HPLC法測定何首烏中2,3,5,4’-四羥基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷的含量

何書平

【摘 要】?? 目的： 為飲片廠采購何首烏為研究對象，測定2，3，5，4-四羥基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷含量。用高效液相色譜法測定何首烏中2，3，5，4-四羥基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷含量。 方法： 色譜柱為C18 （250 mm × 4.6 mm，5μm），流動相為乙腈-水（25∶75），流速為1.0 mL/min，檢測波長為320nm。 結果： 結果表明，何首烏2，3，5，4-四羥基二苯乙烯-2-β-D-葡萄糖苷的含量符合2015年版《中國藥典》標準。

【關鍵詞】? 何首烏;2，3，5，4-四羥基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷;水分測定;含量測定;高效液相色譜法

【中圖分類號】R249????? 【文獻標志碼】B?? 【文章編號】1005-0019（2020）05-097-01

何首烏為廖科植物何首烏Polygonum multiflorum Thumb.的干燥塊根。性微溫味苦甘澀，歸肝、心、腎經。解毒，消癰，截瘧，潤腸通便之功效 [1] 。主要產于河南、湖北、廣西、廣東、四川、貴州等地 [2] 。何首烏主要活性成分有蒽醌類、二苯乙烯類、磷脂類、黃酮類和酚類 [3] 。現研究發現，何首烏有藥理作用廣泛，能提高內源性抗氧化酶的活性，延緩衰老 [4] ，治療脫發 [5] ，降血脂和抗動脈粥樣硬化 [6] ，抗菌作用 [7-8] 等作用。

1 實驗材料

何首烏粉末（過四號篩）。

1.1 實驗儀器 Aglient高效液相色譜儀、101-1-S-Ⅱ型電熱恒溫鼓風干燥箱、稱量瓶、BS/BT系列電子天平

1.2 試劑 二苯乙烯苷對照品、甲醇（色普純）、乙醇（分析純）、純化水

2 實驗方法

2.1 水分測定

何首烏水分測定用2015年版《中國藥典》0832水分測定法第二法（烘干法） [8] ，取供試品2-5g，平鋪于干燥至恒重的扁形稱量瓶中，厚度不超過5mm，精密稱定，開啟瓶蓋在100～105℃干燥5小時，將瓶蓋蓋好，移置干燥器中，放冷30分鐘，精密稱定，再在上述溫度干燥1小時，放冷，稱重，至連續兩次稱重的差異不超過5mg為止。根據減失的重量，計算供試品中含水量（%）。

2.2 色譜條件與系統適用性試驗 色譜柱為C18 （250 mm × 4.6 mm，5 μm），流動相為乙腈-水（25：75），檢測波長為320nm。

對照品溶液的制備：取2，3，5，4-四羥基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷對照品適量，精密稱定，加稀乙醇制成每1ml含0.2mg的溶液，即得。

供試品溶液的制備：取2份何首烏粉末（過四號篩）約0.2g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入稀乙醇25ml，密塞，稱定重量，加熱回流30分鐘，放冷，再稱定重量，用稀乙醇補足減失的重量，搖勻，靜置，取上清液濾過，取續濾液，既得。

測定方法：分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀測定。

3 實驗結果

3.1 水分測定結果

3.2 2，3，5，4-四羥基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷對照品色譜圖、何首烏樣品色譜圖（圖1、2）

3.3 含量結果 測量對照品溶液和供試品溶液中待測物質的峰面積，按下式計算含量：含量（CX）=CR× AX AR ，見表1、表2。

4 結論

本次實驗對中藥飲片廠采購何首烏對照2015年版《中國藥典》，用HPLC法對其進行含量測定，按干燥品計算，含2，3，5，4-四羥基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷（C20 H22 O9）不得少于1.0%。收購何首烏符合藥典規定含量，控制該藥材的含量，保證飲片的質量。

參考文獻

[1]? 國家藥典委員會.中國藥典，一部[M].北京：化學工業出版社，2015.

[2] 南京中醫藥大學. 中藥大辭典 [M]. 上冊. 上海： 上海科學技術出版社， 2006： 1586-1589.

[3] 龔彥勝，張亞囡，黃偉，等. 與功效、毒性相關的何首烏化學成分研究進展[J]. 中國藥物警戒， 2012， 9（8）： 472-475.

[4] 許愛霞， 張振民， 葛 斌， 等.何首烏多糖對氧自由基及抗氧化酶活性的作用研究 [J].中國藥師， 2005， 28（11）： 900.

[5] 姜澤群， 吳 瓊， 徐繼敏， 等.中藥何首烏促進黑色素生成的作用機理研究 [J].南京中醫藥大學學報， 2010， 26（3）： 190-192.

[6] 李婧.何首烏降脂抗動脈粥樣硬化的中醫藥機制研究[J].綜合醫學， 2012， 10（20）： 150-151.

[7] 張綿松， 劉 新， 孟秀梅， 等. 生何首烏體外抗氧化活性及抗菌活性的研究 [J].食品科技， 2012， 37（8）： 228-231.

[8] 潘小翠， 邊才苗， 管 銘. 何首烏不同溶劑提取液的體外抑菌活性研究 [J]. 湖北農業科學， 2013， 52（18）： 4790-4791.

[9] 國家藥典委員會.中國藥典，四部[M].北京：化學工業出版社，2015.