離子色譜儀-電化學(xué)檢測器法分析白酒中的氰化物

羅文業(yè)，沈 毅，周 艷，何世興，時 源，陳 振，徐 源

（四川省古藺郎酒廠有限公司，四川古藺 646523）

氰化物是指帶有氰基(CN)的化合物，其結(jié)構(gòu)由一個碳原子和一個氮原子通過叁鍵相連接。氰化物在自然界廣泛存在，并存在于相當(dāng)多的食物與植物中。植物中的氰化物通常以含氰苷(cyanogenic glycoside)形式存在。如常見的木薯、苦杏仁、亞麻籽、豆類、高粱等食物中都有氰苷的存在。白酒中的氰化物就與制作的原料有關(guān)。現(xiàn)在釀酒原料雖然多為原糧（如高粱、小麥、大麥、豆類、玉米等），但這些原糧中還是含有一些植物氰甙，釀造過程中氰甙經(jīng)過水解可產(chǎn)生微量氰化物進入酒體中，通常是以氫氰酸（HCN）形式存在。因此，以糧食為原料釀造的蒸餾白酒中含有氰化物是正常的，也是不可避免的，不過，通常來說氰化物的含量是很微量的，遠遠低于國家標(biāo)準(zhǔn)[1-4]。

GB 5009.36—2016[5]《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中氰化物的測定》中規(guī)定食品中氰化物的檢測方法為分光光度法、氣相色譜法、定性法。這3 種方法中分光光度法、氣相色譜法樣品前處理時間長，所需藥品較多且有較強毒性，操作過程復(fù)雜，影響因素多[6]。定性法只能大約判定食品中氰化物含量是否符合要求，定性可以，但不能準(zhǔn)確定量。而采用離子色譜-電化學(xué)檢測器測定白酒中氰化物，樣品前處理簡單，操作簡便。分析結(jié)果準(zhǔn)確，靈敏度極高，檢出限低。

1 材料與方法

1.1 材料、試劑及儀器

樣品：市售酒樣數(shù)個。

試劑及耗材：50∶50 氫氧化鈉溶液；無水乙二胺,優(yōu)級純；三水乙酸鈉,優(yōu)級純；氰根離子標(biāo)準(zhǔn)品溶液，CN-濃度為1000 mg/L。

實驗儀器：ICS-2100 離子色譜儀（美國賽默飛世爾公司），配ED50A 電化學(xué)檢測器和AS-DV 自動進樣器。Chromeleon 6.8 變色龍操作軟件；優(yōu)普超純水制造系統(tǒng)（成都超純科技有限公司）。

1.2 實驗方法

1.2.1 溶液配制

淋洗液：用燒杯稱取68.04 g 三水乙酸鈉，用適量水溶解，倒入1.0 L 容量瓶中。吸取8.0 mL 50∶50 的氫氧化鈉溶液以及5.0 mL 無水乙二胺放入容量瓶中混勻，定容至刻度，得到0.5 M 乙酸鈉+0.1 M 氫氧化鈉+0.5%乙二胺淋洗液。

1 mg/L 氰根離子標(biāo)準(zhǔn)溶液：準(zhǔn)確吸取1.0 mL濃度為1000 mg/L 的氰根離子標(biāo)準(zhǔn)品溶液于1 L 容量瓶中，用超純水稀釋并定容至刻度，置于4 ℃冰箱中保存待用。

氰根離子標(biāo)準(zhǔn)曲線工作溶液：分別準(zhǔn)確吸取1 mg/L氰根離子標(biāo)準(zhǔn)溶液0.0 mL、0.25 mL、0.5 mL、1.0 mL、2.0 mL、4.0 mL，置于100 mL 容量瓶中，用超純水定容，得到0.0 μg/L、2.5 μg/L、5.0 μg/L、10.0 μg/L、20.0 μg/L、40.0 μg/L 的標(biāo)準(zhǔn)曲線工作溶液，于4 ℃冰箱保存待用。

1.2.2 樣品的前處理

容量瓶經(jīng)弱堿性洗滌劑清洗后，再用超純水反復(fù)沖洗干凈，晾干待用。

在50 mL 容量瓶中預(yù)先放入適量超純水，再準(zhǔn)確吸取1 mL 酒類樣品于其中，加入超純水定容至刻度并充分混勻，待測。

1.2.3 儀器工作條件

色譜柱：Dionex IonPacTMAS7(4 mm×250 mm)，或性能相當(dāng)者。保護柱：Dionex IonPac TMAG7(4 mm×50 mm)，或性能相當(dāng)者。淋洗液由0.5 M 醋酸鈉、0.1 M 氫氧化鈉以及0.5%乙二胺組成。流速：1.0 mL/min。進樣體積：125 μL。進樣方式：自動進樣。柱箱溫度：室溫。以保留時間定性，峰面積定量。

1.2.4 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作

將氰根離子濃度分別為0.0 μg/L、2.5 μg/L、5.0 μg/L、10.0 μg/L、20.0 μg/L、40.0 μg/L 的標(biāo)準(zhǔn)溶液，按照儀器工作條件進行離子色譜-電化學(xué)檢測分析，以氰根離子濃度為橫坐標(biāo)，以相應(yīng)濃度的峰面積為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

1.2.5 樣品的測定

將1.2.2 節(jié)中混勻后的樣品倒入自動進樣器樣品瓶中，按要求準(zhǔn)備好后，放在自動進樣器樣品盤上，按照標(biāo)準(zhǔn)曲線制作時的分析條件自動進樣測定。

2 結(jié)果與討論

2.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線和檢測限

測定1.2.1 節(jié)中的氰根離子標(biāo)準(zhǔn)曲線工作溶液，繪制標(biāo)準(zhǔn)工作曲線。按照確定的離子色譜氰化物分析條件，待儀器處于穩(wěn)定狀態(tài)后，按濃度由低到高的順序進樣檢測分析，以氰根離子濃度為橫坐標(biāo)，以峰面積為縱坐標(biāo)，得到氰化物的線性方程和相關(guān)系數(shù)。氰根離子標(biāo)準(zhǔn)溶液色譜圖見圖1。氰根離子標(biāo)準(zhǔn)曲線圖見圖2。計算3 倍信噪比和10 倍信噪比時所對應(yīng)的樣品濃度，分別作為方法的檢出限和定量限。結(jié)果見表1。

2.2 方法精密度和加標(biāo)回收試驗

表1 線性方程、線性范圍及檢出限

取樣品4 個連續(xù)重復(fù)進樣5 次，測得樣品中的氰根離子含量，計算其相對標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）來衡量方法的精密度。同時隨機取樣品4 個，每個取3份，分別添加不同體積的標(biāo)準(zhǔn)溶液，按照1.2.2 節(jié)進行前處理，在1.2.3 節(jié)條件下測定，計算樣品加標(biāo)回收率。精密度分析結(jié)果見表2，RSD 值均小于5%；表3 為4 個酒樣加標(biāo)回收實驗結(jié)果，其回收率在99.0%～100.8%，各項數(shù)據(jù)說明該方法的精密度和回收率都比較良好。

表2 精密度分析結(jié)果

2.3 方法對比

將該方法和GB 5009.36—2016 食品中氰化物的測定方法分析結(jié)果對比。隨機抽取酒樣10 個，分別采用傳統(tǒng)分光光度計比色法和離子色譜儀-電化學(xué)檢測器法檢測分析，同時送第三方有檢測咨質(zhì)的機構(gòu)檢測分析。表4 為分光光度法、離子色譜法和第三方檢測分析結(jié)果比較。從表4 中可以看出，采用離子色譜儀-電化學(xué)檢測器法分析白酒的氰化物與傳統(tǒng)分光光度計比色法和第三方檢測結(jié)果無明顯差異。

3 結(jié)論

本實驗建立的離子色譜電化學(xué)檢測器法檢測白酒中氰化物，采用酒樣直接稀釋進樣分析，可在10 min 內(nèi)就完成整個分析過程。氰化物的檢出限可達到0.8 μg/L，能滿足國標(biāo)GB 2757—2012《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)蒸餾酒及其配制酒》[7]中對白酒氰化物的要求。該方法所需要的樣品量少，樣品處理簡單，離子色譜檢測需要的流動相配制方便，靈敏度高、準(zhǔn)確性好，樣品加標(biāo)回收率在99.0%～100.8%之間。測定結(jié)果準(zhǔn)確度高，可以對白酒中氰化物進行快速、準(zhǔn)確、有效的檢測分析。

表3 樣品加標(biāo)回收率

表4 不同方法分析白酒中氰化物和第三方檢測分析結(jié)果比較