冷凝集素對(duì)血型鑒定和交叉配血的影響及對(duì)策

孔秀紅

【摘 要】目的：探討冷凝集素對(duì)血型鑒定和交叉配血的干擾影響及處理方法。方法：回顧性分析2018年3月-2019年5月收治的23例冷凝集素增多癥患者的臨床資料，對(duì)其標(biāo)本，進(jìn)行了鹽水法，改良凝聚胺法，微柱凝膠免疫法，以及經(jīng)典抗人球蛋白試驗(yàn)等鑒定特異性抗體。結(jié)果：在不同溫度下凝集程度有差別，其中4℃時(shí)有明顯凝集，而在37℃時(shí)凝集逐漸消失。結(jié)論：對(duì)于存在冷凝集的患者，在進(jìn)行交叉配血時(shí)，應(yīng)采用加溫輸注，以清除患者血清中冷凝集素的影響。

【關(guān)鍵詞】冷凝集素;血型鑒定;交叉配血;干擾;對(duì)策

【中圖分類號(hào)】R445【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A【文章編號(hào)】1672-3783（2020）03-09--02

交叉配血在臨床輸血治療中起著至關(guān)重要的作用，而準(zhǔn)確的血型結(jié)果又是進(jìn)行交叉配血的前提。輸血科在日常工作中經(jīng)常會(huì)遇到各種原因?qū)е碌难丸b定困難和疑難配血的情況。其中，冷凝集是引起這種困難的最常見因素[1]。低溫或者一些病理情況下，冷凝集素的非特異性凝集會(huì)干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果。本研究回顧性分析23例冷凝集素增多癥患者的臨床資料，總結(jié)原因，提出處理方法。現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2018年3月-2019年5月收治的23例冷凝集素增多癥患者為研究對(duì)象。納入標(biāo)準(zhǔn)：患者血紅蛋白（Hb）<60g/L;無傳染性疾病。排除標(biāo)準(zhǔn)：血型為Rh（﹣），肝功能嚴(yán)重受損，有自身免疫性疾病的患者。23例患者中男12例，女11例，年齡50-86歲，平均年齡（76.32±5.21）歲。

1.2 方法

1.2.1 血型及血清學(xué)檢測 ①試劑：抗A抗B血型定性試劑，人ABO血型反定型紅細(xì)胞試劑，RhD血型定型試劑，改良凝聚胺試劑。②檢測方法：ABO血型鑒定，Rh血型鑒定。③冷凝集抗體滴度測定：取患者不抗凝靜脈血2mL，放置在37℃孵育，待血液凝固后分離血清，患者抗凝血2mL，用溫生理鹽水洗滌RBC 3次配成3%-5%的細(xì)胞懸液;取10支試管，依次編號(hào)1-10，每管中加生理鹽水0.2mL，并在第1管中加血清0.2mL，然后倍比稀釋至第9管，混勻后棄去0.2mL，將第10管作為空白對(duì)照;每管中加入3%-5%的紅細(xì)胞懸液0.2mL，混勻后置4℃冰箱中12h后觀察結(jié)果。記錄有明顯凝集的最后1管的滴度，若第9管仍有凝集，則繼續(xù)往下稀釋觀察其最高滴度。滴度>1︰32有診斷意義[2]。

1.2.2 交叉配血試驗(yàn) 將患者標(biāo)本與B型獻(xiàn)血者在室溫進(jìn)行凝聚胺及鹽水法交叉配血，操作規(guī)程嚴(yán)格按照說明書上進(jìn)行，主側(cè)出現(xiàn)明顯凝集，次側(cè)出現(xiàn)小顆粒狀弱凝集，交叉配血不合;故將交叉試驗(yàn)所需的凝聚胺及鹽水放置37℃水浴箱預(yù)熱，用溫鹽水將患者的紅細(xì)胞洗滌3次配置成2%-5%的紅細(xì)胞懸液，進(jìn)行交叉配血。在37℃的環(huán)境中進(jìn)行結(jié)果判讀，取出試管輕輕混合讀取結(jié)果，在鏡下觀察時(shí)也需將玻片預(yù)熱之后再判讀結(jié)果。

1.3 觀察測評(píng)指標(biāo) 凝集素的效價(jià)要保證在一個(gè)正常值范圍內(nèi)，冷凝集素的效價(jià)過高，冷凝集素對(duì)血型測定和交叉配血會(huì)產(chǎn)生一定的干擾現(xiàn)象，使各種血型出現(xiàn)混亂。通常情況下，利用未加處理的紅細(xì)胞和血清測定凝集，并通過凝集判定冷凝集素的效價(jià)，作為鑒別冷凝集素特異性的指標(biāo)。

2 結(jié)果

查詢患者臨床資料發(fā)現(xiàn)其以往住院和輸血時(shí)均為A型Rh（D）陽性，并根據(jù)以上試驗(yàn)結(jié)果分析為自身冷凝集素或37℃不反應(yīng)的無臨床意義同種抗體影響血型鑒定，對(duì)該患者血樣采用抗人球蛋白卡式法進(jìn)行交叉配血，取A型Rh（D）陽性獻(xiàn)血員配血，主次側(cè)均無凝集反應(yīng)、無溶血，配血相合。根據(jù)上述結(jié)果選擇交叉配血相合的A型Rh（D）陽性懸浮紅細(xì)胞2U發(fā)給臨床。臨床輸注時(shí)血液制品使用輸血加溫器，37℃預(yù)熱待輸血液，使其恢復(fù)到人體正常溫度或接近正常溫度后進(jìn)行緩慢勻速輸注。患者輸注后無不良反應(yīng)發(fā)生，Hb由41.2g/L上升到59.2g/L，貧血癥狀得到改善。

3 討論

冷凝集素是一種大分子針對(duì)RBC膜抗原的免疫球蛋白–M（immunoglobulin–M，Ig-M）型抗體，其具有可逆性，在4℃時(shí)抗體活性最強(qiáng)，可與自身紅細(xì)胞和他人紅細(xì)胞發(fā)生凝集反應(yīng)，當(dāng)溫度升高后活性減弱，凝集消失。正常人體內(nèi)含量極低且效價(jià)較低，一般效價(jià)在1∶16以下，不會(huì)對(duì)紅細(xì)胞產(chǎn)生影響。但在某些疾病下，如自身免疫性溶血、支原體肺炎、病毒感染、風(fēng)濕病、系統(tǒng)性紅斑狼瘡和惡性淋巴瘤等都會(huì)使患者體內(nèi)冷凝集素含量和效價(jià)增高，能與紅細(xì)胞凝集并溶血，甚至引起病人死亡[3]。冷凝集隨著溫度和效價(jià)的不同對(duì)血型和配血的影響也不同。在北方環(huán)境溫度較低的實(shí)驗(yàn)室，低效價(jià)的冷凝集對(duì)血型鑒定和配血影響都可以產(chǎn)生較大的影響。此時(shí)可通過提高試驗(yàn)溫度或加溫來消除冷凝集的影響。當(dāng)冷凝集效價(jià)高于 1∶512時(shí)，可用37℃ 0.9%氯化鈉注射液多次洗滌才可清除冷凝集的干擾。當(dāng)冷凝集效價(jià)高于1∶1024時(shí)，經(jīng)37℃ 0.9%氯化鈉注射液多次洗滌后，試驗(yàn)結(jié)果仍有弱凝集，則需對(duì)患者的紅細(xì)胞在45 ℃進(jìn)行熱放散–聚蔗糖分離，然后采用微柱凝膠卡進(jìn)行ABO血型鑒定和交叉配血試驗(yàn)，才能消除冷凝集素的干擾。當(dāng)患者紅細(xì)胞冷凝集素清除試驗(yàn)最后仍有弱凝集，應(yīng)補(bǔ)充患者抗人球蛋白及分型試驗(yàn)，應(yīng)考慮患者可能是單純性高效價(jià)冷凝集或免疫球蛋白G（immunoglobulin G，IgG）和C3混合型抗體。若IgG或C3檢測一項(xiàng)陽性，則患者有溶血傾向;當(dāng)IgG和C3同時(shí)陽性，則患者溶血嚴(yán)重。應(yīng)及時(shí)尋找病因，告知臨床醫(yī)生輸血風(fēng)險(xiǎn)并監(jiān)測抗體變化。有條件的實(shí)驗(yàn)室可進(jìn)一步分離鑒定IgG抗體，選擇合適的血液，減少輸血反應(yīng)。在冬季或室內(nèi)溫度下降等條件下，在臨床血型鑒定及配血過程中應(yīng)注意保溫，提高環(huán)境溫度，避免冷凝集的發(fā)生。如仍發(fā)生冷凝集現(xiàn)象，可用上述試驗(yàn)等方法解決，報(bào)告時(shí)要注明有冷凝集現(xiàn)象，同時(shí)提示臨床保溫輸血，并且輸血要慢，密切觀察患者反應(yīng)，確保輸血安全。

綜上所述，確定有冷凝集素影響之后，輸血科要和臨床做好溝通，確保患者在輸血過程中有專人陪護(hù)，同時(shí)注意患者的保暖，不要讓患者受涼，并將輸注的懸液進(jìn)行37℃的預(yù)溫處理，進(jìn)行緩慢滴注，確保臨床輸血安全。經(jīng)過上述一系列措施之后，患者的病情得到了有效的控制，不僅挽救了患者的生命，也有效避免了醫(yī)患糾紛的發(fā)生。

參考文獻(xiàn)

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