固醇（1.43%），膽酸鈉（0.286%），酪蛋白（0.954%），進口魚粉（4.77%）；普通維持飼料（華中科技大學同濟醫學院實驗動物中心）；其他試劑均為國產分析純。

1.1.2 試驗儀器

OneTouch Verio Flex血糖儀和血糖試紙（強生中國醫療器材有限公司）；萬分之一電子計數天平（梅特勒-托利多儀器上海有限公司）。

1.2 試驗方法

1.2.1 CCFDP的制備方法

CCFDP制備程序依次為：新鮮白菜類蔬菜去掉蟲癭腐爛葉→清洗干凈→切成丁條狀→粉碎成粉末漿→快速冷凍至白菜粉漿中心溫度為-20 ℃以下→真空冷凍干燥→產品4 ℃密閉干燥保存備用。

1.2.2 實驗動物條件和分組

SPF級雄性昆明小鼠，體重18～22 g，室溫（20±2）℃，相對濕度45%～55%，光照時間7：00—19：00，自由飲食和飲水。適應環境5 d后，測其空腹血糖和餐后2 h的血糖，篩掉血糖過高或過低的小鼠，且剩余合格小鼠餐后2 h血糖值沒有統計學差異。

將合格的90只小鼠隨機分為6組：正常對照組、高糖高脂飼料飼養造模對照組、造模+同時口服灌胃CCFDP低劑量水溶液組（150 mg/（kg·d））、造模+同時口服灌胃CCFDP高劑量水溶液組（1 500 mg/（kg·d））、造模+造模15 d后再同時口服灌胃CCFDP低劑量水溶液組（150 mg/（kg·d））、造模+造模15 d后再同時口服灌胃CCFDP高劑量水溶液組（1 500 mg/（kg·d）），見表1。各口服灌胃CCFDP組每天口服灌胃1次，正常對照組及造模對照組灌胃等體積生理鹽水。

1.2.3 血糖采集和測定

在連續口服灌胃CCFDP水溶液45 d或30 d后的第2天，在各組小鼠餐后2 h，取小鼠的尾端靜脈血檢測血糖值。其后，摘眼球采血后脫臼處死，4 ℃靜置1 h后3 000 r/min離心5 min，收集血清，-20 ℃貯藏備用。并在采樣后2 d內，參照試劑盒說明書指導檢測血清中T-CHO、TG、HDL-C、LDL-C等指標。

表1 造模及口服灌胃方法

1.2.4 統計學方法

試驗結果采用X±SD表示，采用Excel進行統計學分析，比較組間差異，P＜0.01為具有極顯著差異，有統計學意義。

2 結果與分析

2.1 CCFDP對高糖高脂飼料飼養小鼠餐后2 h血糖的影響

表2中數據顯示：與正常對照組相比，高糖高脂飼料飼養造模對照組小鼠餐后2 h血糖值顯著升高，符合糖尿病前期血糖值的范圍要求。造模+同時高、低口服灌胃CCFDP水溶液45 d組小鼠餐后2 h血糖值顯著低于造模組；造模+造模15 d后再同時口服灌胃CCFDP高、低劑量30 d組的餐后血糖值與造模小鼠餐后值有顯著差異。數據結果還提示：口服灌胃CCFDP水溶液，不僅可以降低糖尿病前期血糖值，而且可以使得造模給藥小鼠血糖值比正常對照組小鼠血糖值還低，與造模前小鼠（正常小鼠，7周前）餐后血糖值相似，在6.0～7.3 mmol/L左右的區間范圍。

2.2 CCFDP對高糖高脂飼料飼養小鼠餐后2 h血脂的影響

表2中數據顯示：與正常對照組相比，高糖高脂飼料飼養造模對照組小鼠餐后2 h血清T-CHO、TG、HDL-C、LDL-C值升高顯著。與造模對照組比較，造模+同時高、低口服灌胃CCFDP水溶液45 d組小鼠餐后2 h血清TG值顯著降低，相應的低劑量組LDL-C值顯著降低；造模+造模15 d后再同時口服灌胃CCFDP高、低劑量30 d組的餐后血清LDL-C值與造模小鼠餐后值顯著降低，相應的高劑量組TG值顯著降低，T-CHO、HDL-C這2個指標變化不明顯。從表2中數據來看，低劑量口服CCFDP 30 d對TG沒有統計學影響，高劑量口服CCFDP 45 d對LDL-C沒有統計學影響，因此可以說明：在一定的給藥濃度范圍內能影響血清TG、LDL-C值。

3 結論與討論

餐后血糖是早期診斷糖尿病的重要指標，代表著葡萄糖負荷后的血糖水平，也對預防糖尿病并發癥的發生有著重要作用。本次試驗造模所采用的方法是通過長時間高糖高脂飼料飼養引起小鼠的血糖升高，模擬平時飲食偏愛高熱量高甜度的人群習慣，因而導致早期糖尿病血糖變化。盡管試驗結果顯示150 mg/（kg·d）CCFDP同時口服灌胃45 d或1 500 mg/（kg·d）CCFDP在高糖高脂飼料飼養15 d后再同時口服灌胃30 d都能有效降低高糖高脂飼料飼養小鼠的餐后血糖值以及血清總甘油三酯和低密脂蛋白，但似乎沒有量效關系，提示其作用機理可能與傳統的降糖化合物的作用機制不同[8-10]，相關機制尤其是涉及鈉-葡萄糖協同轉運蛋白2的研究還有待進一步深入研究。此外，CCFDP對總膽固醇血清值似乎沒有影響，可能是因為在CCFDP水溶液中纖維素的溶解性低所致。

表2 各組小鼠的餐后2 h血糖值以及血清T-CHO、TG、HDL-C、LDL-C值 mmol/L

綜上所述，低劑量CCFDP能顯著降低高糖高脂飼料飼養小鼠的餐后血糖，對于早期糖尿病餐后血糖有一定的防治效果，為糖尿病早期防治提供參考。若能對藥食同源白菜類蔬菜中化學成分如膳食纖維、維生素、多酚類化合物、硫代葡萄糖苷等諸多成分的活性或活性協同作用進一步深入系統研究，無論在種植還是在后期加工的過程中，都可以為構建類似中藥全程質量控制體系標準提供一定的數據參考和理論基礎。