沉降式宮頸液基細胞學制片技術常見問題研究

高亞娟 白潔 李佳 王建

【摘要】本文通過對臨床中液基細胞學制片方法的總結匯總，分析常見制片過程中出現的問題，以及有可能造成該問題的原因及解決方法。以此希望能夠更好的服務于臨床患者。

【關鍵詞】液基細胞學技術;宮頸篩查;沉降式

宮頸癌是女性最常見的惡性腫瘤之一，發病率僅次于乳腺癌，居女性惡性腫瘤的第二位【1】。近年來隨著社會的發展，宮頸癌的發生率呈顯著上升和年輕化趨勢，因此癌前篩查顯得尤為重要。宮頸液基細胞學是基于對正常脫落的宮頸細胞進行分析診斷的一種診斷方法，其能夠利用相關試劑有效去除標本中的非診斷所需成分，進而做出準確的判斷。宮頸液基細胞學在提高宮頸病變診斷率方面發揮了重要作用。本文根據臨床觀察總結，現對沉降式宮頸液基細胞學制片技術過程中經常出現的問題進行總結分析。

1.材料與方法

1.1材料??

使用北京世紀眾諾醫療器材有限公司提供的樣本保存液、緩沖液、巴氏染液等試劑耗材。

1.2方法

在離心管里加入4ml密度分離液→將核對好的標本分別轉移至對應的離心管→離心（200轉離心2分鐘15秒）→打開真空泵，壓力調節至8±1in/Hg吸取上層廢液→離心（800轉離心10分鐘）→迅速將管架倒置180度傾出上清液，震蕩20秒左右→上全自動制片機→巴氏染色→環保透明劑（5min左右）→封片

2.結果

制片質量較好，染色鮮艷，不同層次細胞顯色分明，細胞分布均勻，核質對比清晰，細胞核結構清晰，能夠有效的提供診斷信息。

3.討論

3.1細胞數量過少的問題：

3.1.1由于病人出血或者炎癥等原因造成血性樣本或黏液等雜質過多，無法獲取足夠的細胞數，處理時可將離心管內的細胞全部倒入制片艙制片，必要時應重新取材。

3.1.2細胞沉降時間不夠，細胞不能充分沉降粘附在玻片上，適當增加沉降時間。

3.1.3玻片對于細胞的吸附性降低，更換玻片。同時控制玻片所處環境的濕度，使濕度不得大于70%。

3.2血液、黏液過多的標本制片效果不佳：

3.2.1將標本小瓶充分混勻后，吸出5ml液體，置于另一潔凈容器內，向容器內加入5ml細胞保存液，充分混勻后，按照正常程序制片染色。

3.2.2向標本小瓶內加入1-2%冰乙酸溶液數滴，震蕩混勻5分鐘后，按正常程序制片染色。

3.2.3使用生理鹽水將標本進行倍比稀釋后，按照正常轉移流程制片染色。

3.3染色異常：

3.3.1緩沖液的酸堿度不正確，應調至PH7.5-8.5之間左右。緩沖液主要用于調節玻片染色環境的pH值。染色環境PH值過低，即環境過酸，細胞質著色能力增強，會造成胞質深染。染色環境PH值過高即環境過堿，則會胞核深染的現象【2】。

3.3.2檢查無水乙醇/異丙醇液使用時效，定期更換。

3.3.3染色過深或過淺：根據玻片顯示的胞質和胞核的染色效果，適當調整蘇木素或者EA/OG的染色時間。

3.3.4溫度會對染色造成影響。低于15攝氏度影響蘇木素染色，高于30攝氏度影響EA染色效果。

3.4細胞集散與邊緣：

3.4.1樣本細胞量過少，處理方式同3.1所列

3.4.2制片艙沒有扣上，在扣制片艙的時候盡量扣緊。

3.5鏡下細胞呈團問題：

3.5.1取材時力度過大。該原因引起的成團細胞一般排列整齊、層次分明，細胞團有極性。實驗過程中可增加振蕩時間，并與臨床醫生就取材問題進行溝通。

3.5.2轉移量過多。該原因引起的成團細胞，一般雜亂無章，無排列規則。實驗過程中增加振蕩時間、調節轉移量。

隨著液基細胞學的發展，該技術的應用在臨床中的重要性日益凸顯，尤其在女性宮頸癌篩查方面。良好的制片質量是正確診斷的基礎之一，希望通過此篇文章能夠更好的服務于病理醫生、更好的服務于患者。

【參考文獻】

[1]? Bai H，Sung C J，Steinhoff M M. ThinPrep Pap Test pro-motes detection of glandular lesions of the endocervix[J]. Di-agn Cytopathol，2000，23（1）：19-22

[2]? 梁英杰，凌啟波，張威.臨床病理學技術[M]. 北京：人民衛生出版社，2011：334-4