肺炎支原體檢測方法的比較分析

方治翔

（浙江長興縣人民醫院，浙江 湖州 313100）

肺炎支原體（MP）是最小的原核細胞型微生物，可以在無生命的培養基上生長，也是一種導致兒童和成人支氣管炎和原發性非典型肺炎的重要病原體。MP感染可發生在所有任何年齡段的人群中，尤其是經常發生于兒童上呼吸道和下呼吸道的急性感染，并且已經變成是中老年重癥肺炎病人不得已住院的重要原因[1-3]。在實驗室測試中對由病原體如MP、病毒和細菌引起的感染類病癥具有重要的檢測診斷價值，因為在MP感染的早期階段沒有典型性和特定性的臨床特征。對于MP感染的早期診斷和治療非常重要的是尋找敏感和特定的檢測參數。

1 資料與方法

1.1 一般資料 測試對象是我院2019年1月-2019年6月臨床證實的114例肺炎支原體肺炎患兒，并檢查了其咽拭子、血清樣本。男性56例，女性59例，年齡9個月-14歲，平均年齡為7.0歲，所選兒童的臨床癥狀以發燒，咳嗽和哮喘為主要特征。

1.2 方法

1.2.1 FQ-PCR 在生理鹽水中放置涂片，除去殘留的溶液，加入裂解物，并在95 ℃加熱10 min后，將上清液進行PCR測試，并在熒光測量儀中放置反應容器，后期由電腦進行主要的數據分析。選用ABI7500型實時熒光定量PCR儀，中山大學達安基因股份有限公司生產的肺炎支原體核酸定量檢測試劑盒。嚴格按說明書進行操作和結果判定。

1.2.2 血清被動凝集法 取患者3 mL血液經過3500 r/min離心5 min后分離出血清，進行MP復合抗體檢測，選用富士瑞必歐株式會社生產的肺炎支原體抗體檢測試劑盒（被動凝集法）。嚴格按說明書進行操作和結果判定。

1.2.3 間接免疫熒光法 取患者3 mL血液經過3500 r/min離心5 min后分離出血清，進行MP-IgM檢測，選用歐蒙呼吸道病原體譜抗體抗體IgM檢測試劑盒。嚴格按說明書進行操作和結果判定。

1.3 統計學方法 采用t檢驗，數據具有一定的準確性。

2 結果

114個樣本檢測最高的是FQ-PCR陽性率為93.8%，間接免疫熒光法檢出陽性率為86.0%，陽性率最低的為間接免疫熒光法50.9%，據結果具有一定的準確性，對整體測試結果進行詳細的分析之后。FQ-PCR法是目前最準確的檢測方法。具體數據見表1。

3 討論

MP是人類支原體肺炎的致病因子，支原體肺炎的病理變化主要是間質性炎癥，在某些時候會并發支氣管肺炎，我們將此稱為原發性非典型性肺炎。這種病癥通過飛沫進行傳播，在身體里會潛伏為2-3周，每年青少年發病率最高，在秋冬季發病率明顯大大增加，多為頭痛，喉嚨痛，發熱，咳嗽等癥狀，均為一般呼吸道癥狀，大多數患者并出現明顯的病癥。因此在治療方面，我們通常會采用中醫和西醫相結合的方式為每位患者進行詳細的診斷。

表1 檢出陽性率

由于MP感染的臨床癥狀并不明顯且與其他肺炎無法區分，所以對支原體肺炎的診斷主要取決于臨床檢查。通常我們有三種檢測方法分別是FQ-PCR、血清被動凝集法、間接免疫熒光法。FQ-PCR：靈敏度、特異性都能滿足臨床，但是MP死亡后其DNA仍可存在于部分患者體內，時間達7周-7個月，且不易降解，導致DNA檢測結果不能很好地用于治療效果的評價。血清被動凝集法：患者血清MP抗體滴度≥1:160作為近期或急性感染的診斷標準；恢復期和急性期MP抗體滴度呈4倍及以上增高或減低時，可確診。間接免疫熒光法：實驗室易受人為判斷熒光結果影響，包括抗原含量不足可能會產生假陰性，體內含有類風濕因子、多種自身免疫性抗體等與包被抗原有交叉反應可能出現假陽性。

根據這項研究，使用FQ-PCR檢測陽性率在114例樣本中是最高的，為93.8%，其次是血清被動凝集法為86.0%，間接免疫熒光法的陽性率最低為50.9%，該項數據結果具有一定的準確性。在實際操作檢測過程中，除肺炎支原體自身的陽性結果外，其他病原體檢測結果為陰性，且與其他病原微生物無不良反應，說明檢測方法具有特殊性。綜上所述，病原學與血清學聯合診斷仍然是目前提倡的MP感染診斷策略，由實驗室測試的結果來進行病情分析，隨后確定治療該病的具體方案。

總而言之，FQ-PCR法在快速診斷的早期階段更為有效，其臨床意義更為重要，與血清被動凝集法和間接免疫熒光法相比較，未來應使用FQ-PCR法作為主要的檢測手段，可以更加提高治療的準確性。