噻酮磺隆·異噁唑草酮懸浮劑高效液相色譜分析

劉 哲，洪德志，祁穎慧，楊金艷，王 雪，穆 卉，趙維儒

(吉林省農(nóng)業(yè)技術(shù)推廣總站，吉林 長春 130033)

1 前言

噻酮磺隆是拜耳作物科學(xué)公司開發(fā)的磺酰氨基羰基三唑啉酮類除草劑，其化學(xué)名稱為甲基4-[(4，5-二氫-3-甲氧基-4-甲基-5-氧代-1H-1，2，4-三唑-1-基)羰基磺酰胺]-5-甲基噻吩-3-羧酸酯?？捎行Х莱衩滋锖瘫究齐s草和闊葉雜草，作用機(jī)制為乙酰乳酸合成抑制劑，具有內(nèi)吸性，能通過植物根部和葉片吸收[1]。異噁唑草酮是由羅納-普朗克公司開發(fā)異噁唑類除草劑，其化學(xué)名稱為：5-環(huán)丙基-4-(2-甲磺?；?4-三氟甲基)苯甲?；悋f唑，主要用于防除玉米和甘蔗田闊葉雜草和禾本科雜草，作用機(jī)制為對(duì)羥基苯基丙酮酸雙氧化酶抑制劑，現(xiàn)由拜耳作物科學(xué)公司生產(chǎn)和銷售[2]。

目前國內(nèi)關(guān)于噻酮磺隆·異噁唑草酮懸浮劑的分析方法未見公開報(bào)道。本文采用高效液相色譜法對(duì)試樣中噻酮磺隆和異噁唑草酮進(jìn)行定量分析，該方法操作快速、簡便、準(zhǔn)確，分離度和精密度均能達(dá)到定量分析的要求。

2 試驗(yàn)部分

2.1 試劑和溶液 乙腈：色譜純；甲醇：色譜純；水：超純水；磷酸：分析純；噻酮磺隆標(biāo)準(zhǔn)品：(98.5%)；異噁唑草酮標(biāo)準(zhǔn)品：(99.6%)；噻酮磺隆·異噁唑草酮懸浮劑(其中噻酮磺隆含量7%、異噁唑草酮含量19%)。

2.2 儀器 高效液相色譜儀：Agilent 1100，具有二極管陣列檢測器和自動(dòng)進(jìn)樣器，20μL定量環(huán)；Agilent色譜工作站；色譜柱：150mm ×3.9mm(id)不銹鋼柱，XTERRA RP18，5μm填充物；過濾器：濾膜0.45μm。

2.3 液相色譜操作條件 流動(dòng)相：甲醇：水(0.1%磷酸水溶液)=50：50(V/V)；流量：0.6mL/min；柱溫：(30±2)℃；檢測波長：220nm；進(jìn)樣體積：5μL，保留時(shí)間：噻酮磺隆約為5.4min，異噁唑草酮約為12.0min。噻酮磺隆和異噁唑草酮標(biāo)樣高效液相色譜圖(圖1)和噻酮磺隆·異噁唑草酮懸浮劑試樣高效液相色譜圖(圖2)。

圖1 噻酮磺隆、異噁唑草酮標(biāo)樣高效液相色譜圖

圖2 噻酮磺隆·異噁唑草酮懸浮劑試樣高效液相色譜圖

2.4 測定步驟

2.4.1 標(biāo)樣溶液的配制 稱取噻酮磺隆標(biāo)樣0.015g(精確至0.000 2g)和異噁唑草酮標(biāo)樣0.045g(精確至0.000 2g)，置于100mL容量瓶中，加入約80mL乙腈溶解，超聲10min，恢復(fù)至室溫后用乙腈稀釋定容，搖勻備用。

2.4.2 試樣溶液的配置 稱取噻酮磺隆·異噁唑草酮懸浮劑試樣0.25g(精確至0.000 2g)，置于100mL容量瓶中，加入約80mL乙腈溶解，超聲10min，恢復(fù)至室溫后用乙腈稀釋定容，搖勻備用。

2.4.3 測定 在上述操作條件下，確認(rèn)儀器基線穩(wěn)定后，連續(xù)注入數(shù)針標(biāo)樣溶液，至相鄰2針標(biāo)樣溶液的響應(yīng)值相對(duì)變化﹤1.5%后，即可按標(biāo)樣、試樣、試樣、標(biāo)樣溶液的順序進(jìn)行測定。

2.4.4 計(jì)算 將測得的2針試樣溶液以及試樣前后2針標(biāo)樣溶液中噻酮磺隆(異噁唑草酮)的峰面積分別進(jìn)行平均。試樣中噻酮磺隆(異噁唑草酮)的質(zhì)量分?jǐn)?shù)數(shù)ω(%)按下式計(jì)算

式中：A1—標(biāo)樣溶液中噻酮磺隆(異噁唑草酮)的峰面積平均值；

A2—試樣溶液中噻酮磺隆(異噁唑草酮)的峰面積平均值；

m1—噻酮磺隆(異噁唑草酮)標(biāo)樣的質(zhì)量，g；

m2—噻酮磺隆(異噁唑草酮)試樣的質(zhì)量，g；

P—標(biāo)樣中噻酮磺隆(異噁唑草酮)的質(zhì)量分?jǐn)?shù)，%。

3 結(jié)果與討論

3.1 色譜條件的選擇 通過Agilent 1100高效液相色譜儀的數(shù)據(jù)采集功能，對(duì)噻酮磺隆和異噁唑草酮進(jìn)行掃描，獲得其紫外波長吸收光譜圖(圖3)。可以看出，噻酮磺隆在220nm 附近有最大吸收。異噁唑草酮在205nm附近有最大吸收(圖3)。為減少干擾，故選擇檢測波長為220nm。

圖3 噻酮磺隆和異噁唑草酮紫外吸收光譜圖

色譜柱選擇常規(guī)的反相填料XTERRA RP18柱。依據(jù)噻酮磺隆、異噁唑草酮物化性質(zhì)，用乙腈作為溶劑溶解樣品，并選擇甲醇和水(0.1%磷酸水溶液)作為流動(dòng)相，為了得到更好的分離效果和峰形，按流動(dòng)相甲醇和水不同比例進(jìn)行試驗(yàn)，當(dāng)流動(dòng)相為：甲醇：水(0.1%磷酸水溶液)=50：50(V/V)，流速0.6mL/min時(shí)，得到滿意的分析結(jié)果，即有效成分之間及雜質(zhì)能得到很好的分離，峰形對(duì)稱，基線平穩(wěn)，峰保留時(shí)間適宜。

3.2 分析方法的線性相關(guān)性試驗(yàn) 準(zhǔn)確稱取噻酮磺隆和異噁唑草酮標(biāo)準(zhǔn)品0.015 4g和0.048 4g(精確至0.000 2g)于100mL容量瓶中，加入約80mL乙腈溶解，超聲10min，恢復(fù)至室溫后用乙腈稀釋定容，搖勻備用。按2.3色譜條件進(jìn)行分析，進(jìn)樣量分別為1、3、5、10、15μL，以質(zhì)量濃度和峰面積進(jìn)行線性回歸分析，得到噻酮磺隆線性方程為Y=5 830.595 07X+14.338 215，線性相關(guān)系數(shù)R2=0.999 9；異噁唑草酮線性方程為Y=2 943.075 63X+21.081 347，線性相關(guān)系數(shù)R2=1.000 0。線性相關(guān)性具體試驗(yàn)結(jié)果詳(表1)。

表1 分析方法的線性相關(guān)性試驗(yàn)結(jié)果

3.3 分析方法的精密度試驗(yàn) 對(duì)同一試驗(yàn)樣品按照上述方法平行測定5次。測得噻酮磺隆和異噁唑草酮標(biāo)準(zhǔn)偏差分別為0.03和0.04，變異系數(shù)分別為0.37%和0.19%(表2)。

表2 分析方法的精密度試驗(yàn)結(jié)果

3.4 方法的準(zhǔn)確度實(shí)驗(yàn) 準(zhǔn)確稱取5個(gè)一定量的試樣，分別加入10mL2.4.1中配制的標(biāo)樣溶液，在上述色譜操作條件下進(jìn)行分析，測得噻酮磺隆的平均回收率為99.68%，異噁唑草酮的平均回收率為99.71%(表3)。

表3 分析方法的準(zhǔn)確度試驗(yàn)結(jié)果

4 結(jié)論

本文建立了一種便捷、快速、靈敏的分析方法測定噻酮磺隆·異噁唑草酮懸浮劑中有效成分含量，其測試濃度范圍內(nèi)線性關(guān)系符合檢測要求，同時(shí)該檢測方法具有良好的準(zhǔn)確度和精密度，是產(chǎn)品質(zhì)量控制的有效可行的分析方法。