平板傾注法與3M紙片法對水質檢驗的結果分析

沈燕 張繼燕

【摘 ?要】目的：探討平板傾注法與3M紙片法對水質檢驗的結果。方法：樣品取自轄區(qū)市政的末梢水100份，自備井水20份，二次加壓120份，首先制備混合試劑菌液，之后分別用平板傾注法與3M紙片法對水質進行檢測，對比平板傾注法與3M紙片法的檢測結果及兩種方法在末梢水、二次加壓水及自備井水中的菌落數(shù)對比結果。結果：兩種檢測方法的檢測結果對比無統(tǒng)計學意義，P>0.05。兩種方法在末梢水、二次加壓水及自備井水中的菌落數(shù)對比無統(tǒng)計學意義，P>0.05。結論：3M紙片法也可用于水質檢驗，其檢測結果準確、便捷、快速，具有實用價值。

【關鍵詞】平板傾注法;3M紙片法;水質檢驗;菌落數(shù)

【中圖分類號】R15??????【文獻標識碼】A??????【文章編號】1672-3783（2020）03-0070-01

生活飲用水菌落總數(shù)是指水體在營養(yǎng)瓊脂上的有氧條件下，在37°C下對水體進行培養(yǎng)，48h后可得到水體中所含有的菌落總數(shù)，其可對水體污染的嚴重程度進行評價，以往國際上多采用平板傾注法進行監(jiān)測，但其存在配置營養(yǎng)基、操作復雜及消毒清洗工作量大、細菌容易出現(xiàn)假陰性結果等缺點，使得其不利于衛(wèi)生監(jiān)督工作的開展^[1]，因此尋找一種更為靈敏、準確的水質檢測方法非常重要。3M紙片法是一種新型的檢測方法，其由美國3M公司研制，可將細菌生長中所需的營養(yǎng)成分在紙上進行固定，使用較為方便，且會在營養(yǎng)成分中加入著色劑，將菌落染成紅色，便于判別，較為實用^[2]。本文分析了平板傾注法與3M紙片法對水質檢驗的結果，以為水質檢驗選擇合適的方法。

1 材料與方法

1.1材料

菌株為大腸桿菌，3M紙片為3M公司生產(chǎn)，一次性無菌培養(yǎng)皿購自青島金典生化器材有限公司，營養(yǎng)瓊脂購自青島高科園博生物有限公司。樣品取自轄區(qū)市政的末梢水100份，自備井水20份，二次加壓120份。

1.2檢測方法

首先制備混合試劑菌液，首先將大腸桿菌半固體保存菌苔接種在5ml葡萄營養(yǎng)肉湯或營養(yǎng)肉湯中，在37°C下培養(yǎng)18～24h，之后取1ml培養(yǎng)液，將其置于無菌試管中，并在微型的振蕩器中進行振蕩，時長為1～3min，之后進行充分混勻，再將菌液濃度調整為3×10⁵cfu/ml，再用倍比稀釋法將其稀釋至5～10cfu/ml，之后在平皿及3M紙片中進行接種，并繼續(xù)培養(yǎng)24h，培養(yǎng)溫度為36±1°C。其中3M紙片法為用無菌操作法吸取充分混勻后的液體1ml于紙片中央，再將上層膜直接落下，落下時需避免氣泡，之后將壓板凹面向下，將其置于上層膜中央，再輕按下，從而可使樣液覆蓋在圓形的培養(yǎng)基上，再將壓板靜置，時間超過1min，之后置入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，48h后對結果進行觀察;平皿計數(shù)法，采用無菌操作法取充分混勻后的液體1ml，將其注入至無菌平皿中，之后傾注已融化且冷卻溫度為45°的營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基15ml，使其水樣進行充分混勻，另一個平皿中僅加入同樣體積的營養(yǎng)瓊脂，將其作為空白對照，兩組均進行培養(yǎng)，48h后對結果進行觀察。

1.3觀察指標

（1）對比平板傾注法與3M紙片法的檢測結果;（2）對比兩種方法在末梢水、二次加壓水及自備井水中的菌落數(shù)對比結果。

1.4統(tǒng)計學方法

采用SPSS23.0軟件，計數(shù)資料（n/%）行卡方檢驗，P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2?結果

2.1對比平板傾注法與3M紙片法的檢測結果

兩種檢測方法的檢測結果對比無統(tǒng)計學意義，P>0.05，見表1。

2.2對比兩種方法在末梢水、二次加壓水及自備井水中的菌落數(shù)對比結果

兩種方法在末梢水、二次加壓水及自備井水中的菌落數(shù)對比無統(tǒng)計學意義，P>0.05，見表2。

3?討論

菌落總體數(shù)量是對水質是否有污染及人體飲用后是否會對生命健康造成危害的一種衛(wèi)生評價指標，是生活用水的標準檢測項目之一。近年來，平板傾注法較為規(guī)范、正確，但檢測中檢測人員工作量較大，且操作及要求較為繁瑣，使得衛(wèi)生監(jiān)督工作往往不能按照標準方法進行。3M紙片法可用于水質檢驗，但其操作簡便，可節(jié)省檢驗前期復雜準備工作，可提高檢驗檢驗人員的工作效率^[3]。

本文結果表明，兩種檢測方法的檢測結果對比無統(tǒng)計學意義，兩種方法在末梢水、二次加壓水及自備井水中的菌落數(shù)對比無統(tǒng)計學意義，表明兩種方法的檢測結果一致，但與平板傾注法相比，3M紙片法具有應用方便、迅速的優(yōu)點，平板傾注法接種水樣后需將營養(yǎng)瓊脂傾倒進去，同時需對冷凝溫度進行控制，使得其操作不夠簡便，而3M紙片法則已將培養(yǎng)基在紙片上進行固定，只需要水樣、壓片操作，可節(jié)省配制培養(yǎng)基、滅菌等操作，通常其只需要1min即刻完成，因此其尤其適用于各種應急檢測。其次其便于結果統(tǒng)計，因為水質中的菌落在3M紙片上會呈現(xiàn)出紅色小點狀斑，其可與水中的各種雜志及不溶解顆粒進行區(qū)別，從而便于分辨、鑒別，而平板傾注法的菌落顏色與營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基顏色接近，導致其辨識度不高，不利于觀察、計數(shù);再次，其可減少被污染的可能性，因平板傾注法在檢測時隨著熔融次數(shù)的增多，其營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基中的性能、成分會逐漸衰退，且該過程中容易出現(xiàn)污染，而3M紙片法檢測時，其在冷藏良好情況下有效期可達3年，檢測時間短，可大大降低污染率^[4]。

綜上所述，3M紙片法也可用于水質檢驗，其檢測結果準確，操作方法快捷、方便、簡單，可在任何環(huán)境下進行，適宜的水質檢驗工作中進行推廣。

參考文獻

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[3] 周慶榮，毛麗仙，鄭升龍，等.江山市2014年-2017年農(nóng)村飲水工程水質檢測結果分析[J].中國衛(wèi)生檢驗雜志，2018，28（13）：1644-1646.

[4] 薛劍春.3M紙片法在水質檢驗工作中的應用效果評價[J].現(xiàn)代養(yǎng)生，2019，35（6）：61-62.