PCR技術在兒科支原體肺炎診斷中的應用

楊俠

（河北省唐山市遷西縣計劃生育技術服務站，河北 唐山 064300）

肺炎支原體是小兒肺炎的主要原因，也是非典型肺炎的主要病原體。MP肺炎作為非典型肺炎的一種，可導致多種并發癥，且無主要癥狀，給鑒別診斷帶來極大困難。因此，MP肺炎的早期診斷和治療，應重點引起醫務工作者的重視。隨著技術的發展更新，近年來多種多樣的檢驗方法出現在我們的視野，如分離培養法等各種方法。目前PCR技術檢測MP DNA已趨近成熟。我們對836例肺炎患兒采用咽拭子標本法進行MP DNA檢測，同時用間接血凝實驗（IHA）檢測血清抗MP-IgM。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取本院836例門診肺炎患兒，年齡分布如下：1-2歲233例，2-3歲212例，3-4歲225例，4歲以上166例。其中，400例為男性，436例為女性。正常對照組為300例。

1.2 方法

1.2.1 PCR 設置陰性組、陽性組兩組對照組。操作嚴格依照說明書指示。實驗中在紫外透射反射儀下觀察擴增產物電泳后反應，以144 bp處出現橙黃色帶或標本擴增帶與陽性對照擴增帶在同一水平位置判斷為陽性。反之則為陰性。記錄兩組實驗數據。

1.2.2 IHA法 滴度≥1:32判斷為陽性。

2 結果

2.1 正常對照組 300例健康嬰幼兒中5例血清抗MP-IgM結果為陽性，陽性率2.5%。50例血清抗MP-IgM陰性患者取咽拭子痰液樣本測MP DNA，結果亦均為陰性。

2.2 檢測結果 見表1。

2.3 陽性病例相關資料

2.3.1 一般資料 共選取43例，其中男性20例，女性23例。同時，22例來自城市，其他來自農村。在PCR法MPDNA陽性和抗MP-IgM陽性者均診斷為MP肺炎，占同期肺炎住院病例的5.1%。其中4歲以上15例，占1.8%；2-3歲的占比3.35%，為28例；1-2歲的占比1.4%，為12例。

2.3.2 起病時間與檢測結果關系 研究發現：PCR法能測定1周內起病的病例，且效果顯著。

2.3.3 病程與預后 本組病例預后良好，平均輸液天數為10d，僅5例治療周期時間超過2周以上。

表1 PCR法MP DNA與IHA血清抗MP-IgM結果對比

3 討論

隨著我國經濟的迅速發展，二胎政策的全面開放，嬰幼兒的增多為無數家庭帶去了歡樂，但同時帶來的龐大醫療壓力也不可忽視。近年來，兒童疾病感染數量不斷增加，在這之中，肺炎支原體是學齡兒童呼吸道感染的重要病原體之一，而且危害較大，嚴重威脅嬰幼兒的健康。對于此類疾病，能夠盡早進行診斷和治療是醫務工作者義不容辭的使命。但目前，限于技術的普及和局限，支原體肺炎未能得到早且有效的治療。

MP的培養過程缺點極多，性價比低。IHA法檢測抗體雖方法簡便，但敏感性不夠，在臨床上應用領域終究有限。以上種種問題不能得到有效解決，以致其作為感染的早期診斷不夠使人滿意。在此之際，我們發現PCR技術具有強大的擴增能力，有靈敏度高，特異性強等優點。國內外大量資料表明，利用PCR技術對MP DNA進行檢測是MP感染的早期實驗診斷的重要手段。

通過本文的研究發現PCR技術確實是一種早期診斷的有效檢測方法，同時陽性發現的時間差也向我們提示對于感染病程超過一周的患兒PCR并不是唯一選擇，但是病程一周內的幼兒，PCR技術是最佳選擇。同時，對于幼小嬰兒和免疫力低下的患兒，由于抗體不足，PCR法應為首選最佳。本研究發現本市兒童支原體肺炎的感染狀況，占小兒肺炎的31.7%，而發病年齡趨向于嬰幼兒，3歲以下高達84%，需要得到重視和有效控制。

研究中通過對結果分析，我們認為兩種方法同時使用檢測精度更高，同時在健康幼兒的對照組中，MP的陽性率也高達2.5%，表明健康兒童中也不乏有隱性感染的患兒。以上問題，仍需我們繼續進行研究、探索。