Ai熒光染色法與氫氧化鉀濕片法在甲真菌鏡檢中的比較

許薇

（黑龍江省大慶市油田總醫(yī)院門診皮膚性病科，黑龍江 大慶 163000）

甲真菌病作為臨床上十分常見的一種皮膚科疾病，由于該類疾病的治療周期較長、藥物價(jià)格昂貴的特點(diǎn)，加之部分患者可能伴發(fā)比較嚴(yán)重的不良反應(yīng)，因此，臨床的早期診斷具有十分重要的作用。目前，臨床上通常采取真菌培養(yǎng)以及氫氧化鉀鏡檢的方法進(jìn)行檢驗(yàn)，但是檢驗(yàn)結(jié)果可能會(huì)受到檢驗(yàn)技師以及標(biāo)本質(zhì)量等不同方面的影響[1]。本次研究抽取到我院就診的甲真菌病患者作為本次實(shí)驗(yàn)的研究主體，共58例，本次實(shí)驗(yàn)研究時(shí)間2019年1月-2019年6月，分別采取熒光染色體鏡檢（A組）以及氫氧化鉀濕片法（B組）進(jìn)行檢驗(yàn)，比較兩組檢驗(yàn)結(jié)果。

1 資料與方法

1.1 一般資料 抽取到我院就診的甲真菌病患者作為本次實(shí)驗(yàn)的研究主體，共58例，本次實(shí)驗(yàn)研究時(shí)間2019年1月-2019年6月。其中，男性患者31例，女性27例，最大年齡62歲，最小年齡28歲，平均年齡（54.12±6.57）歲。患者均自愿接受并配合本次研究并且未接受過抗真菌治療。

1.2 檢驗(yàn)方法 使用濃度為75%的乙醇消毒患者病甲后，刮取疑似病變部位的甲碎屑，將其均分兩等份，分別進(jìn)行熒光染色體以及氫氧化鉀濕片鏡檢。熒光染色體鏡檢（A組）。將所采集的甲屑標(biāo)本放置于玻璃載片，并加滴真菌熒光染色液1滴，使得染液體與標(biāo)本充分混合后，暗處靜置5 min，使其充分著色后放置蓋玻片，利用熒光顯微鏡濾鏡進(jìn)行觀察，真菌菌絲呈現(xiàn)亮藍(lán)綠色熒光則表示陽性。氫氧化鉀濕片法鏡檢（B組）。將所采集的甲屑標(biāo)本放置于玻璃載片，將濃度為10%的氫氧化鉀溶液滴入標(biāo)本，并放置玻璃蓋片，經(jīng)過微加熱后使得標(biāo)本充分溶解，隨后放置于奧林巴斯CX23型號(hào)的顯微鏡下進(jìn)行觀察，明顯可見真菌菌絲則表示陽性。以上操作均由2名技師或者醫(yī)師完成，結(jié)果一致則表示檢驗(yàn)合格。

1.3 臨床觀察指標(biāo) 比較兩組檢驗(yàn)結(jié)果。熒光染色后，真菌菌絲將會(huì)被標(biāo)記熒光，熒光顯微鏡下，明顯顯示制片雜質(zhì)以及背景呈現(xiàn)暗黑色，真菌成分則表示出清晰的亮藍(lán)色，易于被識(shí)別。氫氧化鉀濕片背景則呈現(xiàn)出雜亂無章的特點(diǎn)，真菌與背景的顏色區(qū)別相對(duì)較小，難以分辨。注意在實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)過程中質(zhì)控。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 本組研究采用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)的分析和處理，其中，計(jì)數(shù)資料以率（%）形式表示，通過卡方對(duì)其予以檢驗(yàn)，檢驗(yàn)水準(zhǔn)為P＜0.05，即差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

對(duì)比兩組檢驗(yàn)方法的結(jié)果：A組陽性檢出率33例（56.90%），B組陽性率22例（37.93%），A組陽性檢出率顯著高于B組，P＜0.05。見表1。

表1 兩組檢驗(yàn)方法的結(jié)果比對(duì)［n（%）］

3 討論

甲真菌病的發(fā)生幾率相對(duì)較高，占據(jù)甲病的50%左右，由于甲標(biāo)本角質(zhì)的含量顯著高于皮屑以及分泌物等其他組織，因此，采取氫氧化鉀濕片的鏡檢方法，對(duì)于甲真菌病的檢出率相對(duì)較低[2]。鈣熒光白作為一種非特異性的染料技術(shù)，能夠結(jié)合真菌胞壁的多糖以及其他原核生物，經(jīng)過紫外光燈的照射，染色真菌組織將會(huì)呈現(xiàn)出藍(lán)綠色。但是應(yīng)用氫氧化鉀濕片鏡檢的方法，部分易于受到干擾的皮屑以及脂質(zhì)將會(huì)著色很淺或者不被著色，因此，熒光染色法鏡檢的檢出效果比較理想[3-4]。本次研究結(jié)果顯示：A組陽性檢出率33例（56.90%），B組陽性率22例（37.93%），P＜0.05。由此可見，采取熒光染色法進(jìn)行鏡檢，具有溶液配比簡單的特點(diǎn)，采取普通的光學(xué)顯微鏡進(jìn)行檢查即可完成檢查，與氫氧化鉀濕片鏡檢的方法相比，具有一定的高效性，檢驗(yàn)結(jié)果相對(duì)更加準(zhǔn)確。

綜上所述，通過采取熒光染色法的鏡檢方法，對(duì)于甲真菌病患者來說，具有比較準(zhǔn)確而又高效的檢驗(yàn)效果。