鼠胚胎培養在輔助生殖實驗室質量控制中的應用研究

趙利，姚鵬

（黃河三門峽醫院 生殖醫學科，河南 三門峽 472000）

生殖是人類生命延續的自然過程，由于人類生存環境的污染及各種物理化學因素的作用，導致卵子、精子的質量下降，影響了人類的正常生殖活動［1］。為延續生命過程，輔助生育技術便應運而生，其中以體外受精-胚胎移植（in vitro fertilization and embryo transfer, IVF-ET）為主的輔助生殖技術已廣泛應用于不孕癥的治療中，但受孕率卻不盡如人意［2］。研究［3-5］表明，胚胎質量是輔助生殖技術成功與否的關鍵因素，而影響其生存、發育的因素較多，如促超排卵方案的應用、實驗中采卵及采精的過程以及其他還未意識到的因素，因此質量控制是輔助生殖實驗室質量保證的一個重要環節，其中較為重要的內容就是檢測各種器皿及試劑對胚胎是否存在有害的內毒素。小鼠培養是監測實驗室培養環境的重要指標，因此本研究以小鼠體內外受精及胚胎培養實驗進行質控評估，以期為臨床應用提供理論依據。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 實驗動物 健康雌性昆明白鼠，4～6 周齡，體重（20.35±2.03）g；雄性昆明白鼠，8 周齡以上，體重（30.25±3.11）g，購自上海斯萊克實驗動物技術有限公司，動物合格證號SCXK（滬）2012-0002。實驗前所有小鼠適應性飼養7 d，室溫20℃～25℃，12 h 晝夜交替。

1.1.2 言要試劑 注射用孕馬血清促性腺激素（pregnant mare serum gonadotropin,PMSG）、絨毛膜促性腺激素（human chorionic gonadotropin, hCG）（杭州動物藥品廠），以10 mL 0.9%生理鹽水將其溶解，于-20℃分裝保存；卵裂液（CSC）、人輸卵管液（human tubal fluid, HTF）、HEPES 緩沖的人輸卵管液（modified human tubal fluid, mHTF）、合成血清蛋白（SSS）（歐文公司產品）、胚胎處理液、洗精受精液、卵裂胚培養液G1、囊胚培養液G2、人血清白蛋白（human serum albumin, HSA）（瑞典Vitrolife 公司）等。……