熒光原位雜交技術五色探針在產前診斷中的應用價值

閆梅，潘瓏，陳佛蘭

（廣東惠州市婦幼保健計劃生育服務中心，廣東 惠州 516007）

在臨床治療中，羊水細胞培養及染色體核型分析檢測技術已經廣泛應用胎兒染色體疾病的臨床診斷中，熒光原位雜交技術應用于產前診斷技術特異性強且較為快速[1]。為研究分析產前診斷中應用熒光原位雜交技術（FISH）的臨床價值，選取2018年2月-2019年7月于我院采集羊水進行產前遺傳學診斷的50例孕婦為研究對象，具體報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2018年2月-2019年7月于我院采集羊水進行產前遺傳學診斷的50例孕婦為研究對象。50例孕婦中，年齡范圍為22-42歲，平均年齡為（27.12±4.33）歲，采集時孕周時間18-28周，其中11例分娩過染色體異常患兒，2例為夫婦一方為染色體異常，38例為唐氏篩查高危人群，1例超聲提示胎兒畸形。

1.2 方法 在超聲定位下，進行羊膜腔穿刺術，抽取10 mL羊水置于無菌刻度管中進行保存。取20 mL個羊水分裝2支無菌刻度管內，1600轉/min離心10 min，棄去上清液，沉渣制成細胞懸液，接種于培養瓶內，放置于37oC 5%CO2培養箱中培養，一周后換液，并根據細胞生長情況，進行傳代，收獲，制片，然后進行核型分析，若懷疑有嵌合現象，需計數超過50個分裂相。熒光原位雜交技術的分析方法為玻片制備，變性雜交，玻片洗滌，復染后觀察結果，隨機計數50個羊水細胞，若超過90%細胞顯示正常信號即為正常，超過60%細胞顯示異常信號則為異常，若無法判讀，可擴大計數到100個細胞判斷結果。

1.3 統計學方法 應用SPSS 20.0軟件進行統計學分析，計量資料采用t檢驗，計數資料采用卡方檢驗，P＜0.05為差異具有統計學意義。

2 結果

熒光原位雜交技術診斷和染色體核型分析診斷成功率均為100.00%，染色體核型分析報告時間為（23.32±4.33）天，熒光原位雜交技術診斷報告時間為（3.22±1.08）天，差異具有統計學意義（P＜0.05）。

染色體核型分析發現4例異常，其中結構異常1例，數目異常3例（18-三例1例，21三體2例）。熒光原位雜交技術診斷發現3例染色體數目異常，與染色體核型分析的檢出情況一致，無假陰性或假陽性的情況出現，熒光原位雜交技術診斷的特異度為98.50%，敏感度為98.60%，熒光原位雜交技術診斷檢測結果與染色體核型分析一致率為100%。

3 討論

相關研究表明，產前診斷具有重要的臨床意義，能夠不斷提高人口素質，有利于優生優育。傳統產前診斷的方法為羊水細胞染色體核型分析，可靠性高，且結果穩定準確，同時檢測染色體結構異常和染色體數目異常，但核型分析需要進行羊水細胞體位培養，體外培養可能失敗且耗時常，標本用量較大，效率不高[2]。

熒光原位雜交技術為一種新型的診斷技術，能夠特異性帶有熒光標記的DNA探針與靶細胞的同源序列核酸交雜，實現對DNA片段的定位和定量，可用于間期染色質和中期染色體[3]，應用產前診斷中無需進行羊水培養，大大多縮短診斷的時間，但熒光原位雜交技術無法診斷染色體機構異常，完全取代羊水細胞染色體核型分析易發生漏診[4]。在本次研究中，染色體核型分析報告時間為（23.32±4.33）天，熒光原位雜交技術診斷報告時間為（3.22±1.08）天，差異具有統計學意義（P＜0.05）。熒光原位雜交技術診斷的特異度為98.5%，敏感度為98.6%，熒光原位雜交技術診斷檢測結果與染色體核型分析一致率為100%。綜合上述資料和實驗結果，熒光原位雜交技術診斷的成功率高，染色體核型分析診斷準確性高且診斷全面，進行產前診斷高危患者除染色體異常，可能存在染色體結構異常，單純應用熒光原位雜交技術診斷易漏診。

綜上所述，產前診斷中應用熒光原位雜交技術的成功率高，可靠行強，且報告時間較短，但單純使用熒光原位雜交診斷的漏診率高，需同時進行羊水細胞染色體核型分析診斷。