高效液相色譜—串聯質譜法同時檢測豬肉中125種獸藥殘留

徐偉 耿士偉 劉路 楊晨 程鳳科 劉立軍

摘 ? ?要：本方法建立了豬肉中包括磺胺類、喹諾酮類、硝基咪唑類、氯霉素類、β-受體激動劑類、大環內酯類、苯并咪唑類、糖皮質激素類等在內的125種獸藥的高效液相色譜—串聯質譜（HPLC-MS/MS）同時檢測方法。樣品經使用WondaPak QuEChERS多獸藥殘留專用提取包和凈化包快速前處理后，通過多反應監測模式檢測。對空白樣品添加濃度1.0，5.0和10.0 μg·kg-1后，考察回收率和相對標準偏差（RSD），結果顯示：1.0 μg·kg-1加標濃度的平均回收率為42.06%～121.14%，RSD為2.36%～19.07%;5.0 μg·kg-1加標濃度的平均回收率為55.10%～112.84%，RSD為2.50%～19.65%;10.0 μg·kg-1加標濃度的平均回收率為56.44%～114.57%，RSD為1.08%～18.45%。結果表明該方法具有前處理簡便、測定時間短、通量大、重現性和準確度好等優點。

關鍵詞：高效液相色譜-串聯質譜法;同時檢測;125種獸藥;殘留

中圖分類號：TS251.5+1; S859.84 ? ? ? ? 文獻標識碼：A ? ? ? ? ?DOI 編碼：10.3969/j.issn.1006-6500.2020.02.012

Simultaneous Determination of 125 Veterinary Drug Residues in Pork by High Performance Liquid Chromatography-Tandem Mass Spectrometry

XU Wei1， GENG Shiwei2， LIU Lu1， YANG Chen1， CHENG Fengke1， LIU Lijun3

（1.Suqian Inspection Center of Agricultural and Animal Products Quality， Suqian， Jiangsu 223800， China; 2. Jiangsu Provincial Inspection and Test Center of Animal Product Quality， Nanjing， Jiangsu 210036， China; 3.Yangzhou University， Yangzhou， Jiangsu 225009， China）

Abstract：A high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry （HPLC-MS/MS） method was developed for the simultaneous quantification of 125 veterinary drugs in pork including sulfanilamides， quinolones， nitroimidazoles， chloramphenicola， β-agonists， macrolides， benzimidazoles and glucocorticoids. The meat samples were extracted and purified with WondaPak QuEChERS kits designed for multi-veterinary drug preparation， and then quantified by HPLC-MS/MS in multiple reaction monitoring mode. The method accuracy was investigated by calculating the recovery rates by adding standard mixture into blank sample at different concentrations of 1.0， 5.0 and 10.0 μg·kg-1， respectively. The experiments were repeated three times to evaluate the method reproducibility. The recovery rates of different adding concentrations of 1.0， 5.0 and 10.0 μg·kg-1 were 42.06%～121.14%， 55.10%～112.84% and 56.44%～114.57%， respectively. Correspondingly， the relative standard deviation （RSD） of replications were 2.36%～19.07%， 2.50%～19.65% and 1.08%～18.45%， respectively. The method was indicated to have many merits， including easy sample preparation， short analysis time， high reproducibility and accuracy， which can be used for high-throughput analysis of veterinary in meat samples.

Key words： high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry method; simultaneous determination; 125 veterinary drug; residue

3 結論與討論

3.1 優化了凈化方法

固相萃取因其選擇性高且凈化效果好而成為樣品凈化的首選方式[11-14]，但也正是由于其高選擇性而限制了靶向分析物的范圍。本方法中使用的多獸藥殘留專用凈化包的主要成分是硫酸鎂、N-丙基乙二胺固相吸附劑（PSA）、C18和石墨化碳黑，其中硫酸鎂作用是去除水分，促進水相和有機相分離;PSA的作用是去除脂肪酸類和糖類干擾;C18作用是去除脂肪和非極性化合物干擾;石墨化碳黑的作用是去除色素和甾醇類干擾。試驗結果表明，多殘留凈化包可以有效去除樣品中大部分基質干擾，提高檢測靈敏度，凈化效果明顯，在高通量、多殘留檢測篩選方面優勢突出。

3.2 提升了檢測效率

當前非法使用違禁藥物、濫用抗菌藥和藥物添加劑等行為，是造成我國動物源性食品中獸藥殘留超標、引起畜禽產品安全和食品貿易爭端的主要原因，也給食品安全監管增加了難度。本方法在樣品前處理方面使用了多獸殘專用提取包和凈化包，僅需20 min左右;在上機檢測方面，通過Shimadzu公司的Shim-pack GIST色譜柱16 min對125種獸藥進行分離。整個流程操作簡便，分析速度快，具有良好的重現性和準確度，可以為食品安全檢測機構開展多種獸藥快速篩查提供技術支持，為食品安全監管、執法提供有效的科學依據。

3.3 減少了試劑投入

傳統的獸藥殘留檢測前處理順序為提取、凈化、濃縮和定容[15-16]，其中的凈化環節分為活化、上樣、淋洗和洗脫步驟，基本每個環節（步驟）都需要使用有機試劑，需要有機試劑總量大，對人體傷害和環境污染均造成不同程度的影響。本方法在前處理過程僅需加入10 mL的5%甲酸乙腈溶液，省略了凈化步驟中有機試劑的使用，相對傳統的檢測方法表現出了“低投入、高產出”的優勢，特別是在大批量樣品藥物多殘留檢測時優勢更為明顯，極大減少了有機試劑的投入使用，減輕有機試劑對人體傷害和環境污染程度，更加符合當今環保趨勢。

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