韓寶力
摘要:羊魏氏梭菌病是由于感染魏氏梭菌而發生的一種急性傳染病,病羊主要是發生毒血癥,如羊腸毒血癥、羊猝疽、羔羊痢疾等。通常在氣候寒冷的秋冬和初春時節發生,呈現明顯的季節性。該病主要通過消化道感染,當羊感到寒冷、過于饑餓或者采食腐敗的飼草而導致抵抗力降低時,則容易出現發病。病菌分泌的毒素會導致羊的消化道黏膜發炎、壞死,并造成中毒性休克,死亡率較高。現概述羊魏氏梭菌病的臨床癥狀、剖檢變化、實驗室診斷及防控。
關鍵詞:羊;魏氏梭菌病;臨床癥狀;剖檢變化;實驗室診斷;疫情處理;藥物治療;免疫預防
中圖分類號: S858.26 文獻標識碼:B文章編號:2095-9737(2020)03-0106-02
1 臨床癥狀
該病的特點是突然發生,病程持續時間短,病羊通常沒有表現出明顯的癥狀就突然死于牧場或者圈舍內。病程持續略長的病羊,可見軀體痙攣,肌肉顫抖,臥地抽搐,四肢不斷劃動,眼球轉動,口吐白沫,有混雜血液的泡沫流出,流涎、磨牙,體溫變化存在差異,往往經過2~4 h后極度衰竭而死,死亡后腐敗較快。
2 剖檢變化
剖檢病死羊,主要是腸道發生典型病變,其中最明顯的是小腸發炎,腸道內嚴重充血,內部黏膜發生脫落,且實質性臟器都發生嚴重的出血性炎癥。肝臟,呈鈍圓形,邊緣泛黃,存在出血點;心臟,心內外膜存在出血性斑點,心包腫大,含有大量積液;肺臟伴有嚴重的出血癥狀,同時發生明顯水腫;脾臟散布有出血點;腎臟被膜下存在明顯的出血點;氣管、支氣管發生壞死性充血,里面存在紅色泡沫;胃部黏膜發生壞死并脫落,其中病變最嚴重的是瘤胃。
3 實驗室診斷
3.1 涂片鏡檢
無菌條件下,取病死羊的腸管以及臟器等病料進行涂片,經過革蘭氏染色、顯微鏡觀察,能夠看到革蘭氏陽性大桿菌,菌體兩端鈍圓。
3.2 培養特性
3.2.1 需氧培養
無菌條件下,取病死羊的心血、肝臟、肺臟、脾臟等病料組織分別以劃線方式在普通平板、血平板培養基上接種,置于37℃下培養,經過20 h沒有長出菌落。
3.2.2 厭氧培養
將以上接種病料的培養基置于厭氧條件下培養,可見普通培養基上長出菌落。在血平板培養基上生長淡黃色的圓形菌落,直徑為2~4 mm,表面光滑,中央隆起,且周圍有溶血環,個別菌落呈圓盤形,但邊緣呈鋸齒狀。
挑取單個菌落在牛乳培養基中接種,經過8~10 h培養,可見牛乳發生凝集,并產生氣體,出現劇烈發酵。
3.3 生化反應
該菌可使葡萄糖、乳糖、蔗糖、麥芽糖、果糖、淀粉、棉籽糖分解,并產酸產氣,無法使衛矛醇、甘露醇、楊苷、枸椽酸鹽發酵。
3.4 尿中葡萄糖檢測
取膀胱內尿液加熱至沸騰,接著進行過濾,先在試管中加入5 mL本尼迪克氏試劑,再加入0.5 mL處理后的尿液,混合均勻后繼續加熱煮沸2 min,室溫靜置5 min,發現管底出現大量黃色沉淀,表明尿液中存在較多的葡萄糖。
3.5 腸毒素檢查
取一段病死羊腸內容物放在1個干凈的三角瓶中,添加20 mL生理鹽水進行稀釋,混合均勻后以3500 r/ min的速度進行15 min離心沉淀,用微孔濾器對上清液過濾,分成3份做3組實驗。
第一組為濾液直接注射組,即取病料濾液給2只健康小白直接注射,每只接種劑量為0.2 mL。
第二組為加熱處理組,即取病料濾液加熱至60℃,經過30 min處理后給2只健康小白鼠注射,每只接種劑量為0.2 mL。
第三組為空白對照組,即取生理鹽水給2只健康小白鼠直接注射,每只接種劑量為0.2 mL,用于空白對照實驗。
試驗結果表明:第一組小白鼠最終發生死亡;第二組小白鼠在大約0.5 h后表現出精神不振,呼吸加速,經過4~5 h后恢復;第三組小白鼠一切正常。說明腸內容物中含有足夠的毒素致死,而經過加熱處理的癥狀輕微,可能是由于毒素在加熱時被破壞。
3.6 毒素定型試驗
取腸內容物上清液在健康小白鼠尾靜脈注射,設置4組,每組各3只,注射劑量分別為0.3 mL、0.2 mL、0.1 mL、0.05 mL,對于小白鼠在5 min內都發生死亡的最小劑量作為該樣品的LD50。結果腸毒素的LD50為0.1 mL。
先取魏氏梭菌A、B、C、D 4種定型血清同腸毒素進行中和試驗,然后再進行動物保護試驗。要求取各型血清0.1 mL分別與2個最小致死量的腸毒素混合,這是給1只小鼠注射的用量;同時,設置對照組,按0.1 mL生理鹽水與2個最小致死量腸毒素混合,均放在溫箱內進行40~60 min的中和,然后取出按組尾靜脈注射小鼠,對各組小鼠進行觀察記錄,根據最終存活的小鼠即可判定菌型。
4 防控措施
4.1 疫情處理
只要發現病羊,要立即轉移至地勢高、干燥的草地進行放牧,如果條件允許可采取轉場。同時,用強力消毒靈對羊舍建筑物、場地、用具等進行嚴格消毒。對于病死羊尸體,未經獸醫技術人員允許禁止隨便剝皮,尸體要求采取焚燒或者深埋處理,避免疫情蔓延。
4.2 藥物治療
對于病程持續較長的病羊,可口服100 mL 2%硫酸銅溶液,并配合使用鎮靜劑、強心劑以及大量的抗生素、磺胺類藥物,治療效果較好。
另外,病羊可服用呋喃唑酮,羔羊每次用量為0.05~0.1 g,成年羊用量適當增加,每天2次,連續使用3~5天。
4.3 免疫預防
羊群可定期免疫接種魏氏梭菌鋁膠滅活苗免,使機體形成特異性免疫。常用疫苗為羊快疫、腸毒血癥、猝疽(羔羊痢疾)三聯四防滅活干粉疫苗和羊梭菌病四防滅活疫苗。
由于新生羔羊很快就可發病,即使剛出生就接種疫苗,但由于疫苗需要較長的時間(7~15天)才可建立堅強的免疫力,部分羔羊還未等疫苗發揮作用就已經死亡。因此,要求母羊在配種前1~2個月或者配種后1個月接種疫苗,這樣可提高母乳的抗體滴度,提高后代羔羊抵抗該病的能力,在一定程度上預防發病,減少死亡。