含溶菌酶的抗敏漱口水泡騰片的研發及臨床效果評價

耿帥峰，褚夫江，徐天生

（1.廣州康云生物科技有限公司，廣東廣州 510700；2.廣東藥科大學，廣東廣州 510006）

漱口水多數是大瓶裝液體，對出差旅行的消費者而言，攜帶非常不方便。固體泡騰片漱口水與液體漱口水相比，有著突出的優勢，如服用方便、體積小、便于運輸以及藥效保存好等[1]。一般漱口水口腔護理產品含有的抑菌成分多以中草藥和化學類抑菌劑為主，經常使用這類產品，容易造成口腔細菌生態失調，或使細菌產生抗藥性，不僅不能達到預防口腔疾病的效果，反而易引發其他多種口腔疾病。

本研究所研發的漱口水泡騰片中功效成分為溶菌酶，具有抗細菌、真菌及腫瘤等多種藥理作用，生物相容性好，對組織無刺激性、無毒性，已被制作為一種性質優良、殺傷病原微生物而不破壞機體的酶制劑[2]。作為機體非特異免疫因子之一，溶菌酶參與口腔環境平衡調節過程，與齲病、口腔黏膜病及牙周病的發生、發展有一定關系[3]。有研究顯示，向口腔保健產品中添加溶菌酶等抗菌劑比添加人工合成的抗菌劑對預防齲齒更有效[4]。同時，溶菌酶等小分子物質處于口腔疾病防御的第一線，參與宿主對細菌的非免疫防御[5]。本研究漱口水可隨時攜帶、隨時使用，將增大消費者使用漱口水的習慣，更好地呵護牙齒。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

材料：溶菌酶（98.0%，市售），氯化鍶（99.0%，廣州納英化工有限公司），硝酸鉀（99.0%，西安拉維亞生物科技有限公司），碳酸氫鈉（99.0%，山東谷碩生物科技有限公司），檸檬酸（98%，江蘇科倫多食品配料有限公司），麥芽糖精（98%，市售），甜菊糖苷（98%，市售），PEG6000（65%,市售），羥乙基纖維素（98%，市售），薄荷香精粉（市售）。

試劑：乙醇（35.0%，市售），溶菌酶標準品(市售試劑盒中含有）。

1.2 含溶菌酶漱口水泡騰片的組分

含溶菌酶的漱口水泡騰片是由泡騰劑、填充劑、甜味劑、粘結劑、芳香劑和功效成分組成，具體成分及比例如表1所示。

表1 含溶菌酶漱口水泡騰片的成分組成

1.3 含溶菌酶漱口水泡騰片的制備

將原料除溶菌酶外分別進行研磨，過160～180目篩，備用。將碳酸氫鈉、50%羥乙基纖維素、30%聚乙二醇加入適量乙醇溶液中，制粒，烘干后粉碎成粉末，過160～180目篩，制得粉末A。將溶菌酶、麥芽糖精、薄荷香精粉、甜菊糖苷、聚乙二醇各40%均勻混合，加入適量乙醇溶液中，制粒，烘干后粉碎成粉末，過160～80目篩，制得粉末B。將檸檬酸、羥乙基纖維素各50%、聚乙二醇30%加入適量乙醇溶液，制粒，烘干粉碎成粉末，過160～180目篩，制得粉末C。將上述粉末A、B、C混合均勻后進行壓片，即得。

1.4 泡騰片漱口水護理液的制備

各取數片上述制備的泡騰片稱重，分別加入100 mL常溫水中，制備漱口水護理液。

2 質量指標檢測

泡騰片崩解時間可以參考中國藥典對維生素C泡騰片崩解時間的要求；泡騰片漱口水護理液的基本參數應符合GB/T2945-2012《口腔護理液》。對本研究制備的泡騰片和泡騰片漱口水護理液進行檢測，結果如表2和表3所示。檢測結果表明所制備的泡騰片符合要求。

表2 泡騰片檢測結果

3 臨床效果評價

3.1 病例選擇

本研究采用隨機、平行對照、雙盲的臨床研究方法，篩選74例符合納入標準、不屬排除標準的受試者。納入標準：（1）同意參加本臨床試驗并簽署書面知情同意書者；（2）年齡在18～65周歲（含18周歲和65周歲），性別不限，對市售口腔產品或化妝品無過敏史；（3）視診或探診發生牙本質敏感的部位為頰面牙頸部，病人主觀牙本質敏感癥狀VAS值在1～9；空氣刺激時，至少有 2顆牙 VAS值在3～8；（4）參加研究前一個月沒有使用下列藥物：抗驚厥藥、抗組織胺藥、抗憂郁藥物、鎮靜劑、安定劑，一周內未服用過消炎藥、日常止痛藥；（5）沒有使用其它抗牙本質敏感牙膏和漱口水；（6）沒有同時參加其他類似試驗研究。排除標準：（1）已知或懷疑對試驗藥及其輔料有過敏史或嚴重不良反應，或過敏體質者；（2）受試者有嚴重的口腔疾病、慢性病；（3）牙周病進展期或者過去一年內接受過牙周治療（包括牙周手術）；（4）敏感牙齒的松動度大于1；（5）牙齒有大面積充填體或冠，疑有牙髓炎、齲齒、釉質隱裂，可摘局部義齒的基牙；（6）妊娠或準備妊娠婦女，哺乳期婦女。

表3 泡騰片漱口水護理液檢測結果

3.2 試驗方法

本試驗采用隨機雙盲平行對照設計方法，受試者在基線、使用4周、使用8周回訪進行口腔情況評估。

3.2.1 試驗分組

篩選74例符合要求的受試者，試驗組和對照組各37例。

具體而言,對于每個數據包,先依據空洞區域定義“雷區”FAR(Forbidden Area),進而使得數據包能避開FAR,進而抑制空洞路由。而FAR的尺寸和位置隨數據包時延要求不同而變化,從而平衡網絡流量。為了保證數據包能及時到達目的節點,DG-SHGR路由利用端到端時延要求調整FAR尺寸。實驗數據表明,提出的DG-SHGR路由有效地提高了數據包傳遞率,并平衡網絡負載。

3.2.2 盲法

采用同樣白色塑料瓶進行成裝。兩組泡騰片在外觀上一致，用不同的編號區分。泡騰片編號由Microsoft Excel軟件“=Rand（）”函數方法得到的隨機數字產生。

3.2.3 泡騰片

試驗組泡騰片為含溶菌酶的抗敏漱口水泡騰片；對照組為不含生物溶菌酶及抗敏成分的普通漱口水泡騰片。

3.2.4 使用方法

實驗期間要求受試者只用提供的漱口水泡騰片，實驗組以自行制備含溶菌酶抗敏泡騰片，對照組以市面購買普通泡騰片，且實驗組和對照組的每片泡騰片質量相同。給受試者分發2種泡騰片中的一種；使用時，受試者將泡騰片放置于50 mL水中，待泡騰片完全崩解，含漱 30 s，每天 2次，每次 20 mL。受試者均統一分發給同樣的普通牙膏和成人軟毛牙刷，要求受試者使用統一發放的牙膏和牙刷，每天刷牙2次（早晚各1次），每次刷牙1 min[6]。臨床檢查于基線、第4周及第8周進行，并由同一名檢查者完成。

3.3 評價指標和統計方法

3.3.1 評價指標

使用牙科綜合治療臺的氣槍在離敏感牙齒1 cm距離噴吹 1 s，空壓機壓力為 60 kPa，吹氣溫度為19～21 ℃，吹氣時將手指放在鄰牙以避免鄰牙癥狀影響結果的準確性。每顆牙每次檢查時只接受一次空氣刺激檢查。采用數字化疼痛評判法（Visual analogue scale，VAS）評分，受試者對疼痛的主觀評價記錄在一條10 cm長的直線上，線的起始端為0表示“無疼痛或沒有不舒適”，線的末端為10表示“極度疼痛或不適”，當空氣檢測結束后，受試者根據VAS尺對疼痛值劃線，代表測試牙本質過敏疼痛程度。整個研究都采用同樣的評判方案測試牙本質過敏狀況。基線時對受試者的全口牙進行檢查，篩選出疼痛值3～8的牙。

3.3.2 統計方法

采用SPSS統計軟件統計分析。所有統計推斷均采用雙側檢驗，具有統計學意義的檢驗水準定為0.05，參數的置信區間估計采用95%置信區間。

3.4 臨床試驗結果

74例受試者參與試驗，其中3人失訪，2人不符合納入排除標準，中途退出試驗。受試者中途退出試驗的原因與本研究無關。完成試驗的69例受試者中有2例與方案偏離，這2例參與人口學資料分析、安全性分析，不參與療效指標分析，其中試驗組1例，對照組1例。

3.4.1 兩組基線比較

74例受試者，5例中途退出，69例完成試驗，其中試驗組35例，對照組34例。所有參與的受試者均未發現由使用漱口水泡騰片引起不良反應或嚴重事件。研究人群基本信息如表3，基線期療效指標如表4。

表3 研究人群的基線檢查情況（n=72）

表4 試驗組和對照組療效指標基線期分布情況（n=37）

基線期試驗組與對照組相比較，牙齒敏感疼痛VAS值不具有顯著性差異（P＞0.05）。

3.4.2 依從性

74例受試者參與試驗，有5例中途退出試驗，其中試驗組2例，對照組3例；有2例未按要求使用泡騰片，其中對照組1例，試驗組1例。對照組依從性為97.14%。，試驗組依從性為97.06%。

3.4.3 臨床安全性分析

所有受試者試驗過程中未出現由該產品使用引起的不良反應或不良事件。

3.4.4 臨床（VAS值）結果

臨床（VAS值）結果如表5所示，試驗組牙齒VAS值明顯低于對照組；4周及8周后試驗組相對于對照組VAS值分別減少了25.61%和62.27%，且具有統計學差異（P＜0.05）。

4 結論

含溶菌酶的漱口水泡騰片，外觀光潔，崩解較快，理化指標穩定，衛生指標符合要求。臨床試驗顯示：基線檢查中，試驗組和對照組間無統計學差異；試驗組牙齒VAS值明顯低于對照組；4周及8周后試驗組相對于對照組VAS值分別減少了25.61%和62.27%，且具有統計學差異（P＜0.05）。因此，與對照組泡騰片相比，實驗組含溶菌酶的漱口水泡騰片具有降低牙本質敏感疼痛值，緩解或減輕牙本質敏感癥狀的臨床功效。該泡騰片功效成分活性較高，不含酒精，可隨時攜帶，隨時使用，值得推廣使用。

表5 基線、4周、8周牙齒VAS值均數比較