迂斌,顏運秋,徐少勇,劉云鵬
(1.長沙道勤生物科技有限公司,湖南 長沙 410000; 2.湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)動物醫(yī)學(xué)院, 湖南 長沙 410128)
1.1.1 細胞、 細胞器和其環(huán)境接界所有膜結(jié)構(gòu)的總稱;磷脂構(gòu)成了膜的基本骨架;
1.1.2 帶有機污物的豬欄經(jīng)過多次使用后, 在欄舍表面會形成由糞便、 灰塵和細菌組成的生物膜存在于各種設(shè)備表面(漏縫地板、木頭、水泥地板、不銹鋼表面)。
1.1.3 普通的消毒劑存在著三大弊端:垂直墻面和屋頂、降溫濕簾等特殊空間更是消毒盲區(qū); 消毒劑顆粒也只能維持1~3 分鐘也就蒸發(fā)掉,消毒位置無法分辨。
1.1.4 2017 年亞太地區(qū)豬病會議提出的豬舍的清潔與消毒國際標(biāo)準(zhǔn)七大關(guān)鍵點其中第4 點就明確強調(diào)用清潔劑泡沫浸泡建筑物或設(shè)備, 然后將剩余的有機物質(zhì)沖洗干凈。 泡沫消洗劑(速清)通過泡沫發(fā)生裝置將液態(tài)的消毒劑轉(zhuǎn)化為氣相泡沫形式黏附在物體表面, 與待消毒表面接觸后通過潤濕、 乳化、滲透、分散及增溶等作用方式,去除物體表面的生物膜延長消毒時間,使生物膜更完全地打開, 隨后其中的微生物才能夠釋放出來, 再以常壓沖洗, 即可清除所有的有機污物以達到深度清潔的目的。
1.2.1 氣溶膠(aerosol)由固體或液體小質(zhì)點分散并懸浮在氣體介質(zhì)中形成的膠體分散體系, 又稱氣體分散體系。 使用高壓水槍沖洗的時候,水汽和灰塵都被卷到空氣里面,形成氣溶膠, 各種病原彌漫在空氣當(dāng)中。 這就存在病原從一個豬舍隨風(fēng)傳播到其他豬舍的潛在風(fēng)險;可存載多種病原微生物并且是傳播病原微生物的重要途徑。 壓力愈高,用水量也必然愈大,噪音也愈大,能源消耗也愈大, 而且還會產(chǎn)生愈多的受污染霧滴懸浮在空氣中, 這些霧滴又會沉降到圈舍表面。
1.2.2 高壓清洗的壓力為4900千帕, 大約50 公斤力/平方厘米,等于5 兆帕。 高壓水去除有機物質(zhì)和垃圾時會產(chǎn)生一種被污染的氣溶膠(例如:PRRS / h1n1 風(fēng)險), 這種被污染的氣溶膠又會再次污染其他的豬舍以及豬場的其他區(qū)域, 甚至周邊地區(qū) (距離1 千米以外的豬場)。需要強調(diào)的是, 高壓沖洗帶有傳播微生物的危險, 因此是關(guān)鍵的控制點。
目前消毒工作中常見誤區(qū)有:消毒劑的濃度越大效果越好; 消毒時溫度越高越好; 配伍的消毒劑越多越好;采購的消毒劑越貴越好;重視舍內(nèi)消毒,輕視環(huán)境消毒;重視消毒制度,輕視消毒程序,忽略消毒結(jié)果。 比如豬場大門消毒池冬天需要加鹽防凍處理,2.5 立方米水加15千克鹽,深度15 厘米 以上);甲醛消毒環(huán)境溫度應(yīng)保持27℃左右、 相對濕度達到70%以上消毒作用才得以發(fā)揮。 使用方法是高錳酸鉀和甲醛比例為1∶2,先放入高錳酸鉀再加入甲醛, 高錳酸鉀30 克+甲醛60 毫升/立方米放入搪瓷鍋中加熱煮沸24 小時直至將水蒸發(fā)耗干, 然后開窗通風(fēng)24 小時。
消毒劑使用的注意事項:
pH:酚,次氯酸是以非離解形式起殺菌作用, 在酸性環(huán)境中殺菌作用加強; 戊二醛在酸性pH 時穩(wěn)定,在堿性pH 殺菌作用強,對陰離子型消毒劑來說,在酸性條件下效果好,因為細菌表面的負電荷減少。
溫度原則:30℃~40℃溫水效果最好,不能用50℃(比如碘制劑)以上的熱水稀釋消毒劑, 以免降低消毒效果。 但還應(yīng)注意的是,多數(shù)消毒劑在溫度低于17℃時,每降低3℃,會降低消毒效果50%。
清潔的表面:污垢;全面接觸:應(yīng)避免消毒死角,如小的縫隙,劃痕。
徹底清洗待清洗區(qū)域表面;
重點清洗盲區(qū)的再次處理;
選擇敏感的消毒劑并按方法使用;
按清洗消毒程序執(zhí)行, 并做好消毒后的檢測。

表1 消毒劑的選擇和使用方法
清洗消毒六部曲:清掃、清洗、泡洗、消毒、干燥、檢測。
清掃:清除舍內(nèi)的所有有機物,如糞便、灰塵、蜘蛛網(wǎng)等,以獲取最佳的清洗效果。
沖洗:使用高壓清洗水槍(2~5兆帕)對欄舍徹底地沖洗,尤其要做好欄位底部污物及糞溝的清洗,及時排出糞溝的污水。
泡洗: 先用清水噴灑待清洗區(qū)域, 間隔20~30 分鐘后再用泡沫清洗劑速清,調(diào)節(jié)好水壓(1~2 兆帕)將待清洗區(qū)域均勻的噴灑泡沫清洗劑, 并保持泡沫浸潤不少于20 分鐘;再用高壓清洗水槍(5 兆帕以上)沖洗泡沫清洗劑及頑固性污漬。
消毒:待欄舍表面無水漬后,用戊二醛制劑環(huán)清(1∶100)對欄舍均勻的噴灑消毒, 然后密閉再次進行熏蒸消毒 (高錳酸鉀和甲醛比例1∶2,高錳酸鉀40 克+甲醛80 毫升/立方米)。
干燥: 保證干燥時間不少于7天。
ATP 熒光檢測: 對欄舍內(nèi)進行多點采樣檢測, 進行清洗消毒的效果評估。
豬場飲用水需要經(jīng)過氯處理(3~50PPM);另外可以用磷酸(1∶20)去除水中的生物膜。
對水線進行檢修時, 盡可能清除水箱里的污物, 并將管道中的水排盡然后灌注消毒劑, 如二氯異氰尿酸鈉消毒劑(1∶300~500),并保持作用時間不少于30 分鐘,然后再用清水沖洗管道。
單獨拆掉飲水器浸泡消毒,環(huán)清(1∶100)浸泡30 分鐘以上。
若需要清除水線中的水垢時,可選擇除垢劑或酸制劑, 操作方法和水線消毒類似。
清理: 首先清理車輛駕駛室以外的一切的可移動的物品, 并清掃車廂內(nèi)的糞便、 墊料和毛發(fā)等運輸途中產(chǎn)生的污物;使用高壓水槍(2~5 兆帕)對車輛進行徹底的清洗。 同時司機到洗消點指定的淋浴室,先將手機交給生物安全專員, 用酒精擦拭消毒后并放入密閉的封口袋中。 將脫下的衣物放入指定臟衣筐中, 進行洗浴并更換衣柜中的連體工作服和水鞋, 由另一側(cè)的凈區(qū)門出來。
沖洗: 先使用洗滌溶液對駕駛室內(nèi)的各部位進行清潔, 然后刷洗干凈駕駛室地面和踏板, 最后使用消毒溶液對駕駛室內(nèi)的所有部位噴霧擦拭消毒;使用高壓水槍(5 兆帕以上)清洗整體車身及車輛底盤,清洗人員對車廂頂部及側(cè)面的清洗盲區(qū)再次進行處理。
泡洗:使用專門的泡沫槍(1~2兆帕) 對車輛全身均勻的噴灑泡沫清洗劑速清, 并保持泡沫浸潤至少20 分鐘,再用超高壓水槍(5 兆帕以上)對車輛進行全面的清洗。
消毒:待車輛瀝干后,再用低壓或噴霧水槍(1~2 兆帕)對車輛全方位的噴灑消毒溶液, 并保持消毒溶液與噴灑部位的作用時間不少于20分鐘。
烘干:將車輛開到烘干區(qū),打開駕駛室門,讓車輛盡快徹底地干燥。
ATP 熒光檢測: 對車輛的清洗消毒盲區(qū)取樣檢測進行消毒效果的評估。
4.4.1 消毒處理
豬群轉(zhuǎn)走后, 為防止病原的擴散,首選對走廊、地面和墻壁噴灑2%的火堿,作用1 小時。對棟舍地面、道路進行徹底消毒。 漏糞板地下污水按照2%的比例投放火堿,浸泡3 天。
4.4.2 準(zhǔn)備工作
清空糞池, 使糞池液面降至最低水平。 拆除房間中的裝置并清空料槽。 移除生產(chǎn)車間所有的生產(chǎn)工具 (包含一切可移動的推車等)、所有的木質(zhì)材料、彩條布、掃把等低值易耗品全部收集焚燒處理; 可以消毒的物品(飲水器、水龍頭等)收集、清洗后過環(huán)清或復(fù)合酚浸泡消毒48小時; 在進行浸泡和沖洗前, 將電機、 電熱器、 非防水的插座包裹起來。
4.4.3 熱水浸泡
使用低壓(1~2 兆帕)噴槍自上而下將屋頂(天花板)、墻面、欄體、料線、水線、地面和道路等打濕,使用60℃的熱水,每間隔30 分鐘打濕一次,持續(xù)2 小時。 浸泡時關(guān)閉風(fēng)機或使用最小的通風(fēng)模式, 延長浸潤作用時間。
4.4.4 中壓沖洗:(包括屋頂、墻體、料管、欄體、地面和走廊、漏糞地板)
中壓沖洗時采用60℃的溫水,180 帕的壓力, 按照從上到下的順序,先頂部、墻面、再輸料管、配量器、欄體、料槽、地面、漏糞地板。
天花板沖洗: 用廣角噴頭大面積沖洗。
欄體/產(chǎn)床、料線等:在進行天花板沖洗時, 任何與豬體直接接觸的設(shè)備和部位都必須進行徹底地清洗, 特別要注意那些豬舌頭能接觸的角落、 夾縫部位: 如豬欄門的橫檔、門鉸合部、飼槽角落等。 對于料管等要全方位進行沖洗, 然后人工使用鋼絲球擦拭欄桿、料筒、料線、百葉窗、風(fēng)機葉片。 輸料管、配量器等塑料或者易損物件時要注意壓力,近距離沖洗。 注意:不要用鋼絲球刷產(chǎn)床, 避免鋼絲球?qū)Υ裁驽冧\保護層的破壞。
供水系統(tǒng): 病原體可能存在于供水系統(tǒng)的水箱、飲水器等,成為新的傳染源, 因此, 需進行徹底地清理。 水龍頭、水碗等需拆下,排盡污水并反復(fù)沖洗。 乳頭狀飲水器也應(yīng)拆下,徹底清洗,然后在消毒液中浸泡48 小時。 飲水頭必須用高壓水槍沖洗,然后用過硫酸氫鉀(1∶200)沖洗,在完成上述步驟后再安裝及用二氧化氯進行浸泡清洗, 消毒液徹底消毒整個供水系統(tǒng)。 注意:豬舍空置期間應(yīng)徹底放干供水系統(tǒng)中的殘水。
混凝土地面和走廊: 高壓水槍噴頭距離地面以20~30 厘米為宜,沖洗可以除去附著在水泥地上的有害物質(zhì),輔以充分地浸泡,使用清洗劑將能更有效地除去可能存在的病原體。 沖洗的污水均應(yīng)通過下水道或排污管排出。
漏縫地板: 拆掉配懷舍兩頭和中間的幾塊漏糞地板, 使用高壓水槍清洗漏縫地板上下兩個表面,兩個側(cè)面。 下水道也使用高壓水槍沖洗,隨時保持通暢。 在清理下水道或排污系統(tǒng)時, 可能挖出污泥時會污染已清潔的豬舍, 在清洗這些污物后,應(yīng)再次清洗豬舍。
電器設(shè)備:吊燈及燈罩、電器設(shè)備都必須手工洗刷清潔, 消毒后方可使用。 可移動的設(shè)備:小料槽、保溫墊、保溫?zé)簟⒏舭?、飲水器等,在消毒液中浸?8 小時,大體積的水箱等可用做消毒浸泡容器。 小料車等設(shè)備在舍外曬幾周, 然后再清洗消毒。
4.4.5 泡沫浸泡
利用專用噴泡沫槍在天花板、墻體、 欄體等噴灑速清等泡沫型浸泡劑,注意噴出是扇形,泡沫狀,可以附著在墻壁、欄體上,增加浸泡軟化的時間。 浸泡10~15 分鐘后再開始第二次沖洗。
4.4.6 二次清洗
高壓沖洗時采用60℃的溫水,180 帕的壓力, 按照從上到下的順序,先頂部、墻面、輸料管、配量器、欄體、料槽、地面、漏糞地板。
4.4.7 清洗效果檢查
由場長、 車間主管對清洗效果進行徹底檢查, 尤其注意漏糞地板背面、連接處縫隙、欄體與墻體結(jié)合部等; 對于未清洗干凈的地方進行粉筆標(biāo)記,再次進行徹底清洗,清洗完成再次檢查。
4.4.8 糞溝污水排空
清空糞池將液面降至盡可能得低,對地溝進行沖洗,清洗完成后,關(guān)閉漏糞地板下污水池的排水口。
4.4.9 生產(chǎn)區(qū)消毒
第一次消毒:二次清洗結(jié)束,通風(fēng)干燥48 小時,充分干燥后進行一次徹底的消毒(2%火堿),地溝按照容積添加火堿進行消毒 (配置終濃度2%), 液面浸過漏縫板后浸泡消毒48 小時。 飲水系統(tǒng)使用3%二氯異氰尿酸鈉進行消毒。
采樣、二次消毒:第一次消毒,通風(fēng)干燥48 小時, 徹底干燥后,對豬舍進行一次徹底清洗, 干燥后采樣檢測ASFV/PRRSV2。 然后進行第二遍消毒, 建議選用復(fù)合酚 (戊二醛、過硫酸氫鉀)。
第三次消毒、采樣:二遍消毒結(jié)束,通風(fēng)干燥48 小時,對豬舍欄位固定處死角和料槽等死角進行火焰消毒,然后進行第三次消毒。 消毒采用高錳酸鉀和甲醛熏蒸, 完成豬場的清洗消毒后, 多點采樣(豬舍、糞溝、路面、漏縫板背面、屋頂、辦公室、宿舍、廚房等),用PCR 檢測ASF病毒,檢測全為陰性,表示清洗消毒工作完成。 最后進行白化處理(配制10%的石灰乳+5%的火堿溶液制成堿石灰混懸液對豬舍、欄桿、豬場外路面、 墻體及豬場外圍500 米內(nèi)的地面白化)。
4.4.10 空置、引進哨兵動物
空置兩個月,進哨兵動物前,高錳酸鉀和甲醛熏蒸12 小時以上,進豬前通風(fēng)24 小時。 哨兵動物觀察2個月(包括飲水、采食和體溫),采樣檢測ASFV/PRRSV2。
注:需要維修和改造的,在完成后需要進行3 次徹底地清洗和消毒。 生產(chǎn)區(qū)辦公室清洗消毒同生活區(qū)。
4.4.11 生產(chǎn)區(qū)內(nèi)物資的處理
4.4.11.1 飼料、藥品和疫苗
生產(chǎn)區(qū)內(nèi)殘存的飼料、已經(jīng)開封的疫苗和藥品全部銷毀 (燒毀或深埋)。
庫房儲存的藥品:使用1∶200 過硫酸氫鉀水進行浸泡消毒1 小時,所有物品必須完全浸泡在消毒水內(nèi),浸泡消毒結(jié)束后晾干水分,放到干凈的房間進行高錳酸鉀和甲醛熏蒸消毒12 小時以上,到指定隔離定點進行過硫酸氫鉀水浸泡1 小時,晾干后熏蒸消毒24 小時, 封存30天。 使用棉簽對物品表面進行采樣檢測ASFV/PRRSV2 病原。
庫房儲存的疫苗: 使用1∶200過硫酸氫鉀水進行浸泡消毒30 分鐘, 所有物品必須完全浸泡在過硫酸氫鉀消毒水內(nèi),在此期間,對存放疫苗的冰箱使用過硫酸氫鉀水進行擦拭。 使用棉簽對物品表面進行采樣檢測ASFV/PRRSV2 病原。
4.4.11.2 物資、器械處理措施
生產(chǎn)區(qū)物資: 已經(jīng)在生產(chǎn)區(qū)接觸過豬或者投入使用的物品全部做銷毀處理(例如擋豬板、防護服、針頭、注射器、趕豬棒、靴子、拖鞋);以及生產(chǎn)區(qū)內(nèi)難以做到完全清洗消毒的物品全部銷毀處理 (混精袋、12×20 和16×38 針頭、標(biāo)記蠟筆、采精杯、采血針+持針器、單項溫度計、縫合針、蓋玻片、趕豬拍、注射器、后備輸精管、精液袋2 升、輸精瓶、試管架、手術(shù)刀柄、手術(shù)剪刀、顯微鏡燈泡、一次性防護服、移液槍頭、載玻片等)。
倉庫物資、器械:未進入生產(chǎn)區(qū)的物資、器械且包裝完好無損的,先使用1∶200 過硫酸氫鉀水進行浸泡1 小時,不能浸泡的使用過硫酸氫鉀水擦拭。 晾干后使用高錳酸鉀和甲醛熏蒸12 小時以上。 到指定地點進行過硫酸氫鉀水浸泡1 小時, 晾干后熏蒸24 小時, 封存隔離30 天后使用棉簽擦拭采樣檢測ASFV/PRRSV2 病原。
生產(chǎn)區(qū)內(nèi)貴重儀器 (如采精實驗室電子稱、耳號筆、恒溫載物臺、精液保溫箱、數(shù)顯恒溫加熱板、水浴鍋、顯微鏡、移液槍、疫苗箱以及其他固定資產(chǎn)如B 超、電腦、冰柜等物品)進行過硫酸氫鉀(1∶200)擦拭,擦拭后在場區(qū)內(nèi)使用高錳酸鉀和甲醛混合物熏蒸12 小時以上。 封存隔離30 天后使用棉簽擦拭采樣檢測ASFV/PRRSV2 病原。 哨兵動物監(jiān)測期, 用抹布擦拭生產(chǎn)區(qū)內(nèi)的貴重儀器, 使之與哨兵動物接觸,觀察哨兵動物的健康狀況。
4.5.1 清掃、沖洗、泡洗、消毒、干燥
生活區(qū)環(huán)境: 清理掉所有的生活垃圾,場區(qū)內(nèi)的雜草。 生活區(qū)的道路和室外的土地,全部使用5%的火堿進行噴霧消毒, 使用20%生石灰水+5%燒堿進行白化或者鋪撒生石灰乳。
辦公室、宿舍(包括門崗)房屋內(nèi)所有被子、窗簾、衣服全部清理,只留床、桌椅、空調(diào)等。 辦公室和宿舍內(nèi)的辦公桌、家具全部使用1∶200的過硫酸氫鉀水進行擦拭, 使用過硫酸氫鉀水拖地, 再使用溴化二甲基二癸基烴銨(1∶200 倍)消毒一遍,最后使用三氯異氰尿酸鈉進行熏蒸24 小時。
活動室、廚房和餐廳使用1∶200的過硫酸氫鉀水進行擦拭, 然后使用溴化二甲基二癸基烴銨 (1∶200倍)擦拭一遍,最后使用三氯異氰尿酸鈉進行熏蒸24 小時。
被褥、窗簾、床單和被罩使用過硫酸氫鉀水浸泡12 小時后清洗消毒、烘干(60℃30 分鐘以上),臭氧熏蒸24 小時。
路面、道路使用火堿進行消毒,使用20%生石灰乳+5%燒堿進行白化。
消毒結(jié)束后,對活動室、宿舍、廚房、餐廳門口、洗澡間、走廊及場內(nèi)環(huán)境采樣檢測ASFV/ PRRSV2 和金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)。
個人物資處理: 員工帶走的衣服、鞋子等物品,在離場前進行過硫酸氫鉀水浸泡、清洗、烘干(或者晾干)處理,使用臭氧熏蒸消毒24 小時。 手機、電腦等電子產(chǎn)品等使用酒精固體凝膠擦拭消。 不能清洗消毒的物品清理干凈, 使用臭氧熏蒸24小時。 不帶出豬場的物品全部銷毀處理。
4.5.2 豬場外圍清洗消毒
污染的土壤: 包括和死動物接觸過的及進行強制剖檢區(qū)域的土壤等潛在被非洲豬瘟病毒污染的地方均勻的灑上大量生石灰乳和火堿,每平方米添加10 升的水。
堆尸房: 死豬及堆肥所用的木渣全部移走,對堆尸房使用5%燒堿消毒,鋪撒生石灰乳,處理完成后空置2 個月。 堆尸房使用的木渣提前購買,儲存30 天后方可使用(期間可以采用三氯異氰尿酸鈉熏蒸1~2次)。
污水處理區(qū): 污水池周邊使用5%的火堿消毒, 污水池周邊及道路全部鋪撒生石灰乳。
場內(nèi)料車、仔豬中轉(zhuǎn)車、無害化處理車輛等: 按照洗消中心清洗消毒處理。
4.6.1 嚙齒類動物
第一次清洗消毒時, 聘請專業(yè)滅鼠公司對豬場實施滅鼠工作。 豬場外部圍墻、 棟舍和棟舍內(nèi)走廊投放老鼠藥和捕鼠器,每隔5~10 米放置一個餌料盒,每7 天檢查一次。 收集死鼠,作無害化處理。 豬場內(nèi)雜草全部焚燒處理,豬舍周邊1~2 米,料塔附近使用水泥硬化或者鋪撒碎石。
貓、狗動物處理:清除豬場周邊的野貓、野狗等。
蚊、蠅:蚊、蠅能在短時間內(nèi)傳帶病原體。 如果在新的豬群進入前,場內(nèi)近期還有死亡動物或尸體,蚊、蠅很可能將病原傳給新群體, 在疾病流行期更應(yīng)注意防蚊、蠅。 在豬舍使用殺蟲劑及粘附劑防控蚊蠅;使用紗窗、封閉豬舍。

表2 采樣部位及抽樣檢測
第二次清洗消毒之后,按照表2的采樣部位,每個地方抽樣檢測,評估消毒效果。 熏蒸結(jié)束后,按照采樣方案,采樣進行檢測,檢測不合格的重新進行消毒處理。
棟舍進行消毒檢測合格后,空置2 個月, 進哨兵動物前使用高錳酸鉀和甲醛進行熏蒸。
用量: 每立方米需高錳酸鉀6.25 克,40%甲醛12.8 毫升; 計算:長×寬×高(包括凹凸部分)。
方法: 先打濕; 使室溫保持在27℃左右; 每3~4 米放置一平底容器;在所有容器內(nèi)放入高錳酸鉀,量取甲醛, 從豬舍一端開始迅速倒入甲醛。 或先倒入甲醛而后將稱量好的、用紙包的高錳酸鉀放入容器,這樣更安全。 如事先在容器內(nèi)放入1/2~1 倍量的水,可使反應(yīng)緩和,不致使內(nèi)容物濺出來。 關(guān)閉門窗熏蒸12小時以上; 進豬前至少通風(fēng)24 小時。 熏蒸消毒結(jié)束后,通風(fēng)24 小時后,哨兵動物進場,監(jiān)控哨兵棟物的體溫、采食,為期2 個月。 產(chǎn)房:每個產(chǎn)房單元按照產(chǎn)床投放5%的豬,每天更換一個產(chǎn)床。
配懷:限位欄按照5%的比例投放,每天更換一個限位欄。
GDU(后備培育期):每個大欄放2 頭。
所有哨兵動物觀察2 個月,每兩周采血一次, 五合一檢測ASFV/PRRS2 抗原。
哨兵豬無異常,檢測合格,按照生產(chǎn)計劃分批次進豬。 哨兵動物出現(xiàn)死亡, 所有死亡的哨兵動物采樣進行熒光定量PCR 檢測。