骨髓細胞形態學檢查在疑似白血病患者輔助診斷中的價值

張華，李遠波

(1.寶雞市第五人民醫院檢驗科,陜西 寶雞 722405;2.陜西省漢中市鎮巴縣人民醫院檢驗科,陜西 漢中 723600)

骨髓細胞的主要作用是造血，骨髓細胞的形態學改變，包括細胞的質與量病理改變，與多種血液疾病的發生發展具有較強相關性[1]。隨著醫療檢測技術的不斷發展，骨髓細胞形態學檢查、免疫學檢查、染色體檢查等技術已廣泛應用在疑似白血病患者的早期輔助診斷中，其中骨髓細胞形態學檢測技術是臨床應用最廣泛的診斷技術之一，主要是通過顯微鏡或自動化儀器將骨髓細胞形態及數量改變進行統計分析，臨床上用于血液病的早期診斷、臨床療效評估[2]。本研究分析了骨髓細胞形態學檢查在疑似白血病患者輔助診斷中的價值。報告如下。

1 臨床資料

1.1一般資料 選取我院2018年4月至2019年6月收治的128例白血病患者的臨床資料。納入標準：知曉本研究利弊，由本人或監護人簽署知情同意書，本研究符合倫理學研究要求(倫理學批號：17481)；排除標準：排除重癥肝腎功能異常者；惡性腫瘤患者；入組研究前接受系統白血病治療者及其他可能影響本次研究結果的病例。入組患者男性68例，女性60例；年齡20～75歲，平均(55.14±12.09)歲。無中途退出及死亡病例。

1.2檢測方法

1.2.1骨髓細胞形態學檢查 所有患者入組后擇期采集骨髓備檢，使用瑞氏吉姆薩染色分類技術，采用非特異性酯酶、氟化物抑制試驗及過氧化物酶染色等多種方法對髓細胞實施染色，按照FAB 分型標準進行分型。過氧化物酶染色陽性的標準為白血病的陽性細胞超過3%。(1)免疫學檢查 所有患者入組后擇期采集3 mL骨髓液(肝素抗凝)，分離核細胞備檢，采用間接熒光標記法對活細胞測定，使用流式細胞儀檢測抗體，單克隆抗體包含B系、T系、巨核系、髓系、干系及淋系。免疫學檢測陽性標準：當淋系、 髓系抗原陽性細胞超過20%時診斷為陽性。(2)染色體檢查 所有患者入組后擇期采集3 mL骨髓液備檢(肝素抗凝)，采用G帶技術顯帶，觀察染色體核型差異。

1.3觀察指標 觀察入組患者的骨髓細胞形態學檢查結果、免疫學檢查結果及染色體檢查結果。

2 結 果

2.1骨髓細胞形態學檢查結果 128例患者經骨髓細胞形態檢查確診103例，診斷符合率為80.47%(103/126)；10例患者無法區分白血病亞型；6例符合WHO分型依據，其原始細胞為21%～29%，4例患者為粒、紅、巨三系細胞和粒系、巨核系兩系細胞合并病態造血現象，5例患者的骨髓有核細胞顯著增多合并骨髓細胞病態造血表現。

2.2免疫學檢查結果 10例患者無法通過骨髓細胞形態學區分白血病亞型。其中5例患者過氧化物酶染色低于3%，免疫學檢測結果提示，4例同時存在淋系、髓系抗原表達，兩系積分超過2分，確診為雜合型白血病；1例患者免疫學檢測提示兩種髓系抗原表達(CD13、CD15、CD38、CD56、CD117)，確診為確診M5a。5例骨髓細胞形態學檢查結果誤診患者：3例患者過氧化物酶染色低于3%，其中2例患者確診為急性淋巴細胞白血病L2、1例患者確診為大顆粒淋巴細胞白血病；另2例患者免疫學檢查單克隆抗體干系陰性。

2.3染色體檢查結果 10 例患者無法通過骨髓細胞形態學區分白血病亞型。5例患者染色體檢查正常，5例染色體異常。3例經骨髓細胞形態學檢查證實為急性髓系白血病M3b， 其中2例單抗檢查染色體正常，基因檢測診斷為M2b，1例存在特征性染色體核型異常證實為M2b。

3 討 論

白血病是人類血液系統常見病癥之一，發病因素主要為化學因素、遺傳因素、接觸放射物質或病毒等[3-4]。骨髓細胞形態學檢查直觀體現細胞的質與量改變，應用顯微鏡或自動化儀器對于骨髓血液細胞的觀察更加細致，結合化學染色技術對于血液疾病診斷準確度更高，采用FAB分型規則為血液疾病的診斷提供技術支撐[5]。骨髓細胞形態學檢查，當有骨髓有核細胞計數增高時，骨髓出現增生，疑似疾病有白血病、溶血性貧血、脾功能亢進等；當有核細胞計數降低時，骨髓造血組織功能異常，可診斷為再生障礙性貧血[6]。

為了降低骨髓細胞形態學檢查白血病患者誤診及漏診率的影響，臨床上可采用免疫學檢測或染色體檢測結合細胞形態學檢測來提高診斷準確度，對患者的預后評估提供技術支撐[7]。慢性白血病發病率較白血病整體發病率低，在急性白血病中，急性單核細胞白血病與急性早幼粒細胞白血病檢出率最高[8]。對于白血病患者的早期鑒別診斷中應對患者的血常規指標改變情況進行評估，當白細胞計數發生異常變化時，白血病發病率可激增[9]。外周血血液涂片對于白血病患者的早期診斷意義重大，白血病患者早期外周血血液圖片鏡下檢測可提示細胞形態學變化，通過對比白血病患者骨髓涂片、外周血涂片中的細胞形態學改變情況，對于白血病的早期診斷提供依據[10]。白血病患者的髓細胞內核細胞增生明顯活躍或極度活躍表現為幼稚細胞或 原始細胞水平超正常水平20%或占比達到半數以上，可診斷為急性白血病。故對于急性白血病患者的早期實驗室指標檢測，應在入院后擇期行骨髓穿刺涂片檢查， 盡早做出準確診斷[11]。臨床研究結果提示，骨髓增生異常綜合征主要受造血干細胞影響，導致外周血細胞生成無效、骨髓細胞病態造血；再生障礙性貧血患者主要受骨髓干細胞增殖、分化障礙及造血微環境異常影響，患者的造血組織受損，影響骨髓正常造血功能，骨髓造血細胞發生再生功能障礙[11]。半數以上的骨髓異常綜合征患者轉化為白血病的風險較大，骨髓異常綜合征患者的正常細胞多受到遺傳基因影響發生克隆性改變[12]。FAB分型技術對白血病患者的細胞形態學檢查依據為過氧化物酶染色大于3%即可診斷為淋巴細胞白血病或急性非淋巴細胞白血病[12]。FAB分型技術無法對骨髓細胞多形態改變及淋巴細胞白血病做出準確評估，而細胞形態學檢測聯合免疫學檢測可以對上述多形態細胞改變做出準確評估，聯合檢測技術具有重復性及多參數評估優勢，采用免疫學檢測方法對于骨髓細胞的抗原進行細致分析評估，可對患者細胞髓系或淋系來源加深認識，對于后期依據白血病亞型進行分類診斷具幫助意義，一定程度上提高了診斷準確度，為白血病患者的臨床治療措施選擇及預后評估提供技術支撐[13]。實驗數據提示，采用骨髓細胞形態學檢查聯合免疫學檢測技術對于白血病患者的早期診斷具較高的診斷符合率，提高白血病患者的確診率，為后續治療方法的選擇及對癥治療提供依據[13]。本次研究結果證實，128例患者經骨髓細胞形態檢查確診103例，診斷符合率為80.47%；10例患者無法區分白血病亞型；6例符合WHO分型依據，其原始細胞為21%～29%，4例患者為粒、紅、巨三系細胞和粒系、巨核系兩系細胞合并病態造血現象，5例患者的骨髓有核細胞顯著增多合并骨髓細胞病態造血表現。10 例無法通過骨髓細胞形態學區分白血病亞型患者采用免疫學檢測方法，結果顯示：其中5例患者過氧化物酶染色低于3%，4例同時存在淋系、髓系抗原表達，兩系積分超過2分，確診為雜合型白血病；1例患者免疫學檢測提示兩種髓系抗原表達，確診為確診M5a。5例骨髓細胞形態學檢查結果誤診患者：3例患者過氧化物酶染色低于3%，其中2例患者確診為急性淋巴細胞白血病L2、1例患者確診為大顆粒淋巴細胞白血病；另2例患者免疫學檢查單克隆抗體干系陰性。

綜上所述，應用骨髓細胞形態學檢查對疑似白血病患者實際診斷價值高，診斷符合率高，早期確診及分型有助于白血病患者的后續治療，臨床應用前景廣泛。