化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)梅毒特異性抗體進(jìn)行梅毒篩查的評(píng)價(jià)

杜麗偉，陳相

（深圳市羅湖醫(yī)院集團(tuán)醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中心，深圳市羅湖區(qū)婦幼保健院檢驗(yàn)科，廣東 深圳 518000）

梅毒是一種慢性傳染性疾病，會(huì)對(duì)人體健康造成嚴(yán)重危害，因此需要選擇高敏感度和特異度方法篩查梅毒。化學(xué)發(fā)光法是應(yīng)用于梅毒特異度抗體的重要檢測(cè)方法，由于多數(shù)檢測(cè)儀器設(shè)備剛剛起步，因此采用甲苯胺紅不加熱試驗(yàn)篩查螺旋體，應(yīng)用化學(xué)發(fā)光法比較少[1]。此次研究主要是比較分析甲苯胺紅不加熱試驗(yàn)和化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)梅毒特異性抗體進(jìn)行梅毒篩查的結(jié)果，現(xiàn)將此次研究報(bào)告作如下匯報(bào)。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2017年11月-2018年11月臨床需要進(jìn)行的197份梅毒篩查試驗(yàn)標(biāo)本，標(biāo)本來(lái)源于婦科、產(chǎn)科和皮膚科。

1.2 方法 化學(xué)發(fā)光免疫儀及配套試劑，洗板機(jī)、數(shù)顯混勻器、質(zhì)控血清。分別應(yīng)用甲苯胺紅不加熱試驗(yàn)和化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)，之后應(yīng)用蒼白密螺旋體明膠顆粒凝集試驗(yàn)（TPPA）確認(rèn)試驗(yàn)，檢測(cè)方法嚴(yán)格按照試劑生產(chǎn)說(shuō)明書(shū)操作，并且設(shè)置陽(yáng)性對(duì)照與陰性對(duì)照，化學(xué)發(fā)光法測(cè)定質(zhì)控血清[2]。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 20.0處理和分析所有患者數(shù)據(jù)資料，采用χ2檢驗(yàn)分析計(jì)數(shù)資料，并且使用百分比表示，采用t檢驗(yàn)分析計(jì)量資料，并且使用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（Mean±SD）表示，P＜0.05為差異顯著，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 檢測(cè)陽(yáng)性率 對(duì)本次所采集的梅毒標(biāo)本，使用甲苯胺紅不加熱試驗(yàn)和化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)進(jìn)行檢測(cè)，化學(xué)發(fā)光法檢出率明顯高于甲苯胺紅不加熱試驗(yàn)法，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），詳情見(jiàn)表1。

表1 血清標(biāo)本梅毒檢測(cè)結(jié)果

2.2 TPPA確認(rèn)比較 選擇其中一種檢測(cè)方法的陽(yáng)性標(biāo)本，之后通過(guò)蒼白密螺旋體明膠顆粒凝集試驗(yàn)確認(rèn)，將TPPA作為對(duì)照方法，對(duì)甲苯胺紅不加熱試驗(yàn)法和化學(xué)發(fā)光法的陽(yáng)性預(yù)測(cè)值、陰性預(yù)測(cè)值、特異度和敏感性進(jìn)行計(jì)算，結(jié)果顯示，化學(xué)發(fā)光法的特異度和敏感性明顯優(yōu)于甲苯胺紅不加熱試驗(yàn)法，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），詳情見(jiàn)表2。

表2 不同篩查方法的結(jié)果比較

3 討論

當(dāng)前，臨床上所檢測(cè)篩查的梅毒標(biāo)本比較多，為了控制梅毒蔓延，必須盡早診斷和治療，選擇具備特異性和敏感性的試驗(yàn)方法。當(dāng)前，實(shí)驗(yàn)室在篩查梅毒時(shí)多采用血漿反應(yīng)素環(huán)狀卡片、甲苯胺紅不加熱試驗(yàn)法，并且以蒼白密螺旋體明膠顆粒凝集試驗(yàn)驗(yàn)證試驗(yàn)[3]。甲苯胺紅不加熱試驗(yàn)法能夠有效檢測(cè)血清反應(yīng)素，在梅毒感染的不同時(shí)期，反應(yīng)素的檢出率差異性比較大，且在感染梅毒后3周后才會(huì)出現(xiàn)，在接受抗病毒治療后悔逐漸消失，是晚期梅毒患者檢測(cè)結(jié)果陽(yáng)性較低的主要原因。正是由于方法學(xué)原因，在類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、水痘和風(fēng)疹等疾病中產(chǎn)生抗類(lèi)脂抗原抗體，若與牛心磷脂抗原結(jié)合，就會(huì)發(fā)生凝集反應(yīng)，此時(shí)就會(huì)出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果。按照蒼白密螺旋體明膠顆粒凝集試驗(yàn)確認(rèn)比較結(jié)果能夠看出，敏感性和特異性比較低，因此需要尋找具有較高敏感性和特異性的方法，以此篩查蒼白密螺旋體。部分學(xué)者采用化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)篩查，結(jié)果認(rèn)為，此種檢查方法的特異性比較高，且靈敏度也比較高，結(jié)果判斷比較一致，可以應(yīng)用到大量梅毒標(biāo)本篩查中[4]。

蒼白密螺旋體明膠顆粒凝集試驗(yàn)是應(yīng)用蒼白密螺旋體，作為抗原檢測(cè)抗體，具備較高的明顯和特異性。但是由于需要手工進(jìn)行操作稀釋?zhuān)瑫?huì)干擾和影響試驗(yàn)結(jié)果。所以此種方法不能應(yīng)用到大批量篩查，也不能保留原始數(shù)據(jù)，也相應(yīng)限制了應(yīng)用范圍。此次研究所采用的檢測(cè)方法，主要是應(yīng)用化學(xué)發(fā)光法聯(lián)合酶聯(lián)免疫，并且通過(guò)酶催化發(fā)光底物，對(duì)發(fā)光底物進(jìn)行檢測(cè)所產(chǎn)生的光信號(hào)，替代免疫分析的顯色物。所以，特異性與酶聯(lián)免疫分析比較相似，且能夠明顯提升敏感性。需要注意的是，通過(guò)給予肝硬化、糖尿病和長(zhǎng)期服用免疫抑制劑的患者蒼白密螺旋體明膠顆粒凝集試驗(yàn)，試驗(yàn)檢測(cè)結(jié)果可能會(huì)出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果。若患者采用化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)結(jié)果為陽(yáng)性，蒼白密螺旋體明膠顆粒凝集試驗(yàn)結(jié)果為陰性，聯(lián)合其他檢查診斷該患者并非梅毒螺旋體感染患者，提示應(yīng)用化學(xué)發(fā)光法進(jìn)行梅毒篩查時(shí)，檢測(cè)結(jié)果可能會(huì)出現(xiàn)假陽(yáng)性。通過(guò)分析實(shí)驗(yàn)室原始數(shù)據(jù)后發(fā)現(xiàn)，出現(xiàn)假陽(yáng)性檢測(cè)結(jié)果的標(biāo)本發(fā)光值比較低，且S/CO值位于臨界值附近，針對(duì)檢測(cè)處于灰色區(qū)域內(nèi)的標(biāo)本，則需要使用其他試驗(yàn)方法進(jìn)行復(fù)測(cè)。非梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)若出現(xiàn)結(jié)果，則需要進(jìn)行滴度試驗(yàn)，對(duì)患者梅毒活動(dòng)情況和治療情況進(jìn)行判斷，還能夠評(píng)估患者預(yù)后。對(duì)于隱形期、一期和三期梅毒患者來(lái)說(shuō)，甲苯胺紅不加熱試驗(yàn)滴度比較低，但是針對(duì)二期梅毒患者來(lái)說(shuō)，甲苯胺紅不加熱試驗(yàn)滴度較高，能夠達(dá)到1:64比例范圍內(nèi)。在本次研究中，使用蒼白密螺旋體明膠顆粒凝集試驗(yàn)確認(rèn)試驗(yàn)，且此種檢測(cè)方法的敏感性和敏感性明顯高于甲苯胺紅不加熱試驗(yàn)法。在本次研究中，有1例患者的甲苯胺紅不加熱試驗(yàn)法和化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)結(jié)果同時(shí)為陰性，通過(guò)與臨床聯(lián)系，明確該患者不是梅毒患者，是因?yàn)槊舾行员容^高，或者是因?yàn)槠渌蛩拢虼嗽谖磥?lái)研究中還需要進(jìn)行探討分析。通過(guò)此次研究結(jié)果能夠看出，對(duì)本次所采集的梅毒標(biāo)本，使用甲苯胺紅不加熱試驗(yàn)和化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)進(jìn)行檢測(cè)，化學(xué)發(fā)光法檢出率明顯高于甲苯胺紅不加熱試驗(yàn)法（P＜0.05）；通過(guò)蒼白密螺旋體明膠顆粒凝集試驗(yàn)確認(rèn)，化學(xué)發(fā)光法的特異度和敏感性明顯優(yōu)于甲苯胺紅不加熱試驗(yàn)法（P＜0.05）。從上述分析結(jié)果能夠看出，采用化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)梅毒特異性抗體的應(yīng)用價(jià)值比較高。

綜上所述，通過(guò)化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)梅毒特異性抗體實(shí)施梅毒篩查，給予陽(yáng)性標(biāo)本滴度檢測(cè)，兩者不滿(mǎn)足則應(yīng)用蒼白密螺旋體明膠顆粒凝集試驗(yàn)，能夠明顯降低假陰性，提升敏感率，明顯優(yōu)于傳統(tǒng)梅毒篩查模式。