櫟樹桑黃提取物誘導胃癌細胞凋亡作用的研究

李俊燕

【摘要】目的：分析櫟樹桑黃提取物（OPL）在誘導胃癌細胞凋靈過程當中的作用。方法：采用實驗研究方法，對于不同濃度OPL對人癌細胞增值率抑制作用進行分析，通過流式細胞檢查術，對細胞雙染色流式進行SGC-7901周期蛋白檢測，并通過Cyclindl表達方式，對蛋白質的凋零進行表達，分析周期阻滯作用。結果：OPL可以明顯抑制人癌細胞增生，并且對細胞凋零產生誘導作用，細胞在阻滯蛋白GO-G1周期內（P<0.05），蛋白表達PARP下降幅度（P<0.05）。結論：不同濃度OPL對人癌細胞SGC-7901具有差異化誘導作用，可以有效將細胞阻滯在GO-G1周期內。

【關鍵詞】櫟樹桑黃提取物;胃癌細胞;GO-G1周期

【中圖分類號】R735 【文獻標識碼】A 【文章編號】1002-8714（2020）01-0160-01

前言：胃癌發病常見、致死率高，在世界常見胃癌類型當中排名第4。目前臨床當中，主要采用手術切除方法，來對胃癌進行治療，但該種方法不僅會對患者生活造成嚴重影響，還有較高復發率。大部分患者及時進行手術切除，仍需要進行化學放療，該種放療不良反應較多，患者白細胞以及肝腎功能都受到不同程度影響。本院主要結合櫟樹桑黃這種高等真菌藥物，對胃癌細胞凋靈作用進行誘導分析，現報道如下：

1資料與方法

1.1一般資料

選擇南京凱基生物生命工程有限公司生產的人癌細胞株，以及美國高思生物生命工程公司生產的高糖培養基。人癌細胞凋亡和周期實驗盒選擇上海貝博生命工程公司生產的蛋白濃度測試計、上海碧云生命工程公司生產的生物抗結劑。實驗所用OPL為人工乙醇提取物，在95%濃度乙醇當中提煉制取，提取率在6.75%-6.85之間，OPL為人工培養制取，產量、規模、品質、具體含量均可控，在實驗周期內可以基本保持穩定

1.2方法

將四種不同的腫瘤細胞在不同濃度的高糖培養基當中，進行系統培養，并按照編號，加入100U/ml鏈霉素和100U/ml青霉素，調整二氧化碳飽和濃度，在37℃的恒溫細胞培養箱當中，對腫瘤細胞進行培養。

MTT細胞增殖檢測。對不同類型的人癌細胞進行增殖檢測，分析SGC-7901，HCT-113.DFD-231，hela細胞在四種濃度OPL當中的生長數量。設置96孔培養基底盒，按照藥物濃度不同，進行清液提取，通過酶聯免疫檢測方法，對增殖數值進行檢測。

ANNEXIN-V/PI細胞凋亡檢測。通過96孔培養皿當中細胞的收集情況，進行避光孵育。48h之后，取出，通過PBS清洗，加入染色劑，進行觀察。

1.3統計學方法

統計學軟件為SPSS21.0。計量資料采用t檢驗，以均數±標準差（x±s）表示;計數資料以x²檢驗，以率（%）表示。P<0.05表示差異有統計學意義。

2結果

OPL對四種不同人癌細胞的增生具有明顯抑制作用，但不同濃度的OPL抑制作用具有明顯差別，100чg/ml 與200чg/mlOPL抑制率之間，具有顯著差異（x²=13.121，P<0.05），200чg/ml與300чg/mlOPL抑制率之間，具有顯著差異（x²=14.923，P<0.05），300чg/ml與400чg/mlOPL抑制率之間，具有顯著差異（x²=11.231，P<0.05），100чg/ml與400чg/mlOPL抑制率之間，具有顯著差異（x²=14.176，P<0.05）

表1 不同濃度人癌細胞抑制率對比

通過48h培養之后，不同濃度OPL對人癌細胞的抑制作用明顯上升，細胞完整核膜被破壞，呈現出不規則收縮狀態，大部分細胞核碎裂，呈現出破碎的藍色熒光。

3討論

目前在胃癌治療當中，通過化療大部分患者都會出現非常嚴重的不良反應，因而，尋找低細胞毒性的抗腫瘤藥物，對于癌癥患者來說，需求非常迫切。很多醫院都向傳統中醫尋求答案，例如櫟樹桑黃就是一種低毒性真菌。桑黃提取物OPL可以對腫瘤細胞增殖起到不同濃度的抑制作用，從而對腫瘤細胞的發展周期起到一定阻滯。也就是說，應用這種真菌，腫瘤細胞的無節制增值可以得到限制。細胞加速到程序性死亡階段，從變圓、片化，逐漸成為小體，凋亡細胞內膜部分的線粒體電位發生改變。從本文研究可以看出，300чg/mlOPL作用在胃癌SGC-7901細胞48h之后，細胞凋亡的速度可以上升70%，細胞不受控制的增值可以得到明顯的抑制。

有研究指出，櫟樹桑黃可對細胞粒體途徑發生改變作用，通過粒體接入等方式，促進正向調節作用發揮，提高凋亡蛋白產生效率。通過這種方式，胃癌SGC-7901細胞凋亡速度可提高60%-75%，這與本研究成果一致。

綜上所述，櫟樹桑黃具有良好的胃癌細胞凋零誘導作用，可降低化療不良反應，利于患者預后，可推廣。