應(yīng)用免疫熒光法 診斷豬流行性腹瀉的探討

文/ 招遠(yuǎn)市玲瓏畜牧獸醫(yī)站 楊金寶 王亮

豬流行性腹瀉是豬養(yǎng)殖過程中十分常見的一種疾病，疾病發(fā)生后會導(dǎo)致病豬出現(xiàn)不同程度的感染、腹瀉現(xiàn)象，甚至在病情較為嚴(yán)重的情況下可導(dǎo)致脫水現(xiàn)象，威脅到病豬的生命安全，在增加病豬死亡率的同時給養(yǎng)殖戶帶來嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失；因此如何對豬流行性腹瀉病做出有效的診斷，就對于早期治療和預(yù)防工作的開展具有重要意義。

一、資料和方法

一般資料。在2017 年1 月到2019 年2 月之間選擇40 頭疑似為流行性腹瀉的病豬作為研究對象，病豬死前伴隨嚴(yán)重的腹瀉、精神不佳、喜臥等癥狀，病豬中公豬24 頭，母豬16 頭，其體重為14 ～52 千克，平均體重為（36.21±2.03）千克；本次研究開始前已經(jīng)和相關(guān)部門、養(yǎng)殖單位取得了溝通，其均表示知情且支持本次研究的開展。

方法。對病豬進(jìn)行解剖，選擇其部分小腸作為冰凍切片，或者選擇小腸黏膜實(shí)施抹片，將其標(biāo)本置于自然環(huán)境中風(fēng)干，風(fēng)干后使用丙酮進(jìn)行固定，而后加熒光抗體進(jìn)行染色，對其進(jìn)行充分水洗后封蓋，此后實(shí)施鏡檢，并得出相關(guān)的檢查結(jié)果。此外對病豬均實(shí)施電鏡檢查，以獲得相關(guān)檢查結(jié)果和本次研究的價值進(jìn)行對比。

觀察指標(biāo)。觀察本次研究檢查結(jié)果，同時將獸醫(yī)研究所所得病理檢查結(jié)果作為金標(biāo)準(zhǔn)，統(tǒng)計本次所用方法的檢測準(zhǔn)確率。其中免疫熒光法和病理檢查的符合例數(shù)，除以研究總數(shù)量后乘以百分之百記為檢測準(zhǔn)確率。

統(tǒng)計學(xué)分析。將SPSS25.0 作為本次數(shù)據(jù)處理軟件，使用n 統(tǒng)計本次研究中計數(shù)資料，并采用χ2 實(shí)施檢驗；檢驗后P ＜0.05 均表示數(shù)據(jù)差異顯著（P＜0.05）。

二、結(jié)果

病理檢查對40 頭病豬均作出確診，診斷為豬流行性腹瀉，免疫熒光法的診斷準(zhǔn)確率則高于電鏡檢查的準(zhǔn)確率，且組間對比存在顯著差異，其數(shù)據(jù)詳情見下表1。

表1 研究診斷詳細(xì)情況【n(%)】

三、討論

豬流行性腹瀉屬于一種常見疾病，病發(fā)后主要以病豬的腹瀉為主要癥狀，同時病情的傳播較慢，這使得臨床診斷存在一定困難；加之豬養(yǎng)殖過程中常見的傳染性胃腸炎等疾病，均和豬流行性腹瀉的癥狀存在類似之處，因此臨床更加難以通過流行病學(xué)和臨床癥狀等對疑似病豬實(shí)施檢查，此時借助相關(guān)的實(shí)驗室診斷就具有重要意義。

目前臨床可應(yīng)用于豬流行性腹瀉的相關(guān)診斷方法較多，包括微量血清中和實(shí)驗、病毒的分離鑒定、免疫電鏡檢查和免疫熒光診斷等方法，其中免疫電鏡檢查和免疫熒光診斷方法是相對較為普及的兩種方法，其對于實(shí)驗操作的嚴(yán)格性一般，且對于操作者的專業(yè)性和嫻熟程度要求尚可，故而能夠在臨床中普遍使用。其中電鏡法的操作十分簡單、能夠直觀的獲得較為準(zhǔn)確的定性結(jié)果，但是該方法需要較為昂貴的電鏡設(shè)備才可較快獲得結(jié)果，否則只能在3 ～7 天才能得到準(zhǔn)確的報告，此時受到疾病流行性的影響，其容易發(fā)生蔓延現(xiàn)象。而免疫熒光法的檢查則能夠在短時間內(nèi)快速獲得相關(guān)的檢查結(jié)果，同時不會和豬傳染性胃腸炎病毒、輪狀病毒、豬細(xì)小病毒、大腸桿菌等出現(xiàn)交叉反應(yīng)，故而診斷結(jié)果準(zhǔn)確性更高，這一點(diǎn)在本次研究的結(jié)果中得到了證實(shí)，即免疫熒光法檢查結(jié)果的準(zhǔn)確率為92.5%，其中電鏡法和病理檢查結(jié)果準(zhǔn)確率、免疫熒光法檢查準(zhǔn)確率存在顯著差異，且差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。而現(xiàn)有實(shí)驗認(rèn)知下，免疫熒光法的實(shí)施需要以病豬的小腸等部位作為標(biāo)本，這使得實(shí)驗無法在疾病初步診斷時廣泛應(yīng)用，但是基于豬流行性腹瀉的傳染性，一旦有病豬出現(xiàn)死亡現(xiàn)象后，及時對其解剖和檢查，則能夠?qū)ζ渌酪蜃龀黾皶r反映，并為其他病豬的治療和干預(yù)提供指導(dǎo)，這對于疾病廣泛蔓延的控制工作開展具有重要意義，因此可使得養(yǎng)殖戶經(jīng)濟(jì)效益損失得到減小，故而值得推廣應(yīng)用。

綜上所述，應(yīng)用免疫熒光法診斷豬流行性腹瀉的價值顯著，能夠為相關(guān)防疫工作的開展提供指導(dǎo)，因此具有推廣應(yīng)用價值，以期通過診斷和防疫降低豬流行性腹瀉發(fā)生帶來的經(jīng)濟(jì)損失。