改進的差值質控法在凝血四項室內質控中的應用

薄帥

（遼寧省人民醫院檢驗科，遼寧 沈陽 110016）

凝血四項主要包括凝血酶原時間（PT）、活化部分凝血活酶時間（APTT）、纖維蛋白原（FIB）、凝血酶時間（TT），用來監測體內的內、外源凝血途徑及纖溶系統，是血栓性疾病的早期診斷、治療監測的必要指標，也是術前篩查的常規檢測項目，具有非常重要的臨床價值。因此，開展凝血試驗質量控制尤為重要[1]，質控品是室內質控工作的重要基礎，目前凝血質控品多是進口，價格昂貴，效期短，且非人源基質，在使用中存在一定的局限性，特別是在基層醫院檢驗科，制約了質控工作主動、持續的開展。本研究在差值質控法的基礎上，利用新鮮血漿樣本，把各參數的CV值作為變量，以樣本接力的方式進行室內質量控制，連續觀察6個月，探討該室內質控方法的可行性。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑 希森美康公司的CS-5100全自動凝血分析儀，試劑、校準品購自西門子醫學診斷產品（上海）有限，質控品購自上海昆淶生物科技有限公司。

1.2 方法 根據《實驗室內部研制質量控制樣品的指南》，選取日常工作中凝血功能正常和異常的樣本各1例，2-8oC條件保存，將該標本的測定值進行校正，把校正后的值假定為靶值，第二天重新檢測，根據假定靶值計算每個參數的CV值，同時再選取類似的新鮮標本作為新的質控品，2-8oC保存，把新質控品的檢測值根據當天的CV值進行校正，把校正后的值作為新的靶值，第二天重新檢測，根據校正后的靶值計算每個參數的CV值，依次類推，把CV值作為變量進行統計學分析，連續20天，計算每個參數CV值的平均值和標準差，刪除超過3sd的數值，把這個平均數和標準差作為暫時的均值和標準差，利用EXCEL繪制L-J質控圖，通過Westgard質控規則作為判斷標準，每天同商用質控品一起檢測，觀察PT、APTT、Fib、TT質控的穩定性。選取的標本要求無溶血、黃疸、脂濁，乙型肝炎表面抗原、丙型肝炎病毒、人類免疫缺陷病毒、梅毒均陰性。

1.3 統計方法 采用Excel軟件進行統計分析。

2 結果

在6個月時間，自制和昆淶凝血質控品的室內不精密度結果見表1，均滿足室內不精密度≤1/3Tea（以能力驗證/室間質評評價界限作為允許總誤差）的要求。

表1 自制質控的平均CV值和昆淶質控品的累積CV值

3 討論

機體凝血功能是由血小板、凝血系統、纖溶系統等共同作用完成的，相關的篩檢試驗主要包括PT、APTT、Fib、TT。PT與外源凝血系統的運行密切相關，主要反映外源性凝血因子II、V、VII、X在血漿中的水平；APTT與內源凝血系統的運行密切相關，主要反應凝血因子II、V、VIII、X、XI在血漿中的水平；Fib與TT是內、外凝血系統共同凝血途徑常用的試驗，主要反映肝素、AT-III及Fib在血漿中的水平。PT、APTT、Fib、TT組合的凝血檢查在臨床診斷和治療中起著極其重要的作用[2-4]，近年來，隨著循證醫學的發展，質量控制越來越受到各方面的重視，質控品是開展質控工作的重要環節，理想的質控品應是第三方的，具有人源基質-避免基質效應，瓶間差小，穩定性好等優點，濃度應處于醫學決定水平附近。目前，國內實驗室使用的質控品多為進口，價格高昂，訂貨周期長，特別是干粉制劑復溶后容易產生基質效應和較大的瓶間差，給實驗室使用帶來不便，特別是基層醫院，近幾年，基層醫院的檢測設備有了很大的提升，但實驗室質量控制工作仍有待提高。近年來,已有學者研究利用樣本血漿作為質控品來代替商用質控品，但由于凝血酶III的穩定性差，-20oC條件下穩定時間在22天左右，APTT、PT在1個月內表現穩定，之后有上升趨勢，不利于室內質控工作的長期開展，也有學者研究通過合適的方法來開展血常規室內質控工作，例如浮動均值法、差值法，但這種方法這種極差圖不能反映日間不精密度，不能判斷誤差類型，也不能對準確度進行評價，并且容易受樣本量和結果差異的影響。

本研究是在差值質控法的基礎上，收集檢驗科工作中凝血功能檢測結果正常和異常的血漿樣本各1例，來制備低值、高值室內質控品，首先將該標本的測定值進行校正，校正主要通過室間比對進行，校正的目的是為了進一步進行正確度評價，室內質控主要是監測儀器的不精密度，實驗室也可以根據實際情況，選擇后期校正。每天都要根據當天的CV值對靶值進行校正，是進行靶值的傳遞，為了觀察日間不精密度，可以繪制L-J質控圖，當失控時也能對誤差類型有個初步的判斷，進行失控分析。選取的標本應2-8oC保存，第二天重新檢測，不要凍存，凍融后會有纖維蛋白沉淀，影響檢測結果。把CV值作為變量，計算每個參數CV值的平均值和標準差，進行統計學分析，可以繪制L-J質控圖和運用Westgard質控規則進行判斷分析，同時每天的CV值都應小于1/3TEa。穩定性研究可以以不同的方式進行，但同步穩定性研究具有顯著性和精確性的獨特優勢[5]，本研究每天與昆淶凝血質控品一起進行同步穩定性評價，根據質控圖和Westgard質控規則進行判斷，6個月時間內，PT、APTT、Fib、TT平均不精密度均小于1/3TEa，與昆淶質控品相關性良好，無偏離現象。與昆淶質控品同步出現2次失控現象，校準后重新檢測即在控，均與試劑有關。

這種方法采用新鮮血漿樣本作為質控品，無基質效應，真正的第三方質控品，大大降低了成本，可長期穩定，同時能反映日間精密度，可判斷誤差類型，也可以對準確度進行評價，可替代進口質控品用于凝血項目室內質量控制，更適于基層醫院開展室內質控工作，值得推廣。