長沙地區湘蓮葉內生細菌對植物促生作用的初步研究

□羅瓊，劉洪娜，黃秋霞，羅娜

（長沙醫學院 湖南 長沙 410219）

生物多樣性會受到原生存地區中其他植物入侵的影響。其他植物的入侵能夠對生態平衡和環境多樣性帶來消極影響，植物入侵是當前環境問題中難以解決的問題之一[1]。內生細菌與植物宿主之間的拮抗作用，對植物生長及抗病有一定益處。利用內生細菌能夠保護植物多樣性，可以解決部分植物入侵問題。研究表明，部分感染內生細菌植物的生長水平遠遠超過未感染內生細菌的植物，內生細菌對于多數植物幼苗生長都能夠起到促進作用[2]。

湘蓮產自湖南省，有祛痰抗炎、清暑利濕、止血化瘀、升發清陽、鎮定化驚等作用，具有較好藥用和使用價值。以從湘蓮葉中分離出的內生細菌作為研究對象，研究其對植物出芽、生根、莖生長的作用影響。

1 湘蓮葉內生細菌的分離

研究中所用的湘蓮葉內細菌來自于2018年7月在長沙地區采摘的新鮮湘蓮葉片。將新鮮葉片采摘到試驗室，然后用干凈水源將葉面雜質沖洗干凈，接著進行滅菌處理，將葉片自然風干，放置在冰箱中。

在125℃的高溫高壓滅菌塑料杯中裝入無菌水、培養基、甲醛、高錳酸鉀等試驗器材。同時控制人工氣溫調節箱，光照時間控制在12h內，溫度設置為恒溫28℃；黑暗時間為10h，其中溫度控制在20℃，在正式使用之前，高錳酸鉀和甲醛的比例為2∶1，放置2d。

將風干的湘蓮葉片進行壓碎處理，然后分為2份，一份用高錳酸鉀和甲醛混合液浸泡處理，將湘蓮葉片內生細菌完全殺死，另一份碾碎處理。將處理后的2份湘蓮葉片放置在培養基內，形成菌落。

2 湘蓮葉內生細菌促生作用的初步研究

2.1 湘蓮葉內生細菌對植物發芽時間的影響

2.1.1 湘蓮葉內生細菌對何首烏發芽時間影響

為了研究湘蓮葉內生細菌對植物發芽時間的影響，選取適量何首烏種子，測定湘蓮葉內生細菌對何首烏種子發芽時間和發芽數量的作用效果。

當加入提取出湘蓮葉內生細菌菌落0.05g后，何首烏的整體發芽時間明顯變短，這一結果能夠說明湘蓮葉內生細菌對植物發芽具有促進作用。另外，從研究結果能夠看出，湘蓮葉內生細菌對植物發芽總量并沒有發生明顯變化。

此外，研究表明何首烏的整體發芽時間受到湘蓮葉內生細菌菌量的影響。當湘蓮葉內生細菌加入量增多，湘蓮葉內生細菌對植物整體發芽時間作用有一定的變化。

綜上，湘蓮葉內生細菌對發芽時間的作用受到湘蓮葉內生細菌菌落添加量的影響[3]。

2.1.2 湘蓮葉內生細菌對黃葵發芽時間的影響

為了驗證試驗結果的正確性以及普適性，選取黃葵作為植株測驗對象。選取適量黃葵種子，測定湘蓮葉內生細菌對黃葵種子發芽時間和發芽數量的作用效果。

當加入提取出湘蓮葉內生細菌0.05g后，黃葵的整體發芽時間明顯變短，這一結果能夠說明湘蓮葉內生細菌對植物發芽時間具有促進作用。另外，從研究結果能夠看出，湘蓮葉內生細菌的添加對植物發芽總量并沒有發生明顯變化。

此外，經過研究發現，黃葵的整體發芽時間不受湘蓮葉內生細菌菌量的影響。當湘蓮葉內生細菌菌落加入量增多，湘蓮葉內生細菌對黃葵發芽時間作用沒有顯著變化，可見湘蓮葉內生細菌菌落對黃葵發芽時間的作用不受到菌落添加量的影響。

2.1.3 小結

從上述黃葵和何首烏兩組對照植物的試驗結果可知，雖然湘蓮葉內生細菌對不同植株發芽時間的作用結果和情況不同，但是湘蓮葉內生細菌能夠對植株發芽起到不同程度的促進作用[4-5]。

2.2 湘蓮葉內生細菌對植物根長和莖長的影響作用

通過添加不同比例湘蓮葉內生細菌菌體測定其對植物根長和莖長的作用效果。

2.2.1 湘蓮葉內生細菌對何首烏根長和莖長的影響作用

為了研究湘蓮葉內生細菌對植物根長生長的影響，選取適量發芽何首烏，測定湘蓮葉內生細菌對何首烏根長生長的作用效果。當加入提取出湘蓮葉內生細菌0.05g后，何首烏的整體根長生長情況沒有發生改變，說明湘蓮葉內生細菌對植物根長沒有促進作用。為了排除是否是菌落加入量過少導致作用不明顯的情況，加大菌落用量，加入湘蓮葉內生細菌0.1g，但是何首烏的整體根長生長情況仍然沒有受到影響，說明湘蓮葉內生細菌對植物根長沒有促進作用。

為了研究湘蓮葉內生細菌對植物莖長生長的影響，選取適量發芽何首烏，測定湘蓮葉內生細菌對何首烏莖長生長的作用效果。當加入湘蓮葉內生細菌0.05g后，何首烏的整體莖長生長情況受到影響，莖長生長時間和對照組比較，固定時間內生長效果明顯加快，這一結果能夠說明湘蓮葉內生細菌對植物莖長有促進作用。為了測定不同菌落添加量對于莖長生長的不同影響，加入湘蓮葉內生細菌0.1g，何首烏的整體莖長生長速度與加入0.05g之間沒有明顯變化，說明湘蓮葉內生細菌對植物莖長有促進作用，但并不受添加量的影響。

根據研究結果能夠看出，湘蓮葉內生細菌對何首烏整體根長生長無促進作用，但是對莖長生長有一定的促進作用，且這種促進作用并不受到菌落添加量的影響。

2.2.2 湘蓮葉內生細菌對黃葵根長和莖長的影響作用

為了研究湘蓮葉內生細菌對植物根長生長的影響，選取適量發芽黃葵，測定湘蓮葉內生細菌對黃葵根長生長的作用效果。當加入湘蓮葉內生細菌0.05g后，黃葵的整體根長生長情況并沒有發生改變，這一結果能夠說明湘蓮葉內生細菌對植物根長沒有促進作用。為了排除是否是菌落加入量過少導致作用不明顯的情況，加大菌落用量，加入湘蓮葉內生細菌菌落0.1g，但是黃葵的整體根長生長情況并沒有發生改變，這一結果能夠說明湘蓮葉內生細菌對植物根長沒有促進作用。

為了研究湘蓮葉內生細菌對植物莖長生長的影響，選取適量發芽黃葵，測定湘蓮葉內生細菌對黃葵莖長生長的作用效果。當加入提取出湘蓮葉內生細菌菌落0.05g后，黃葵的整體莖長生長情況受到影響，莖長生長時間和對照組比較，生長明顯加快，這一結果能夠說明湘蓮葉內生細菌對植物莖長有促進作用。為了測定不同菌落添加量對于莖長生長的不同影響，加入湘蓮葉內生細菌菌落0.1g，黃葵的整體莖長生長速度同加入0.05g之間產生明顯變化，這一結果說明湘蓮葉內生細菌對植物莖長有促進作用，而且受到添加量的影響。

根據研究結果能夠看出，湘蓮葉內生細菌的加入對黃葵的整體根生長無促進作用，但是對莖長生長有一定的促進作用，且這種促進作用受到菌落添加量的影響。

2.2.3 小結

綜上，湘蓮葉內生細菌對植株根長沒有促進作用，但是湘蓮葉內生細菌對植株莖長起到不同程度的促進作用。

3 結論

利用長沙地區湘蓮葉內生細菌作為研究對象，對湘蓮葉的內生細菌進行基本分離和初步特性鑒定，研究選用何首烏和黃葵作為試驗植株，測定湘蓮葉內生細菌的特性。通過研究結果可知，湘蓮葉內生細菌能夠對植物的發芽起到一定促進作用，但是不同植株的作用效果存在明顯差異；湘蓮葉內生細菌對植物根長生長難以起到明顯的促進作用；湘蓮葉內生細菌對植物莖長起到一定促進作用，但是不同植株的促進效果存在明顯差異。