吉林省地區(qū)奶牛乳房炎中鏈球菌的分離鑒定及耐藥性分析

賈文博，王彥方，馬曉媛，王 晉，王 妍，王 楠*

1.延邊大學，吉林延吉 133000；2. 吉林省磐石市動物疫病預(yù)防控制中心，吉林磐石 132300；3.吉林大學，吉林長春 130062；4.吉林省動物疫病預(yù)防控制中心，吉林長春 130062

在世界各國奶牛業(yè)中，乳房炎是造成奶牛業(yè)損失最多的一種疾病，也是一種嚴重的人畜共患病[1]，主要臨床表現(xiàn)為乳區(qū)紅、腫、熱、痛及泌乳障礙。鏈球菌是引起乳房炎最普遍的菌屬之一，以無乳鏈球菌、停乳鏈球菌、乳房鏈球菌和化膿鏈球菌等最為常見[2]。為了解吉林地區(qū)奶牛乳房炎中各鏈球菌分布情況及耐藥性，本實驗針對全省15個奶牛場的300份乳液樣品進行了生化鑒定及藥敏試驗。

1 材料采集和應(yīng)用方法

1.1 材料采集

1.1.1 樣品來源：吉林省15個奶牛場采集的300份臨床奶牛乳房炎的乳樣。

1.1.2 儀器與試劑生物安全柜、恒溫培養(yǎng)箱、比濁儀、渦旋振蕩器、全自動微生物接種儀、微生物鑒定及藥敏分析系統(tǒng)（美國Thermo Fisher Scientific）；光學顯微鏡（日本奧林帕斯株式會社）；革蘭氏染色劑、去離子水、0.5麥氏比濁管、革蘭氏陽性菌鑒定板、CAMHBT肉湯、革蘭氏陽性菌藥敏板均購自美國Thermo Fisher Scientific。

1.2 應(yīng)用方法

1.2.1 細菌分離將乳樣在渦旋振蕩器上震蕩混勻，在生物安全柜中進行無菌操作，使用一次性接種環(huán)，采用平板劃線法接種于血瓊脂平板上并標記序號及日期，置于37 ℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)18 h，從血瓊脂平板中用一次性接種環(huán)挑取單個菌落革蘭氏染色，鏡檢。初步判定是革蘭氏陽性球狀的單個菌落，再次平板劃線接種于新的血瓊脂平板上純化培養(yǎng)，18 h后革蘭染色、鏡檢?！?br>