探討HE染色在病理診斷中的應用價值

辜正策 劉曉未 鄧小婧 劉欣 李璐池

【摘 ?要】目的：討論HE染色在病理診斷中的應用，更好的支撐臨床診治。方法：選取2019年1月-2019年12月在我院進行病理檢查的組織標本268例作為研究對象，根據(jù)染色方法的不同將其分為HE染色普通組和HE染色改進組，對兩組標本的優(yōu)片率和病理檢查結(jié)果的準確率進行對比分析。結(jié)果：HE染色改進組的優(yōu)片率（97.02%）和病理診斷結(jié)果準確率（97.02%）均大于HE染色普通組的優(yōu)片率（89.96%）和病理診斷結(jié)果準確率（90.29%）（P<0.05）。結(jié)論：病理診斷是臨床輔助診斷的金標準，改進HE染色技術(shù)能有效提高切片質(zhì)量，保證檢查結(jié)果準確性，更好的服務于臨床。

【關鍵詞】HE 染色;病理診斷;技術(shù)改進

【中圖分類號】R361??????【文獻標識碼】A??????【文章編號】1672-3783（2020）03-0272-02

臨床上，病理診斷以準確性高而被臨床醫(yī)生所信賴。研究與實踐中發(fā)現(xiàn)，病理診斷結(jié)果的準確性與送檢組織所制成的切片的染色技術(shù)具有密切聯(lián)系^[1]。而實際操作過程中，HE染色技術(shù)的影響因素有很多，如標本固定時間不夠，大標本沒有切開固定，取材過厚導致組織脫水不徹底，試劑濃度差異以及溫度的改變等，任何一個細小環(huán)節(jié)都會對切片質(zhì)量產(chǎn)生嚴重影響，進而增加后期病理醫(yī)師的診斷難度，因此HE染色是病理檢查的關鍵步驟。本次研究對我院的268例組織標本進行回顧性分析以探討HE染色技術(shù)在病理診斷中的應用，結(jié)果如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 ?參與研究的268例標本從我院2019年1月-2019年12月接收的組織標本中選取，將其分為A組（HE染色普通組）和B組（HE染色改進組），每組134例。兩組均包含胃腸鏡活檢組織58例，膽囊闌尾組織25例，骨髓組織9例，脂肪組織18例，子宮內(nèi)膜組織24例。分別對兩組標本進行普通HE染色和改進后HE染色，對兩組標本的不同組織優(yōu)片率和總體優(yōu)片率以及不同組織病理診斷結(jié)果準確率和總體病理檢查結(jié)果準確率進行對比分析。

1.2方法

1.2.1研究方法 ?選取2019年1月-2019年12月我科室接收的268例病理組織為研究對象，按照染色方法的不同將其分為A組（HE染色普通組）和B組（HE染色改進組），比較兩組標本的優(yōu)片率和病理檢查結(jié)果的準確率。

1.2.2實驗方法

A組（HE染色普通組）：（1）使用TO透明液（主要成分為二甲苯）三缸進行脫蠟，每缸5min。（2）用一定濃度梯度的乙醇（依次為無水酒精、95%酒精、85%酒精、75%酒精）脫二甲苯，每缸約15s，隨后熱水燙片后自來水沖洗。（3）在蘇木素中染色5-10min后流水沖洗。（4）經(jīng)1%鹽酸酒精分化1-5s后充分水洗。（5）伊紅染色10-20s后流水沖洗。（6）依次經(jīng)85%酒精、95%酒精、無水酒精脫水后吹干，用中性樹膠封片，貼好標簽。

B組（HE染色改進組）：（1）針對標本大小不同，性質(zhì)各異采取不同的固定方式，取材過程合理合規(guī)，盡量取到病變組織，同時控制好所取組織厚度，保證充分脫水，骨髓組織要充分脫鈣。（2）包埋，切片過程中避免污染，所選切片應無皺褶、刀痕、厚薄適宜。（3）合理優(yōu)化染色步驟，如適當延長烤片時間，把握好鹽酸分化時間以及根據(jù)溫度，濃度不同調(diào)整蘇木素著色時間。（4）HE染色法中蘇木精為堿性染液，主要使細胞核內(nèi)的染色質(zhì)和細胞質(zhì)內(nèi)的核酸著紫藍色;伊紅為酸性染液，主要使細胞質(zhì)和細胞外基質(zhì)中的成分著色。染色后應保證細胞核呈藍色，粘液為灰藍色，鈣鹽顆粒、軟骨基質(zhì)為深藍色，細胞間質(zhì)染成桃紅色，粉紅色等，胞質(zhì)中嗜酸性顆粒細胞染成鮮紅色，一般情況下，彈力纖維呈現(xiàn)亮粉紅色，膠原纖維呈現(xiàn)淡粉紅色，紅細胞呈現(xiàn)橘紅色^[2]。最后在顯微鏡下觀察染色結(jié)果。

1.3觀察指標 ?對A、B兩組標本的優(yōu)片率及病理診斷結(jié)果的準確率進行對比分析。

1.4數(shù)據(jù)處理 ?所得結(jié)果用SPSS19.0統(tǒng)計軟件進行分析，當P<0.05，差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

研究結(jié)果顯示，B組（HE染色改進組）的優(yōu)片率和病理診斷結(jié)果準確率均顯著高

于A組（HE染色普通組），差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05），詳見表1、表2。

3 討論

臨床病理診斷為臨床診治的重要輔助手段，可以為醫(yī)生診斷治療提供直觀科學的依據(jù)，組織染色質(zhì)量的好壞直接決定診斷結(jié)果及治療方案的確定，因此提供優(yōu)質(zhì)的組織切片有著積極意義。一張優(yōu)質(zhì)的組織切片除了需要厚薄均勻完整，無皺褶及刀痕外，同時受到染色技術(shù)的影響。 而實際操作過程中，影響HE染色結(jié)果的因素有很多，從取材到脫水，包埋，切片，染色，每一環(huán)節(jié)都起到關鍵作用。最好根據(jù)不同標本類型，選擇對應的方法，盡量不改變組織結(jié)構(gòu)，確保組織形態(tài)能在顯微鏡下得到最好體現(xiàn)。染色的質(zhì)量很大程度上是由細胞核的染色質(zhì)量決定的，這是化學物理一起作用完成的。大部分是由于組織內(nèi)部有非常多的微小細孔，在染料逐步滲透以后，與組織結(jié)合緊密，之后發(fā)生溶解擴散，使不同的成分呈現(xiàn)不同的顏色^[3]。 在本次研究中，通過對HE染色改進前和改進后的染色結(jié)果進行對比分析，發(fā)現(xiàn)通過優(yōu)化從最初取材到最終封片間的每一個步驟能有效改進染色效果，從而提高病理診斷準確率。

總而言之，在病理診斷中病理技術(shù)HE染色扮演著至關重要的角色，為了更好的提升切片質(zhì)量，提高病理診斷結(jié)果的準確性，我們?nèi)孕枰獙E染色進行不斷研究和探索，更好的改進染色技術(shù)，為后期的臨床診斷和治療提供更有力的支持。

參考文獻

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[3] 冉志遠，寧浩勇，康筱玲，劉路錄，孟宇宏. 全自動染色膠片封片機在常規(guī)病理染色中的應用體會[J]. 診斷病理學雜志，2014，21（02）：121-122.