不同激素及濃度對(duì)人參果吊果組培苗生長(zhǎng)的影響

王玉英，李 茹，陳 剛，李枝林，李國(guó)昌，李葉芳，黃興龍

（1.云南農(nóng)業(yè)大學(xué)園林園藝學(xué)院，云南 昆明 650201；2.石林縣經(jīng)濟(jì)作物站， 云南 石林 652200）

人參果吊果（Solanum muricatumAiton）是人參果的一個(gè)品種，又名香瓜茄，屬茄科類(lèi)多年生草本植物，原產(chǎn)南美洲的秘魯。人參果吊果的花為白色、淡紫色或紫色；成熟果實(shí)果皮為橢圓形，呈金黃色、奶油色或米黃色帶紫色條紋，外形似人的心臟；其果肉味道獨(dú)特、脆爽多汁、不酸不澀。研究顯示，人生果吊果蛋白質(zhì)含量高，糖和脂肪含量低，還富含微量元素與礦物元素[1-3]。相關(guān)研究還表明，人參果的鈣、硒含量為鮮果之首，尤其是硒含量遠(yuǎn)高于其他水果和蔬菜[4]。鈣可預(yù)防老年性癡呆、動(dòng)脈硬化以及由缺鈣引起的骨質(zhì)疏松和增生等。硒能激活人體細(xì)胞，增強(qiáng)細(xì)胞活力，具有防癌和抑制心血管病等功效，對(duì)血壓和糖尿病患者有顯著療效[5]。因而人參果被譽(yù)為“生命之火”“抗癌之王”[6-7]。另外，人參果吊果亦具有極高的觀賞價(jià)值，可作盆景。

近年來(lái)，利用節(jié)能日光溫室栽培人參果的面積迅速擴(kuò)大，部分地區(qū)已成規(guī)模化種植[8]。人參果普遍采用自繁自育、無(wú)性扦插的方式進(jìn)行擴(kuò)繁，栽培過(guò)程中容易感染病毒，影響產(chǎn)量和品質(zhì)；而且長(zhǎng)期無(wú)性繁殖會(huì)導(dǎo)致品種特性嚴(yán)重退化，品質(zhì)和產(chǎn)量逐漸下降，繁殖系數(shù)變低，嚴(yán)重制約了人參果種植業(yè)的發(fā)展[9]。目前，人參果快繁的研究已有報(bào)道，主要集中在培養(yǎng)基激素種類(lèi)及配方、外植體材料和誘導(dǎo)分化、繼代、生根的條件等方面[10-14]。其中，以人參果吊果為材料的組培快繁研究尚未見(jiàn)報(bào)道。筆者以人參果吊果為外植體，比較不同激素種類(lèi)及濃度對(duì)人參果吊果側(cè)芽誘導(dǎo)的效果，建立人參果吊果組培快繁體系，為解決人參果 吊果生產(chǎn)中容易感染病毒、品種退化等問(wèn)題提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

從昆明市石林縣西街口鎮(zhèn)人參果種植地中選擇長(zhǎng)勢(shì)強(qiáng)、無(wú)病蟲(chóng)害的人參果吊果植株作為試驗(yàn)材料。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 外植體的選擇與處理 選取無(wú)病蟲(chóng)害的帶掖芽枝條，剪成約3～5 cm 長(zhǎng)的莖段，先用洗衣粉浸泡5 min，自來(lái)水沖洗干凈，再用1%多菌靈浸泡1 min，自來(lái)水沖洗30 min，擦干后放入已消毒的玻璃瓶中；在超凈工作臺(tái)上，用75%酒精浸泡莖段30 s，無(wú)菌水沖洗3 次，再用0.1% 的氯化汞浸泡7 min，浸泡時(shí)不間斷搖蕩瓶子，以確保外植體得到全面徹底消毒，最后用無(wú)菌水反復(fù)沖洗 5 次。濾紙吸干水分后，切成長(zhǎng)約1.0～1.5 cm 帶葉芽的枝條，接種于誘導(dǎo)培養(yǎng)基上。培養(yǎng)基配方：MS +KT 0.1 mg/L+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L。

1.2.2培養(yǎng)基配方篩選（1）不同濃度6-BA 處理。以MS 為基本培養(yǎng)基，添加0.2 mg/L NAA，設(shè)置6 組不同濃度的6-BA，分別為0.3，0.5，0.7，1.0，1.3，1.5 mg/L，編號(hào)1～6。（2）不同濃度NAA 處理。以MS為基本培養(yǎng)基，添加0.3 mg/L 6-BA，設(shè)置4 組不同濃度的NAA，分別為0.2、0.4、0.6、0.8 mg/L，編號(hào)7～10。（3）不同濃度GA3、KT、TDZ 處理。以MS為基本培養(yǎng)基，添加0.05 mg/L NAA、0.1 mg/L6-BA，GA3、KT、TDZ 每種激素設(shè)置2 個(gè)濃度共計(jì)6 個(gè)處理，分別為0.5 mg/L GA3、1.0 mg/L GA3、1.0 mg/L KT、2.0 mg/L KT、1.0 mg/L TDZ、2.0 mg/L TDZ，編號(hào)11～16。培養(yǎng)基pH 值為 5.8，添加3%蔗糖。每個(gè)處理接種5瓶，每瓶接種3 個(gè)莖段，重復(fù)3 次。培養(yǎng)時(shí)濕度控制為（75±5）%，溫度控制在（22±2）℃，光照周期為14 h/d，光照強(qiáng)度1 800～2 500 lx，培養(yǎng)30 d 后測(cè)定增殖倍數(shù)（即側(cè)芽分枝數(shù)），觀察根數(shù)、株高、莖粗、葉片數(shù)、葉長(zhǎng)和葉寬等形態(tài)指標(biāo)。

1.2.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與處理 采用Microsoft Excel 2003 進(jìn)行數(shù)據(jù)整理，采用SPSS23.0 軟件進(jìn)行方差分析，采用Duncan’s 進(jìn)行多重比較，P＜0.05，n=3。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同濃度6-BA 對(duì)人參果吊果組培苗生長(zhǎng)和增殖的影響

由表1 可知，處理1 的株高最高，為4.80±2.91 cm， 分別比處理2～6 高28.7%、108.7%、226.5%、260.9%、269.2%，且差異顯著，其他處理間差異不顯著；各處理的莖粗在0.08～0.11 cm，處理間差異不明顯；葉片數(shù)以處理1 最多，達(dá)9.67±1.53 片，顯著高于其他處理；葉長(zhǎng)以處理6 最長(zhǎng)，為1.67±0.51 cm，其次是處理1，為1.47±0.60 cm，二者差異不顯著；葉寬以處理1 最寬，為0.97±0.32 cm，顯著寬于處理4，其他處理間差異不顯著；處理1 的根數(shù)最多，顯著多于其他處理， 分別比處理2～6 增加46.7%、109.6%、144.5%、238.8%、 529.6%，其他處理間差異不顯著。由圖1 可知，增殖倍數(shù)以處理1 最大，分別較處理2、處理3 高20.0%、200.0%，處理4、5 和6 無(wú)增殖。綜上所述，MS+NAA 0.2 mg/L+6-BA 0.3 mg/L（處理1）最有利于人參果吊果組培苗增殖和生根，表明了低濃度的6-BA 對(duì)人參果吊果組培苗生長(zhǎng)有促進(jìn)作用。

2.2 不同濃度NAA 對(duì)人參果生長(zhǎng)和增殖的影響

由表2 可知，處理7 的株高最高，為5.33±0.61 cm，處理8 次之，為4.27 cm，二者的差異不顯著，但處理7 的株高顯著高于處理9 和處理10；各處理的莖粗在0.09～0.13 cm，處理間差異不顯著；處理7 的葉片數(shù)最多，為10.67±2.08 片，分別比處理8～10 多52.4%～ 60.0%，且差異顯著。各處理的葉長(zhǎng)、葉寬差異均不顯著，但以處理7 表現(xiàn)較好，葉長(zhǎng)和葉寬分別為1.30±0.46、0.80±0.10 cm；處理7、處理8 的根數(shù)分別為23.33±4.04、20.67±4.04 條，顯著多于其他處理。由圖2 可知，處理7 和處理8 的增殖倍數(shù)差異不顯著，以處理7 的較高，為3.3 倍，分別比處理8、處理9 高10.0%、74.6%，處理10 無(wú)增殖。綜上所述，MS+NAA 0.2 mg/L+6-BA 0.3 mg/L（處理7）最有利于人參果吊果組培苗增殖和生根，說(shuō)明低濃度NAA 能促進(jìn)人參果吊果生長(zhǎng)和生根，增殖倍數(shù)最高。

表1 不同濃度6-BA 處理下人參果吊果組培苗的生長(zhǎng)情況

表2 不同濃度NAA 處理下人參果吊果組培苗的生長(zhǎng)情況

2.3 GA3、KT、TDZ 對(duì)人參果吊果生長(zhǎng)和增殖的的影響

由表3 可知，株高以處理13 的最高，為4.20±0.26 cm，分別比其他處理高24.6%～200%，處理14 的最矮，僅1.40±1.14 cm，顯著矮于其他處理；處理12的莖粗最粗，為0.18±0.11 cm，處理14 的莖粗最細(xì)，僅0.08±0.03 cm，二者間差異顯著，其他處理間差異不顯著；葉片數(shù)以處理13 和處理15 最多，約為5.67 片，以處理16 的葉片最少，僅2.00±1.73 片，顯著低于其他處理；各處理的葉長(zhǎng)和葉寬差異均不顯著；根數(shù)以處理13 的最多，分別比其他處理增加125.0%～193.5%，且差異顯著。由圖3 可知，處理13的增殖倍數(shù)最高，為3.1 倍，其次是處理11，第三是處理12，處理14～16 無(wú)增殖；同時(shí)，處理13 的人參果吊果組培苗長(zhǎng)勢(shì)最好。綜合上述，MS+KT 1.0 mg/L+6-BA 0.1 mg/L+NAA 0.05 mg/L（處理13）最有利于人參果吊果組培苗生長(zhǎng)，表明在6-BA 和NAA 濃度一定時(shí)，KT 的增殖效果最佳，當(dāng)KT 濃度為 1.0 mg/L時(shí)，人參果吊果的株高、莖粗、葉片和根系生長(zhǎng)均表現(xiàn)出明顯的優(yōu)勢(shì)，并且增殖倍數(shù)最高。

表3 GA3、KT、TDZ 處理下人參果吊果組培苗的生長(zhǎng)情況

3 討 論

人參果的經(jīng)濟(jì)和營(yíng)養(yǎng)價(jià)值很高，但常規(guī)繁殖時(shí)品種容易退化，利用組織培養(yǎng)技術(shù)，以莖尖和帶側(cè)芽的莖段進(jìn)行組培再生，可解決人參果品種退化的問(wèn)題，短時(shí)間內(nèi)獲得大量品質(zhì)優(yōu)良的種苗。前人利用莖尖或帶腋芽的莖段[15]等外植體，建立了多種人參果的組培再生體系。該試驗(yàn)也是采用帶腋芽的莖段為外植體，來(lái)研究人參果吊果的組培快繁體系。

6-BA 和KT 可以促進(jìn)細(xì)胞分裂，促進(jìn)側(cè)芽生長(zhǎng)；GA3可以促進(jìn)莖的伸長(zhǎng)生長(zhǎng)[16]。張麗芳等[14]研究表明，人參果繼代快繁和生根是同步進(jìn)行的，最佳培養(yǎng)基為不添加任何激素的MS 培養(yǎng)基或MS+6-BA 0.05 mg/L+NAA 0.01 mg/L+GA30.1 mg/L。而該試驗(yàn)結(jié)果顯示，當(dāng)6-BA 濃度為0.3 mg/L、NAA 濃度為0.2 mg/L 時(shí)，繼代增殖倍數(shù)最高，組培苗長(zhǎng)勢(shì)最好。這表明，人生果吊果對(duì)植物激素較敏感，低濃度的6-BA 和NAA可促進(jìn)其生長(zhǎng)和增殖。

傅玉蘭等[10]研究表明，對(duì)于人參果組培苗而言，NAA+KT 的組合優(yōu)于NAA+BA 的組合，NAA 0.2 mg/L+KT 2.0 mg/L 的處理人生果組培苗的增殖率最高，月增殖率達(dá)5.17 倍。焦宏[17]的研究結(jié)果同樣表明，BA 2.0 mg/L+KT 2.0 mg/L 的處理人參果分化苗最多且粗壯。該試驗(yàn)結(jié)果顯示，當(dāng)KT 濃度為1.0 mg/L時(shí)，人參果增殖倍數(shù)最高，達(dá)3.1 倍，植株長(zhǎng)勢(shì)旺盛；但當(dāng)其濃度增加至2.0 mg/L 時(shí)，植株長(zhǎng)勢(shì)較弱，增殖倍數(shù)為0。這一研究結(jié)果與前人不一致，可能與不同品種人參果對(duì)激素的敏感性存在差異有關(guān)。TDZ 是一種新型植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑，可促進(jìn)細(xì)胞分裂[18]。馬宗桓等[19]將TDZ 用于人參果葉片不定芽的分化，濃度為0.5 mg/L 時(shí)，分化率可達(dá)到83.3%。該試驗(yàn)結(jié)果顯示，TDZ 對(duì)人生果有促分化作用，但效果一般。

6-BA、KT、GA3和TDZ 這4 種激素相比較，6-BA和KT 對(duì)人生果吊果組培苗的增殖效果明顯，并且苗體長(zhǎng)勢(shì)好。這與陸瑞菊[9]等研究結(jié)果類(lèi)似，6-BA 對(duì)人生果吊果的增殖效果優(yōu)于KT。張菲菲等[13]研究結(jié)果表明，NAA 濃度為0.5 mg/L，可促進(jìn)人生果組培苗生根和株高的增長(zhǎng)。而該試驗(yàn)結(jié)果顯示，NAA 濃度為0.2 mg/L 時(shí)，人參果吊果組培苗的株高和根數(shù)表現(xiàn)最佳，增殖倍數(shù)也最高。

綜上所述，MS+NAA 0.2 mg/L+6-BA 0.3 mg/L 或MS+KT 1.0 mg/L+NAA 0.05 mg/L+6-BA 0.1 mg/L 的培養(yǎng)基配方有利于人參果吊果組培苗的瓶?jī)?nèi)增殖和生根。在產(chǎn)業(yè)化種苗生產(chǎn)過(guò)程中，考慮到種苗生長(zhǎng)的一致性，可選用其中1 種類(lèi)型培養(yǎng)基進(jìn)行培育。