青蒿提取物對(duì)犢牛生長(zhǎng)性能和血液參數(shù)的影響

侯 偉

（山東省農(nóng)業(yè)廣播電視學(xué)校菏澤市分校，山東 菏澤 274000）

新生犢牛的免疫系統(tǒng)不夠成熟，使其更易受到病原體和病毒的侵害，從而破壞腸道微生物的平衡，導(dǎo)致一系列疾病，如腹瀉和呼吸系統(tǒng)疾病[1]。尤其是腹瀉，將會(huì)影響犢牛的生長(zhǎng)發(fā)育甚至導(dǎo)致犢牛死亡，從而影響牧場(chǎng)經(jīng)濟(jì)效益。抗生素經(jīng)常被用于犢牛日糧中以促進(jìn)生長(zhǎng)和控制疾病。然而，由于其在動(dòng)物源性食品中的殘留物和耐抗生素病原菌的出現(xiàn)，許多國家已經(jīng)限制或禁止使用抗生素[2]。因此，研究開發(fā)安全有效的飼料添加劑，以減少抗生素在犢牛生產(chǎn)中的應(yīng)用，已受到廣泛關(guān)注。

近年來，中草藥提取物由于其易吸收、功能性強(qiáng)、毒副作用小和無抗藥性等特點(diǎn)而受到人們的廣泛重視。青蒿是一種一年生草本植物，是蒿屬350多種植物中的一種，在我國廣泛分布，還具有極強(qiáng)的抗炎能力[3]。康紅軍研究發(fā)現(xiàn)，將青蒿提取物作為飼料添加劑飼喂斷奶仔豬可以提高仔豬的生產(chǎn)性能和免疫能力[4]。潘存霞等研究指出，青蒿提取物可以提高獺兔的生長(zhǎng)性能和免疫功能[5]。焦華琛等研究表明，青蒿提取物可以降低大鼠心肌炎癥相關(guān)因子的表達(dá)[6]。王建峰等研究發(fā)現(xiàn)，青蒿提取物具有誘導(dǎo)白血病細(xì)胞凋亡的作用[7]。然而，目前關(guān)于青蒿提取物對(duì)犢牛免疫功能影響的報(bào)道極少，仍需進(jìn)一步研究。因此，本試驗(yàn)研究了青蒿提取物對(duì)斷奶前犢牛生長(zhǎng)性能和血液參數(shù)的影響，以探討青蒿提取物是否具有提高犢牛生產(chǎn)力的潛力。

1 材料與方法

1.1 青蒿提取物的制備

青蒿提取物制備過程如下：將風(fēng)干青蒿粉碎后過1 mm篩，隨后將樣品在70%乙醇中提取3次，過濾并在40℃真空蒸發(fā)濃縮成粉末狀，得到青蒿提取物，-20℃保存，備用。

1.2 動(dòng)物、試驗(yàn)設(shè)計(jì)和飲食

將18頭荷斯坦?fàn)倥３錾罅⒓磁c母牛分開，轉(zhuǎn)移至鋪有稻草的單獨(dú)圍欄內(nèi)，并每天更換稻草1次。犢牛出生后一小時(shí)內(nèi)立即飼喂4 L初乳，隨后2 d飼喂初乳（3 L）2次·d-1。從第3天開始，每天分別于07:00、13:00和19:00對(duì)犢牛飼喂牛奶2 L，直至開始斷奶程序。采用單因素試驗(yàn)設(shè)計(jì)，將犢牛（日齡3±0.79 d，體重43.36±2.12 kg）按體重和日齡隨機(jī)分為對(duì)照組和青蒿提取物處理組（試驗(yàn)組，30 mg·d-1·頭-1）。在42 d試驗(yàn)期內(nèi)，青蒿提取物與奶混合后于每天早晨飼喂給犢牛。試驗(yàn)結(jié)束后開始對(duì)犢牛逐漸斷奶。犢牛出生7 d后開始進(jìn)行開食料[干物質(zhì)：（82.57±1.69）%、蛋白質(zhì)：（20.94±0.26）%、中性洗滌纖維：（17.98±0.68）%、鈣：（1.15±0.06%、磷：（0.52±0.03）%]飼喂。整個(gè)試驗(yàn)期內(nèi)，保證犢牛采食和飲水自由。

1.3 樣品采集、處理和測(cè)定

1.3.1 生長(zhǎng)性能和體尺測(cè)定

于試驗(yàn)開始和結(jié)束晨飼前分別測(cè)量犢牛體重，體高，體斜長(zhǎng)和胸圍，同時(shí)記錄每頭犢牛日采食量，并計(jì)算犢牛平均日增重和飼料效率。

1.3.2 糞樣的采集和測(cè)定

根據(jù)Heinrichs等關(guān)于糞便評(píng)分的描述：正常=1；軟到松=2；松散至水狀=3；有水、黏液、帶點(diǎn)血=4；水、黏液和血色=5[8]。試驗(yàn)期內(nèi)，于每天08:00記錄犢牛的糞便評(píng)分。當(dāng)糞便評(píng)分＞3時(shí)判定為犢牛腹瀉，并計(jì)算犢牛的腹瀉發(fā)生率。于試驗(yàn)期末對(duì)犢牛進(jìn)行直腸取糞，并立即測(cè)定糞便pH。

1.3.3 血液的采集和測(cè)定

試驗(yàn)開始和結(jié)束晨飼前分別對(duì)空腹?fàn)倥ｎi靜脈采血，并用真空負(fù)壓管收集血液15 mL，3 500 r·min-1離心15 min，將分離的血清用吸管吸出并轉(zhuǎn)移置1.5 mL清潔離心管中，-20℃保存，待測(cè)。

血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）、谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）、堿性磷酸酶（ALP）、膽固醇（CHOL）、尿素氮（BUN）、甘油三酸酯（TG）和葡萄糖(GLU）含量使用全自動(dòng)生化分析儀（BS-820，上海宇研科學(xué)儀器有限公司生產(chǎn)）進(jìn)行測(cè)定。

根據(jù)試劑盒（南京建成生物工程研究所生產(chǎn)）說明書中測(cè)定方法，分別測(cè)定血清中過氧化氫酶（CAT）、總超氧化物歧化酶（T-SOD）和谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）活性，丙二醛（MDA）含量和總抗氧化能力（T-AOC）。

根據(jù)試劑盒說明書（南京建成生物工程研究所生產(chǎn)）中的描述，采用免疫比濁法測(cè)定血清中免疫球蛋白A/G/M（IgA、IgG、IgM）濃度、雙抗體夾心法測(cè)定可溶性CD4（sCD4）和可溶性CD8（sCD8）濃度。

1.4 數(shù)據(jù)分析

利用Excel整理數(shù)據(jù)，生長(zhǎng)性能和血清相關(guān)指標(biāo)用SAS9.1.2軟件包中的MIXED模型分析，其中試驗(yàn)初始數(shù)據(jù)作為協(xié)變量；糞便評(píng)分、pH和腹瀉率數(shù)據(jù)用SAS軟件包中的ANOVA過程分析，使用SAS中的最小顯著差異程序測(cè)試，結(jié)果以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤”表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 生長(zhǎng)性能

青蒿提取物對(duì)犢牛生長(zhǎng)性能的影響見表1。

表1 青蒿提取物對(duì)犢牛生長(zhǎng)性能的影響

由表1可知，飼喂青蒿提取物犢牛開食料采食量、平均日增重和體高較對(duì)照組顯著提高（P＜0.05），而腹瀉率顯著降低（P＜0.05）。飼料效率、體斜長(zhǎng)、胸圍、糞便pH和糞便評(píng)分在兩組間無顯著差異（P＞0.05）。

2.2 血液生化指標(biāo)

青蒿提取物對(duì)犢牛血液生化指標(biāo)的影響見表2。

表2 青蒿提取物對(duì)犢牛血液生化指標(biāo)的影響

由表2可知，試驗(yàn)組犢牛血液GLU濃度較對(duì)照組犢牛提高16.33%，且達(dá)到顯著水平（P＜0.05）。相反，飼喂青蒿提取物犢牛血液CHOL濃度較對(duì)照組顯著下降31.50%（P＜0.05）。血液AST、ALT、ALP、BUN和TG含量在兩組間無顯著差異（P＞0.05）。

2.3 血液抗氧化指標(biāo)

青蒿提取物對(duì)犢牛血液抗氧化指標(biāo)的影響見表3。

表3 青蒿提取物對(duì)犢牛血液抗氧化指標(biāo)的影響

由表3可知，與對(duì)照組相比，試驗(yàn)組犢牛血液T-SOD濃度提高11.04%，且達(dá)到顯著水平（P＜0.05）；而處理組間CAT、GSH-Px、MDA和T-AOC含量無顯著差異（P＞0.05）。

2.4 血液免疫指標(biāo)

青蒿提取物對(duì)犢牛血液免疫指標(biāo)的影響見表4。

表4 青蒿提取物對(duì)犢牛血液免疫指標(biāo)的影響

由表4可知，與對(duì)照組相比，試驗(yàn)組犢牛血液IgA、IgG和sCD4濃度分別顯著提高28.30%、39.42%和16.65%（P＜0.05）。然而，兩組間IgM和sCD8含量無顯著差異（P＞0.05）。

3 討論

3.1 青蒿提取物對(duì)犢牛生長(zhǎng)性能的影響

眾所周知，在斷奶前優(yōu)化犢牛生長(zhǎng)發(fā)育和健康狀況對(duì)其隨后的生產(chǎn)性能至關(guān)重要，且有利于提高牧場(chǎng)的經(jīng)濟(jì)效益。本試驗(yàn)中，飼喂青蒿提取物犢牛的平均日增重較對(duì)照組顯著提高，原因可能是飼喂青蒿提取物后犢牛具有更好的健康狀態(tài)。飼喂青蒿提取物后犢牛的腹瀉率降低，表明犢牛更加健康。腹瀉率降低的原因可能是青蒿提取物抑制了犢牛腸道病原菌的生長(zhǎng)。與本試驗(yàn)結(jié)果一致，康紅軍研究指出，青蒿提取物具有降低斷奶仔豬腹瀉率的功能[4]。另一方面，飼喂青蒿提取物后犢牛開食料采食量增加，說明犢牛收獲了更多的營(yíng)養(yǎng)物，從而有利于其生長(zhǎng)。這一結(jié)果與韓洪英等得出的結(jié)果一致，發(fā)現(xiàn)添加青蒿提取物能夠提高仔豬采食量，從而提高仔豬生長(zhǎng)性能[9]。

3.2 青蒿提取物對(duì)犢牛血液生化指標(biāo)的影響

血液中的GLU是動(dòng)物維持生理活動(dòng)和正常體溫的主要能量來源。本試驗(yàn)中，試驗(yàn)組犢牛血液GLU濃度較對(duì)照組顯著升高，說明添加青蒿提取物有利于維持犢牛正常的生理功能。血液GLU的增加可能是由于犢牛在飼喂青蒿提取物后具有較高的開食料攝入量。這一結(jié)果已被Bayatkouhsar等證實(shí)，其發(fā)現(xiàn)犢牛采食更多的開食料能夠增加血液中GLU的濃度[10]。此外，本試驗(yàn)還發(fā)現(xiàn)犢牛飼喂青蒿提取物后犢牛血液CHOL濃度降低，原因可能是由于青蒿提取物可以將CHOL吸收到自身的細(xì)胞中所致，具體機(jī)理仍需進(jìn)一步研究。

3.3 青蒿提取物對(duì)犢牛血液抗氧化指標(biāo)的影響

抗氧化酶如T-SOD、CAT和GSH-Px是一種源于生命體的活性物質(zhì)，具有將體內(nèi)形成過氧化物轉(zhuǎn)換為毒害較低或無害的物質(zhì)的功效。本研究中，試驗(yàn)組犢牛血液T-SOD濃度較對(duì)照組顯著升高，說明添加青蒿提取物能夠提高犢牛抗氧化能力。原因可能青蒿提取物內(nèi)含有黃酮和酚類等活性物質(zhì)，具有極強(qiáng)的抗氧化能力。與本試驗(yàn)研究結(jié)果相似，馬文芳等研究指出，青蒿提取物中含有大量的酮類和酚類活性物質(zhì)，是一種良好的天然抗氧化劑[11]。侯昆等研究發(fā)現(xiàn)，泌乳奶牛飼喂青蒿提取物后抗氧化能力顯著提高[12]。

3.4 青蒿提取物對(duì)犢牛血液免疫指標(biāo)的影響

免疫球蛋白A是黏膜免疫的主要抗體，其主要功能是通過與先天性非特異性防御機(jī)制的密切合作來發(fā)揮對(duì)病原菌的免疫排斥作用。免疫球蛋白G是血清中的主要抗體，在全身免疫應(yīng)答中起重要作用。可溶性sCD4是動(dòng)物免疫系統(tǒng)中的重要免疫細(xì)胞，可以控制病毒的復(fù)制和突變并顯著降低體內(nèi)病毒載量。本試驗(yàn)中，添加青蒿提取物顯著提高了犢牛血清中IgA、IgG和sCD4的濃度，原因可能是青蒿提取物中的某些活性成分與犢牛腸道內(nèi)的菌群，上皮細(xì)胞和免疫細(xì)胞相互作用，觸發(fā)和刺激免疫功能，從而產(chǎn)生抗體，但其具體機(jī)制仍需進(jìn)一步研究。與本試驗(yàn)結(jié)果相似，康紅軍研究指出，青蒿提取物能夠提高仔豬免疫功能[4]。潘存霞等研究表明，飼喂青蒿提取物可提高獺兔免疫能力[5]。本試驗(yàn)研究結(jié)果表明，青蒿提取物可以提高新生犢牛的免疫功能，有利于緩解犢牛腹瀉的發(fā)生。

4 結(jié)論

本試驗(yàn)研究結(jié)果表明，斷奶前犢牛飼喂青蒿提取物可以提高其生長(zhǎng)性能、抗氧化能力和免疫功能，同時(shí)降低腹瀉發(fā)生率。因此，青蒿提取物具有作為一種有效飼料添加劑去提高斷奶前犢牛整體健康狀態(tài)的潛力。