毛細管電泳技術在新生兒α-地中海貧血篩查診斷中的應用

常劍鋒，胡雅，梁燕媚，冼艷斌，劉文晴

（肇慶市第二人民醫院，廣東 肇慶 526000）

α-地中海貧血在臨床屬于一種較為罕見的貧血性疾病，還會因為珠蛋白基因不同而演變成多種類型的疾病，而且這一疾病表現形式也存在較大的差異性，病情不嚴重的患者，并不會受到這一疾病的影響，可是患病情況較為嚴重的患者，其生命健康也會受到威脅，更甚者還會出現胎死腹中等情況，而年齡較小的患者還會因此而喪命[1-3]。α-地中海貧血臨床發病機制十分特殊，有時候還會伴有并發癥情況，對于患者生活會造成較為顯著的影響，所以臨床十分重視臨床檢測，只有做好臨床檢測工作才能及時對其展開治療，從而有效提高治療效果[4]。毛細管電泳技術是近幾十年發展起來的一門高效分析技術，這一技術將經典的電泳技術與代微柱技術兩者的優勢有效的綜合了起來，在使用過程中具有高效、簡單、自動化、快速、敏感等特征，將其應用于臨床篩查診斷中意義非常，屬于一項精準性較高的檢測技術[5]。為此，本文也就毛細管電泳技術在新生兒α-地中海貧血篩查診斷中的應用效果進行了研究，現報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 在本次研究過程中，按照隨機抽樣的方式來挑選研究對象，所有研究對象均來自于我院2019年1月-2019年9月所檢測的新生兒篩查標本，共有631例，對631例新生兒進行研究與篩查診斷。

1.2 實驗器材以及試劑 本次篩查診斷過程中使用到的儀器主要是全自動毛細管電泳儀（Capillarys 2，法國Sebia公司）及配套原裝試劑。深圳亞能公司的PCR基因擴增儀及配套試劑。

1.3 方法 實驗人員在對新生兒進行篩查診斷的時候，需要使用毛細管電泳技術來對采集新生兒干血斑血作為樣本，對樣本統一進行提取、然后定量分析，同時還需要對陽性樣本數量進行詳細統計，血液呈現陽性則代表新生兒血液之中含有HB Bart's、HB E和Hb A2降低及異常血紅蛋白區帶等情況，分析血紅蛋白成分進行判斷。

新篩中心則需要及時召回這些陽性患兒，然后對其進行針對性PCR基因分析與研究。通過借助于毛細管電泳技術來對這些樣本進行α-地中海貧血篩查，以此來評估毛細管電泳技術在新生兒α-地中海貧血篩查診斷中的應用效果。

1.4 檢驗標準 在應用毛細管電泳技術對新生兒α-地中海貧血情況進行篩查診斷的時候，篩查人員需要及時記錄新生兒詳細的各項數據指標，同時做好分類整理工作。在這一過程中，運用綜合分析法進行分析，HbA為2%-48%、HbF為60%-87%、HbA2＜1.0%的話，就表示標本診斷結果為陰性，若出現了Bart's帶、異常血紅蛋白帶等情況的話，就表示標本診斷結果為陽性。然后再根據HB Bart's含量進行分型。

2 結果

在對631例新生兒血液干血斑陽性樣本進行檢測后，結果顯示，有593例新生兒血液樣本檢測結果為陽性，陽性樣本檢測率為93.98%。在此之后，我們對這631例新生兒進行了α-地中海貧血篩查診斷，篩查診斷結果顯示，靜止性α地貧132人，標準型α地貧327人，中間型α地貧9人，α地貧復合β地貧18人，正常人38人，β型地貧和其他異常血紅蛋白107人。

表1 各種α-地中海貧血類型情況分析

3 討論

地貧在臨床屬于一種較為嚴重的遺傳性疾病，對于人類健康造成較大的危害，我國多發于南方地區。臨床在對α-地中海貧血進行診斷的時候，血常規法、紅細胞脆性法均可以用于篩查，可是α-地中海貧血類型較多，其中靜止型與標準型這兩種類型并不存在明顯的血常規變化以及臨床表現，所以這個時候這兩種常用篩查診斷方式也就不具備應用價值，容易出現漏檢率[6]。眾所周知α-地中海貧血公認的診斷方式就是聚合酶鏈反應（PCR）及其延伸技術，可是這一技術在使用過程中需要較高的操作要求，所以也就限制了其在臨床篩查診斷中的應用。

全自動毛細管電泳技術作為時代發展下的產物，是在充滿電泳液的石英管中進行電泳的技術，在使用過程中，其會在溶血試劑之中有效稀釋紅細胞樣品，也會被直接注射到毛細管負極端，這個時候在高壓電的作用下就會競相電泳分離，然后Hb則會靠近正極端415 μm廣播檢測裝置檢測到[7]。這一檢測方式應用于α-地中海貧血篩查診斷中具有較為顯著的優勢，其結果顯示帶區間寬，能夠精準的計算各個區帶的百分數，然后將Hb Bart's進行區分；而且在使用過程中也十分的高效，檢測一個樣品需要耗費的時間僅為10 min；并且自動化程度也較高，并不需要人工制備血紅蛋白液，也無需人工修改基線，所以在使用過程中也有效避免了認為因素而引發的檢測結果不準確等情況；此外，穩定、精確、診斷結果與PCR基因分析法結果符合度也較高，是一種較為有效的篩查診斷手段[8-10]。在本次研究過程中，在對于1000例新生兒進行血液樣本采集與檢查的時候，診斷結果顯示，有360例新生兒血液樣本檢測結果為陽性，陽性樣本檢測率為36.00%。在對631例新生兒血液干血斑陽性樣本進行檢測后，結果顯示，有593例新生兒血液樣本檢測結果為陽性，陽性樣本檢測率為93.98%。從這一結果我們能夠發現，毛細管電泳技術在新生兒α-地中海貧血篩查診斷之中的效果較為良好，所以在對新生兒進行診斷與篩查的時候，最好是按照α-地中海貧血攜帶者亦或者是患兒在出生48-72 h采集的干血斑之中出現的Hb成分，來應用毛細管電泳技術來對其進行篩查與診斷，這種診斷方式在取材方面十分的便捷，同時也能有效檢查出新生兒究竟是不是α-地中海貧血攜帶者，然后再基于此對新生兒進行針對性處理與分析。輕型α-地中海貧血雖然在成年期也并不存在任何臨床癥狀，可是輕型α-地中海貧血攜帶者自身亦或者是和靜止型α-地中海貧血患者婚育的話，有25%的可能性會分娩下致死性疾病的Hb Bart's水腫胎和嚴重影響生存質量的HbH病，從而促使患者家庭遭受較大的打擊。為此，對新生兒進行α-地中海貧血患者攜帶篩查與診斷意義顯著，能夠在一定程度上指導婚育、優生優育、提高人口素質等工作。但是，在本次研究中我們也能發現其診斷率雖然高，但是也并不是100%，所以如果有條件的地區亦或者是單位，最好還是將基因診斷作為α-地中海貧血患者篩查診斷補充亦或者是確診手段。

綜上所述，毛細管電泳技術在新生兒α-地中海貧血篩查診斷中的應用價值較為顯著，能夠具有較高的診斷符合率，同時在操作過程中也十分的簡便、迅速且經濟，能夠有效實現早期診斷，值得推廣應用。