探討HE4、CEA、ProGRP、CYFRA21-1以及NSE聯(lián)合檢測在肺癌診斷中的應(yīng)用

周小斌，王 艷

（1.泰州市人民醫(yī)院 檢驗科；2.泰州職業(yè)技術(shù)學(xué)院，江蘇 泰州 225300）

肺癌（lung cancer，LC）是全球癌癥及與癌癥相關(guān)死亡的主要原因。非小細胞肺癌（Nonsmall cell lung cancer，NSCLC）占多數(shù)，為85%，其余主要為小細胞肺癌（small cell lung cancer，SCLC）[1]。盡管目前肺癌相關(guān)診療技術(shù)在不斷發(fā)展，但患者五年生存率總體約為18%，其主要取決于肺癌診療時間點，早期干預(yù)治療生存率可達55%，而晚期則只有4%[2]。因此，肺癌的早期診斷及適當(dāng)治療對于改善預(yù)后至關(guān)重要。肺癌診療的前提在于病理學(xué)診斷與分期，由于目前主要通過病理活檢或者脫落細胞檢測對肺癌進行診斷，往往患者確診時已處于疾病晚期[3]。此外，當(dāng)活檢樣本不足或制片質(zhì)量不高時，則可影響診斷和組織學(xué)分型。對于部分身體狀態(tài)較差的患者，有時甚至無法進行活檢，由此可見急需一種非侵入性的診斷方法。目前尚無比較理想的可用于肺癌診斷的單個血清腫瘤標(biāo)志物，但是組合檢測可能有助于提高肺癌診斷的敏感性和特異性。在本次研究中，我們分析了五種腫瘤標(biāo)志物的血清水平（HE4、CEA、ProGRP、CYFRA21-1以及NSE），用以評估聯(lián)合檢測對肺癌診斷的應(yīng)用價值。

1 材料和方法

1.1 材料

1.1.1 研究對象 肺癌患者104例，其中男性68例，女性36例，年齡37～72歲，平均年齡48歲，為2019年1月至2019年12月期間泰州市人民醫(yī)院腫瘤科門診及住院患者，其中小細胞肺癌21例，非小細胞癌83例；肺炎患者62例；健康體檢者75例。三組研究對象性別與年齡均匹配。

1.1.2 試劑和儀器 ProGRP檢測試劑盒，HE4檢測試劑盒，CEA檢測試劑盒，CYFRA21-1檢測試劑盒，雅培ARCHITECTi2000SR全自動免疫分析儀（美國雅培公司）；NSE檢測試劑盒，新產(chǎn)業(yè)MAGLUMI 4000 Plus全自動化學(xué)發(fā)光免疫分析儀（深圳新產(chǎn)業(yè)生物醫(yī)學(xué)工程有限公司）。

1.2 方法

1.2.1 標(biāo)本采集 使用含分離膠的真空負壓管無菌采集各組研究對象靜脈血并及時離心以分離出血清。

1.2.2 結(jié)果檢測 采用化學(xué)發(fā)光法檢測三組研究對象血清中NSE、ProGRP、HE4、CEA、CYFRA21-1水平。五種腫瘤標(biāo)記物生物參考區(qū)間分別為：NSE＜6ng/mL；ProGRP＜63pg/mL；HE4＜70pmol/L；CEA＜5ng/mL；CYFRA21-1＜3.07ng/mL。

1.3 統(tǒng)計學(xué)處理 采用SPSS18.0軟件對三組研究對象檢測數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計學(xué)分析，數(shù)值變量以均數(shù)±標(biāo)準差（±s）表示，多組間比較采用單因素方差分析，兩兩比較采用q檢驗，P≤0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 通過分析三組實驗對象血清中NSE、ProGRP、HE4、CEA、CYFRA21-1水平顯示，肺癌組中五種腫瘤標(biāo)志物表達水平均高于肺炎組和健康對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。肺炎組NSE水平略高于健康對照組（P＜0.05），差異有統(tǒng)計學(xué)意義，其它四種腫瘤標(biāo)志物血清水平與健康對照組無統(tǒng)計學(xué)差異（P＞0.05）（見表1）。

2.2 進一步對兩種肺癌病理分型中五種腫瘤標(biāo)志物血清水平進行分析發(fā)現(xiàn)，SCLC組ProGRP、NSE血清水平高于NSCLC組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。相比于SCLC，CYFRA 21-1、HE4、CEA血清水平在NSCLC組較高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）（見表2）。

2.3 通過分析發(fā)現(xiàn)，單個血清腫瘤標(biāo)志物對于肺癌診斷的敏感性和特異性分別為：NSE為50%和68%；ProGRP為20%和91%；HE4為68%和61%；CEA為73%和39%；CYFRA21-1為75%和80%。聯(lián)合檢測五種腫瘤標(biāo)志物敏感性和特異性為82%和74%。

3 討論

NSE是一種糖酵解酶，在各類神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤，尤其是SCLC中表達增高。目前NSE已作為SCLC診斷、治療、監(jiān)測和判斷預(yù)后的首選腫瘤標(biāo)志物[4]。然而，NSE的敏感性相對較低[5]。有研究顯示，CYFRA 21-1是區(qū)分肺部良性病變以及NSCLC分型的最敏感指標(biāo)[6]。CEA是一種復(fù)雜的可溶性糖蛋白，其不僅在胚胎性腫瘤組織中表達，在人的胃腸、肺等也有表達。血清CEA水平對肺癌尤其是肺腺癌具有重要的診斷價值[7]。人附睪蛋白4（HE4）是一種新型腫瘤標(biāo)志物，在卵巢癌組織中高表達，而在正常組織中表達極低，因此在臨床上主要用于卵巢癌的早期診斷以及監(jiān)測卵巢腫瘤的治療效果和預(yù)后。近年來，有文獻報道HE4也可用于肺癌的早期診斷[8]。除惡性腫瘤外，血清HE4水平還受多種因素影響，如女性絕經(jīng)前參考區(qū)間為＜70pmol/L，絕經(jīng)后為＜140pmol/L。ProGRP是一種新型腫瘤標(biāo)志物，主要存在于成人胃腸道和呼吸道中；GRP為神經(jīng)肽激素，最初從豬胃組織中分離出來；ProGRP是GRP的血清前體肽，在血清中穩(wěn)定，可以用作SCLC的診斷[9]。

表1 三組實驗對象NSE、ProGRP、HE4、CEA、CYFRA21-1血清水平比較（±s）

表1 三組實驗對象NSE、ProGRP、HE4、CEA、CYFRA21-1血清水平比較（±s）

注：與肺癌組比較，a P＜0.05；與肺炎組比較b P＜0.05

組別肺癌組肺炎組健康對照組n 104 62 75 NSE（ng/mL）25.62±6.14 8.41±2.82a 3.38±0.29a/b ProGRP（pg/mL）85.64±9.52 40.88±2.74a 34.26±2.81a HE4（pmol/L）81.26±3.04 31.42±1.41a 36.14±2.63a CEA（ng/mL）25.87±3.62 4.42±2.16a 3.84±1.83a CYFRA21-1（ng/mL）4.74±1.36 1.26±0.84a 1.63±1.02a

表2 兩種肺癌病理分型中NSE、ProGRP、HE4、CEA、CYFRA21-1血清水平比較（±s）

表2 兩種肺癌病理分型中NSE、ProGRP、HE4、CEA、CYFRA21-1血清水平比較（±s）

注：與SCLC組比較，a P＜0.05；與NSCLC組比較，b P＜0.05

組別SCLC組NSCLC組n 21 83 NSE（ng/mL）32.21±6.76 15.87±3.12a ProGRP（pg/mL）96.35±7.85 73.42±3.63a HE4（pmol/L）73.17±8.44b 86.73±5.14 CEA（ng/mL）21.26±3.89b 33.75±4.15 CYFRA21-1（ng/mL）3.73±1.28b 6.12±2.56

根據(jù)組織學(xué)分型可將肺癌分為兩類：小細胞肺癌（SCLC）和非小細胞肺癌（NSCLC），兩者治療方法和預(yù)后均不相同。相比于后者，SCLC對化學(xué)療法和放射療法高度敏感，但SCLC通常于患者晚期才發(fā)現(xiàn)，在診斷時已發(fā)生區(qū)域淋巴結(jié)或器官轉(zhuǎn)移[10]。血清腫瘤標(biāo)志物已在肺癌的診斷、治療和預(yù)后監(jiān)測中得到廣泛應(yīng)用。然而，由于它們的敏感性較低或組織學(xué)分型特異性不高，導(dǎo)致臨床應(yīng)用價值仍存在爭議。本研究中，相比于健康對照組和肺炎組，肺癌組血清HE4、CEA、ProGRP、NSE和CY?FRA21-1五種血清標(biāo)志物血清水平均顯著增高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義。此外，肺炎組NSE水平略高于健康對照組，提示肺部炎性病變可能會增加NSE血清水平。通過進一步分析發(fā)現(xiàn)，SCLC組NSE和ProGRP血清水平較高；而CYFRA 21-1、CEA、HE4血清水平在NSCLC組中較高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義。由此可見，HE4作為一種新型腫瘤標(biāo)志物，不但在卵巢癌患者血清中表達升高，而且在肺癌患者血清中也有高表達。提示HE4可能是肺癌診斷和預(yù)后的潛在標(biāo)志物，具有重要的臨床應(yīng)用價值。此外，NSE檢測結(jié)果易受標(biāo)本質(zhì)量影響，標(biāo)本溶血或放置時間過久可導(dǎo)致結(jié)果異常，因此ProGRP在SCLC診斷中的應(yīng)用價值優(yōu)于NSE。

本研究中，單項腫瘤標(biāo)志物肺癌診斷敏感性和特異性分別是：CYFRA21-1為75%和80%；HE4為68%和61%；ProGRP為20%和91%；NSE為50%和68%；CEA為73%和39%；聯(lián)合檢測敏感性為82%。因此組合檢測可以提高肺癌臨床診斷效能，有利于肺癌患者的治療和預(yù)后。