核酸檢測在延邊地區無償獻血者血液篩查中的應用

王蕊

（吉林省延吉市延邊中心血站，吉林 延吉 133000）

1 材料與方法

1.1 標本來源于處理 研究過程中使用的樣本對象來自于2018年延邊無償獻血人員，在確定樣本之后，采取ELISA對血液樣本進行處理，對于檢測過程中發現的不合格血液，進行淘汰處理。檢測合格的血液樣本則繼續進行核算檢測。考慮到核酸檢測的需求，對于相關樣本進行無菌處理，并進行4 h的離心處理，處理后，將標本保存在4oC的環境之中。

1.2 試劑及儀器

1.2.1 檢測試劑 在整個檢測環節，主要涉及到ELISA檢驗方法，以及在此方法下所使用的的各類檢測試劑；相關抗原，抗-HCV（上海科華有限公司和北京萬泰有限公司）和HIV（廈門新創有限公司和北京萬泰生物藥業公司4代），梅毒螺旋體抗體（上海科華有限公司和廈門新創有限公司），丙氨酸轉氨酶ALT（深圳邁瑞有限公司）。核酸檢測試劑HBV、HCV、HIV-1型由上海科華公司提供。

1.2.2 檢測儀器 在進行相關檢驗的過程中，根據不同的檢測項目，針對性地選擇相對應的檢測設備，例如對于酶聯免疫檢測，選擇全自動酶聯免疫分析設備，并在操作過程中，嚴格遵循相關要求，確保檢測質效。核酸檢測：所用儀器上海科華核酸檢測系統；Hamilton TAR匯集提取儀ABI 7500實時熒光擴增分析儀；全自動脫蓋機。

1.3 方法

1.3.1 標志物的ELISA法 分別使用兩個不同廠家的試劑，并由兩位不同的人員，根據試劑使用說明，進行兩次檢測。其中對于酶聯免疫4項檢測，兩種試劑的檢測結果均顯示為陽性，具體來看，在使用單試劑進行初次篩選的過程中，出現雙孔復試反應，反應結果呈現為陽性。雙試劑檢測過程中，檢測結果為陰性。

1.3.2 HBV、HCV、HIV-1型核酸多人份檢測（NAT） 對于通過血清檢測的血液標本進行核酸檢測，在整個檢測環節，待檢核算樣本應當放置于生物安全柜之中，借助于相關設備，對核酸進行提取處理，在完成提取處理的基礎上，通過PCR法，對提取到的核算進行擴增處理，對于擴增后的核算，進行HBV、HCV和HIV3等項目的檢測。

1.4 統計學處理 為確保研究結果的有效性，在整個研究過程中，使用SPSS 13.2數據處理軟件，對整個實驗過程中獲取的數據信息進行全面梳理以及檢驗。

2 結果

2017-2018 年無償獻血ELISA法檢測陰性NAT檢測陽性統計中，HBV檢出率較高，目前HCV、HIV檢出率低，差異有統計學意義（P＜0.05），見表1。

表1 檢測結果

3 討論

為進一步提升臨床輸血的安全性，需要開展必要的血液篩查工作，通過篩查增強血液制品的安全系數以及臨床使用價值。ELISA檢測的是抗原抗體，其會造成病毒檢測的失效，無法滿足實際的輸血需求。從臨床來看，NAT具有極強的敏感性，通過NAT能夠對血液中含有的病毒核酸進行準確的檢測評估，縮短病毒檢測的周期，從而大大增強了整個檢測工作的準確性以及有效性，避免了病毒隱秘的風險，實現了遺漏項的科學高效排除。在這種情況下，不斷增強臨床輸血的安全性以及管理能力，從而有效阻斷各類血液性疾病的傳播路徑，構建成熟高效的血液篩查機制，為各類臨床質量工作的開展奠定堅實基礎。