輔酶Q10對類風濕關節炎患者促炎癥細胞因子和氧化應激水平的影響▲

朱科達 王凜介 劉風云 顧惠英

(江蘇省張家港市中醫醫院風濕免疫科，張家港市 215600，電子郵箱：zjghyq100@163.com)

類風濕關節炎(rheumatoid arthritis,RA)是以周圍多關節、軟骨、骨破壞為主要臨床表現的自身免疫疾病，促炎癥細胞因子的高表達是其發病的主要原因。當人體組織遭受各種有害刺激后，組織或細胞內產生的自由基與機體的抗氧化防御嚴重失衡，活性氧在機體或組織細胞內蓄積，可引起一系列的細胞炎癥反應，從而導致RA的發生及發展[1-2]。 腫瘤壞死因子α(tumor necrosis factorα，TNF-α)的過表達可以導致滑膜炎、關節軟骨的破壞，激發其他炎癥因子的表達從而進一步加重炎癥反應[3]。由輔助性T細胞(T helper cell，Th)17分泌的白細胞介素(interleukin，IL)-17作為一種促炎癥細胞因子，在 RA急性期時其水平升高常提示患者病情較重，骨侵蝕明顯，這主要是由于IL-17在T細胞驅動的炎癥中可刺激不同類型細胞分泌各種細胞因子和化學因子，破壞骨修復系統而導致骨破壞、關節變形[4-5]。丙二醛是脂質氧化損傷的終末產物之一，RA患者的血液和滑膜液中的脂質氧化損傷的終產物增加，其與疾病的嚴重性相關[6]。

近年來，有關阻斷RA患者炎癥因子通路的新療法逐漸受到關注。輔酶Q10屬脂溶性苯醌，是構成生物細胞線粒體中呼吸鏈的重要遞氫體之一，在合成生物體生命活動所需的能量—三磷酸腺苷中具有重要作用，是天然的抗氧化劑和自由基清除劑[7-8]。李潔等[9]研究發現，補充輔酶Q10能提高運動訓練后小鼠的超氧化物酶活力水平，降低丙二醛水平。本研究探討補充輔酶Q10對RA患者氧化應激及促炎癥細胞因子水平的影響。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選取2016年12月至2018年3月在我院門診和住院病房診治的90例RA患者為研究對象。納入標準：符合2015年美國風濕病學年會RA的診斷標準[10]。排除標準：艾滋病、淋巴瘤、結節病、移植物抗寄主反應病患者，嚴重的心血管疾病、腎病、肝病以及甲狀腺疾病患者，感染、腫瘤患者，一個月前曾補充過抗氧化劑、Ω-3不飽和脂肪酸患者，口服避孕藥或處于孕期、哺乳期的女性患者。采用隨機數字表法將患者隨機分為對照組和觀察組，每組45例。兩組患者的年齡、性別、體質指數、病程等一般資料差異均無統計學意義(均P>0.05)，具有可比性。見表1。本研究通過我院倫理委員會的審批，患者均簽署知情同意書。

表1 兩組患者基本資料比較

1.2 方法 觀察組患者予以口服輔酶Q10膠囊[衛材(中國)藥業有限公司，國藥準字H10930021]10 mg/次，3次/d+甲氨蝶呤[上海制藥(集團)有限公司信誼制藥總廠,國藥準字H31020644]10 mg/次，1次/周+小劑量潑尼松[北京雙鶴藥業股份有限公司,國藥準字5210H2215]10 mg/次，1次/d；對照組患者予以口服安慰劑、甲氨蝶呤、小劑量潑尼松，甲氨蝶呤、小劑量潑尼松用法及用量同觀察組，安慰劑為與輔酶Q10膠囊具有相同外觀的含淀粉膠囊，用法與輔酶Q10膠囊相同。兩組患者均治療3個月，治療期間患者保持既往的飲食習慣以及運動方式。

1.3 觀察指標 (1)IL-6、IL-17、TNF-α、總抗氧化力(total antioxidative capability，TAC)、丙二醛水平檢測：于治療前及治療3個月后采集患者清晨空腹外周靜脈血10 mL，12 000 r/min離心15 min分離血清，置于-20℃保存備用。收集血標本時注意避免溶血，同時避免標本被細菌污染及反復凍融。IL-6、IL-17、TNF-α、TAC水平采用酶聯免疫吸附測定法測定；丙二醛采用比色法測定。所用試劑盒均購置于杭州聯科生物技術股份有限公司。(2)血沉、 C反應蛋白(C-reactive protein ，CRP)、IgM、IgG及IgA水平的檢測：于治療及治療3個月后采集外周靜脈血送醫院實驗室檢測血沉 及CRP水平，IgM、IgG及IgA檢測采用免疫透射比濁法檢測，試劑盒購置于長春匯力生物技術有限公司(批號：2400094、2400093、2400092)。(3)臨床療效：觀察兩組患者治療前及治療3個月后的關節疼痛、關節壓痛、關節腫脹、活動障礙評分及晨僵時間，參照《中藥新藥臨床研究指導原則》[11]進行療效評價，整體改善率是指以上指標改善百分率，整體改善率=[(治療前值- 治療后值)/ 治療前值×100%]。顯效：整體改善率>75%，血沉 及CRP正常或明顯改善或接近正常；進步：整體改善率為50%～75%，血沉 及CRP有改善；有效：整體改善率為30%～49%，血沉及CRP有改善或無改善；無效：整體改善率<30%，血沉及CRP無改善。總有效率=(顯效+進步+有效)例數/總例數×100%。

1.4 統計學分析 采用SPSS 17.0軟件進行統計學分析。正態分布的計量資料以(x±s)表示，組間比較采用t檢驗，非正態分布的計量資料以中位數(median，M)和四分位數(P25，P75)表示，比較采用秩和檢驗；計數資料以例數(百分比)表示，組間比較采用χ2檢驗；等級資料的比較采用秩和檢驗。以P<0.05為差異具有統計學意義。

2 結 果

2.1 兩組患者治療前后IL-6、IL-17、TNF-α、TAC及丙二醛水平比較 治療前，兩組患者IL-6、IL-17、TNF-α、TAC及丙二醛水平比較差異均無統計學意義(均P>0.05)；治療后，觀察組IL-17、IL-6、TNF-α、丙二醛水平均低于治療前及對照組(均P<0.05)，而兩組治療前后TAC水平比較差異均無統計學意義(均P>0.05)。見表2。

表2 兩組患者治療前后IL-6、IL-17、TNF-α、TAC及丙二醛水平比較(x±s)

組別n丙二醛(mmol/L)治療前治療后t值P值TAC(mmol/L)治療前治療后t值P值觀察組453.89±1.132.75±0.765.616<0.0010.97±0.310.85±0.271.9580.053對照組453.85±1.073.38±0.902.2560.0270.99±0.290.93±0.280.9980.321 t值0.1723.5870.3161.380P值0.8640.0010.7530.171

2.2 兩組患者治療前后血沉、CRP及IgG、IgM、IgA水平比較 治療前，兩組患者血沉、CRP及IgM、IgG 、IgA水平比較差異均無統計學意義(均P>0.05)；治療后，兩組患者血沉、CRP及IgM、IgA、IgG水平均較治療前降低，且觀察組血沉、IgM、CRP水平均低于對照組(均P<0.05)，見表3。

表3 兩組患者治療前后血沉、CRP及IgG、IgM、IgA水平比較(x±s)

組別nIgG (g/L)治療前治療后t值P值IgM (g/L)治療前治療后t值P值觀察組4521.19±7.314.29±5.185.171<0.0012.18±0.811.18±0.387.498<0.001對照組4523.11±6.1016.25±4.915.877<0.0012.09±0.661.72±0.453.1070.002 t值1.3541.8420.5782.150P值0.5420.3430.7150.017

2.3 兩組患者癥狀體征情況比較 治療前，兩組患者癥狀體征評分差異均無統計學意義(均P>0.05)；治療后，兩組患者癥狀體征均較治療前改善，且觀察組關節疼痛評分及晨僵時間均少于對照組(均P<0.05)，見表4。

表4 兩組患者癥狀體征情況比較(x±s)

組別n活動障礙(分)治療前治療后t值P值晨僵時間(min)治療前治療后t值P值觀察組451.83±0.331.07±0.2212.855<0.00150.53±17.6618.29±9.1610.871<0.001對照組451.86±0.271.19±0.1714.087<0.00151.62±18.1530.18±12.116.5920.008 t值0.4722.8950.2895.253P值0.6930.3520.7710.004

2.4 兩組患者臨床療效比較 觀察組患者顯效12(26.7%)、進步19(42.2%)、有效12(26.7%)、無效2(4.4%)，治療總有效率為43(95.6%)，對照組分別為5(11.%)、21(46.7%)、9(20.0%)、10(22.2%)及35(77.8%)，觀察組患者治療總有效率高于對照組(χ2=0.615，P=0.013)。

3 討 論

RA患者的主要病理特征之一是各種炎癥因子水平地升高，而由Th17分泌的IL-17作為一種促炎癥細胞因子，在RA發病早期即可通過上調誘導型氧化亞氮合酶促進關節軟骨細胞釋放一氧化氮，誘導基質金屬蛋白酶1,3,13、環氧化酶-2、基質降解酶以及IL-6、IL-1的表達，參與骨侵蝕，促進慢性炎癥的發生[4-5]。劉志華等[12]研究發現，RA患者血清IL-17水平升高，并認為IL-17是判斷RA病情程度的重要指標。Kirkham等[13]研究表明，滑膜中IL-17的mRNA水平可預測關節破壞的嚴重程度，而降低炎癥因子水平可以改善RA的病情[14]。有研究顯示，植物提取物多酚有抗氧化、抗炎、抗惡性細胞增生和免疫調節的效果，能抑制膠原誘導的關節炎小鼠Th17和B細胞的功能，從而降低TNF-α、IL-1和IL-6等多種細胞因子的表達，緩解疾病癥狀[7-8]。輔酶Q10是天然的抗氧化劑和自由基清除劑，Sanoobar等[15]研究發現，RA患者以500mg/d劑量補充輔酶Q1012周后，TNF-α和IL-6表達水平降低。Lee等[16]發現與60 mg/d的輔酶Q10相比，給予150 mg/d 輔酶Q10可以降低RA患者IL-6水平。Sachdanandam[17]發現100 mg/d 輔酶Q10聯合三氧苯胺治療可以降低乳腺癌患者TNF-α和IL-6的水平。本研究結果顯示，治療后觀察組患者IL-17、TNF-α表達水平均低于對照組(均P<0.05)，與上述研究結果相似，提示輔酶Q10可以顯著地抑制RA患者IL-17、TNF-α的表達，從而有助于緩解患者的癥狀。

丙二醛是評價機體氧化應激的指標，在RA患者中呈高表達，其引起的氧化應激可以誘發體內炎癥反應，促進Th17等炎癥細胞的活化和諸多促炎癥細胞因子如TNF-α、IL-17和IL-6等的產生，對RA的發生發展有重要影響，與疾病的嚴重性密切相關[18]。降低RA患者體內丙二醛水平，可以緩解機體的炎癥反應。Lee等[19]發現每天給予150 mg的輔酶Q10可以降低冠心病患者的丙二醛水平。Singh等[20-21]的研究也證實給予心臟病患者每天補充120 mg輔酶Q10可降低丙二醛表達水平。Sanoobar等[13]給予RA患者每天補充500 mg的輔酶Q10，12周后發現患者血漿丙二醛的水平下降，但TAC水平并未受到影響。本研究結果顯示，治療后觀察組丙二醛水平低于治療前及對照組(均P<0.05)，與上述研究結果相似，提示輔酶Q10可以抑制RA患者丙二醛的表達，從而促進患者臨床癥狀的緩解。本研究還顯示，治療后，觀察組血沉、IgM、CRP水平低于對照組，且治療總有效率高于對照組(均P<0.05)，提示輔酶Q10可以抑制RA患者促炎癥細胞因子的產生，減輕氧化應激，緩解臨床癥狀，提高療效。

綜上所述，在常規治療基礎上，聯合使用輔酶Q10可以降低RA患者促炎癥細胞因子水平，減輕氧化應激，提高療效。但本研究樣本量較小，相關結果還需進一步研究證實，且本研究補充輔酶Q10后未對體內輔酶Q10水平進行檢測，30 mg/d 輔酶Q10的補充是否是最佳劑量還有待考量。