新發MBTPS2基因突變致毛囊性魚鱗病、禿發、畏光綜合征一例

李云玲 鄭惠文 李寅 王麗華 李薇 郭小璇 黃春蘭 周沙 呂中法浙江大學醫學院附屬兒童醫院皮膚科，杭州 005；杭州大關上塘社區衛生服務中心皮膚科 006；浙江大學醫學院附屬第二醫院皮膚科，杭州 0009

毛囊性魚鱗病、禿發、畏光綜合征（Ichthyosisfollicularis，atrichia and photophobia syndrome，IFAP）是一種非常罕見的遺傳性疾病，典型臨床表現為先天性非瘢痕性無頭發、畏光及毛囊性角化過度［1-2］。目前研究顯示，其發病的分子基礎是膜結合轉錄因子蛋白酶位點 2（membrane-bound transcription factor protease site 2，MBTPS2）基因突變［3］，但MBTPS2基因突變可以出現廣泛的臨床表型譜，如IFAP綜合征、腦異常、智力發育遲緩、外胚層發育不良、骨骼畸形、先天性巨結腸、耳朵畸形、耳聾、眼發育不全、腭裂、隱睪癥、腎發育不良/發育不全綜合征（BRESHECK綜合征）、棘狀毛囊角化?。↘FSD）及Olmsted綜合征，而其中的IFAP綜合征罕見。我們報道1例IFAP綜合征，該病例為國內外首次報道MBTPS2基因c.1165C＞T突變病例。

病歷資料

患兒男，2歲7個月，因皮膚干燥、無頭發2年余，伴畏光就診，患兒出生時即表現為皮膚菲薄光亮如羊皮紙，干燥伴糠秕樣鱗屑，局部干裂有小裂隙，無明顯紅斑及丘疹，先天無頭發，診斷為先天性魚鱗病，給予全身潤膚劑涂抹后稍緩解。1個月后基因檢查顯示，MBTPS2基因c.1165C＞T突變（轉錄本NM_015884），診斷為魚鱗病、外胚層發育不良，建議繼續外用潤膚劑。之后患者還出現了皮色丘疹，給予外用糖皮質激素軟膏，緩解不明顯?；純?、5月齡時出現畏光，在室外陽光強烈時瞇眼，后逐漸加重，同時伴有瞼結膜稍微干燥，間斷性給予玻璃酸鈉滴眼液及0.5%左氧氟沙星滴眼液能稍緩解，但畏光持續存在。11月齡時出現抽搐，結合腦電圖診斷為癲癇。每日給予丙戊酸鈉糖漿和左乙拉西坦片治療，抽搐癥狀得到控制。

患兒母親孕1產1，孕37周順產，孕期無疾病史和毒物接觸史?；純撼錾w重2.5 kg，6個月會抬頭，10個月能坐穩，14個月會爬，2歲3個月會獨站，2歲4個月會獨走?；純哼\動智力發育落后，目前運動智力發育水平相當于13月齡幼兒。Gesell發育測試顯示，應物能發育商43，粗動作能發育商45，細動作發育商54，言語能發育商61，應人能發育商57。父母否認近親結婚，家族中僅母親有皮膚干燥病史，其他成員無先證者臨床表現?；純涸蚋构蓽闲别藿邮苁中g治療。

體檢：體重12.4 kg，身高93 cm，頭圍48.5 cm。室外陽光強時閉眼，眼結膜稍干燥粗糙，角膜無潰瘍及血管增多。牙齒形態無異常。頭發缺如（圖1A），頭部光亮，無瘢痕；睫毛及眉毛稀疏，顏色淺；全身有毳毛，但稀疏，顏色淺淡。全身皮膚干燥，粗糙，后枕部（圖1B）、后背和四肢散在分布粟粒大小皮色丘疹，觸之棘手感。手部皮膚干燥伴鱗屑，無掌跖狀角化過度（圖1C）。指、趾甲均無增厚。心、肺聽診無異常，肌力和肌張力正常。雙側睪丸無異常。

實驗室和輔助檢查

頭顱核磁共振：雙側大腦半球腦回偏小，腦溝偏寬深，雙側側腦室三角區旁見斑片狀稍長T1及稍長T2信號影，雙側腦室略偏寬大，腦外間隙增寬，提示腦發育不良。視頻腦電圖（抽搐期間）：清醒檢測時兩枕區多量高δ活動波。心臟超聲：房間隔缺損。血尿糞常規、肝腎功能、甲狀腺功能均正常。染色體核型分析：46，XY。血串聯質譜檢查：未見氨基酸和和?；鈮A譜異常，血氨及乳酸正常。胸部、腹部、四肢長骨及脊柱X線檢查未見異常。肝、膽、胰、脾、雙腎B超均正常。腦干聽覺誘發電位正常。

基因測序

1.基因組DNA提?。航浾憬髮W醫學附屬兒童醫院倫理委員會批準，并經患兒父母簽署知情同意書。采集患兒外周血5 ml及其父母外周血各2 ml，利用EDTA抗凝，使用Qiagen FlexiGene DNA Kit方法提取血液樣本基因組DNA。

2.二代測序：利用超聲波破碎儀將DNA樣本進行片段化處理，在DNA片段的兩端加上接頭，并將粘性末端補平后進行PCR文庫擴增及純化。利用Agilgent公司SureSelect探針富集體系將文庫擴增后的DNA與探針進行雜交捕獲和擴增，再利用Illumina的NextSeq 500測序平臺對擴增產物進行雙端測序，獲得Fastq格式的數據。使用軟件CASAVA（1.8.2）將原始數據轉化為可識別的堿基序列，然后使用GATK(v3.6）、CODEX和XHMM(v1.0)檢測SNV（單核苷酸變異）、InDel（小的插入缺失變異）和拷貝數變異，再利用Ensembl數據庫（http://grch37.ensembl.org/index.html）、UCSC數據庫（http://genome.ucsc.edu）、NCBI數據庫（http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc）和OMIM數據庫（http://www.omim.org/）對檢測到的基因突變進行相關注釋。篩選變異信息后獲得可疑致病性突變位點。

圖1 患兒臨床表現 1A：頭部頭發缺如，頭皮光亮，無瘢痕；1B：枕部毛囊性丘疹；1C：手部皮膚干燥伴鱗屑

3.Sanger測序驗證（一代測序驗證）：在人類基因組數據庫GenBank中獲得MBTPS2基因序列，通過引物設計網站Primer Z（http://genepipe.ncgm.sinica.edu.tw/primerz/primerz4.do）對 MBTPS2基因第9外顯子上下游設計引物，上游5′-CCGGAAAG CAGTTGAAGCAA-3′，下游5′-TCCATAGGCAGGC ATGGATT-3′，引物由康旭醫學檢測所合成。

患兒及其父母基因組DNA分別根據引物反應條件（95℃預變性10 min，95℃變性30 s，60℃退火30 s，72℃延伸45 s，重復循環35次，72℃延伸5 min）進行 PCR擴增（試劑：Goldstar Taq mix，儀器：ABI PCR），將所得PCR產物進行鑒定純化，對純化后產物進行Sanger測序（ABI 3730一代測序儀）。將得到的一代測序結果與Ensembl數據庫所公布的序列進行比對分析。

4.結果：采用二代測序及可疑位點經父母一代測序驗證顯示，患兒及其母親MBTPS2基因存在c.1165C＞T（p.pro389Ser）突變（圖2），即MBTPS2基因第9外顯子中編碼區第1 165位核苷酸發生錯義突變，由C變為T，對應密碼子核苷酸序列CCU→UCU改變，導致氨基酸序列改變（即第389號氨基酸脯氨酸變為絲氨酸）。受檢者父親MBTPS2基因未見異常。

診斷與治療

圖2 MBTPS2基因檢測結果 患兒和母親MBTPS2基因第9外顯子存在c.1165C＞T突變，父親MBTPS2基因無異常

根據患兒皮膚干燥、畏光、先天無頭發、毛囊性丘疹、智力運動等發育落后，結合患兒存在MBTPS2基因突變，確診為IFAP綜合征。繼續給予抗癲癇、認知康復訓練及保濕潤膚治療。

討 論

IFAP綜合征是一種X連鎖先天遺傳性疾?。?-2］，目前全世界對該病的報告僅近40例。2009年Oeffner等［3］證實，定位于Xp22染色體 MBTPS2基因（編碼膜內鋅金屬蛋白酶）的突變是造成IFAP綜合征的分子基礎。MBTPS2基因突變表型譜廣泛，可以導致IFAP綜合征或BRESHECK綜合征、KFSD和X連鎖的Olmsted綜合征，這些綜合征之間有臨床重疊［4-10］。IFAP綜合征的臨床癥狀輕重不一，經典三聯癥為毛囊性魚鱗病、斑禿和畏光，部分患者有其他臨床表現，包括智力發育遲滯、腦異常、腹股溝疝和隱睪，但沒有骨骼或者腎臟等臟器異常。該患者及其母親MBTPS2基因c.1165C＞T突變（p.pro389Ser），即MBTPS2基因第9外顯子中編碼區第1 165位核苷酸發生錯義突變，由C變為T，對應密碼子核苷酸序列CCU→UCU改變，導致氨基酸序列改變（即第389號氨基酸脯氨酸變為絲氨酸）。受檢者父親MBTPS2基因未見異常。基于該患兒有皮膚干燥、皮膚角化性丘疹、先天性無頭發、畏光，伴有癲癇、智力發育遲緩等臨床表現，結合有MBTPS2基因突變，診斷為IFAP綜合征。

參考ExAC（Exome Aggregation Consortium）、GnomAD（Genome Aggregation Database）、ClinVar和 HGMD（Human Gene mutation Database）數據庫，未發現MBTPS2基因有c.1165C＞T突變的報道，故本研究為國內外首次報道MBTPS2基因c.1165C＞T突變致IFAP綜合征。

IFAP綜合征需與棘狀毛囊角化?。↘FSD）鑒別，該病也可由MBTPS2基因突變引起，為進行性瘢痕性脫發性毛囊角化綜合征［2，9］。KFSD主要臨床表現為毛囊角化過度、繼發于毛囊角化的后天性瘢痕性脫發，伴卷曲發，無皮膚干燥脫屑等魚鱗病改變［9］。IFAP 還需與角膜炎、魚鱗病、耳聾（keratitis，ichthyosis and deafness，KID）綜合征鑒別，KID主要臨床表現為角膜炎、角化性斑塊，常伴有嚴重的聽力損害［11］。

IFAP綜合征的遺傳模式還在繼續爭論中。由于開始報道的患者均為男性，且無男性至男性的傳遞模式，故該病X連鎖隱性遺傳模式被提出［2，12］。近年來隨著女性患者相繼被報道，且有些女性患者的父親亦患本病。因而一些學者認為其遺傳方式可能為常染色體顯性遺傳或具有遺傳異質性［12-13］。對IFAP綜合征發病的遺傳機制研究需要進一步積累病例，觀察其臨床表型和基因突變的關系。

本研究報道的MBTPS2基因c.1165C＞T突變為國內外首次報道的IFAP綜合征新發突變，為MBTPS2基因突變與臨床表型提供了新病例。對出生表現為魚鱗病伴有先天頭發缺如的患兒，可以盡早行基因檢測，并需要對基因檢測報告結合臨床進行準確診斷，推測可能出現的其他癥狀，早期監控，盡早進行認知康復訓練。

利益沖突所有作者均聲明不存在利益沖突