重癥手足口病患兒血清NT-proBNP、hs-cTnT、BMEC、S100B、NSE水平變化及意義

周婷，丁嫻，吳宏圖，薛良，王軍

1 徐州醫科大學附屬淮安醫院，江蘇徐州223002；2 徐州醫科大學附屬醫院

在手足口病(HFMD)治療過程中，病毒可浸潤心、腦等重要臟器的組織細胞，導致病情加重、預后不良。因此，臨床上對重癥HFMD的病情評估或臨床預后的預測，能夠為患兒的診療提供重要的參考依據[1, 2]。氨基末端腦鈉肽前體(NT-proBNP)、超敏肌鈣蛋白(hs-cTnT)是反映心肌細胞損傷的指標，星形膠質源性蛋白(S100B)、神經元特異性烯醇化酶(NSE)是反映神經細胞損傷凋亡的指標[3，4]；腦微血管內皮細胞(BMEC)能夠反映腦血管內皮細胞的損傷程度，可用以評估腦血管意外的可能。2016年8月～2018年5月，我們檢測了44例重癥HFMD患兒治療72 h時血清NT-proBNP、hs-cTnT、BMEC、S100B、NSE水平，并分析其與患兒病情及治療結局的關系。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 經徐州醫科大學附屬淮安醫院醫學倫理委員會批準后，選取同期收治HFMD患兒的臨床資料。納入標準：①年齡6個月～3歲；②臨床表現為手、足、口、臀部出現皮疹或皰疹，體溫高于38 ℃；③符合中華醫學會制定的HFMD診斷標準[5]，病毒類型為腸道病毒71型(EV71)；④一直在我院接受治療，未轉院；⑤治療72 h時均行小兒危重病例評分(PCIS)及血清NT-proBNP、hs-cTnT、BMEC、S100B、NSE檢測；⑥本研究符合《赫爾辛基宣言》相關醫學倫理規定，獲得患兒家長的知情同意。排除標準：①伴有其他系統所致的皮膚疾病；②肝腎功能障礙；③合并其他類型的病毒、細菌感染；④先天性疾病或出生缺陷；⑤其他系統的重大疾病。共收集HFMD患兒114例，其中重癥HFMD患兒44例(重癥組)、普通病情患兒70例(對照組)。重癥組男24例、女20例，年齡(18.6±5.9)個月，治療72 h時PCIS為(73.8±5.0)分，經28 d治療達到治愈37例、死亡7例；對照組男43例、女27例，年齡(19.4±7.0)個月，治療72 h時PCIS為(93.5±3.8)分，經28 d治療均達到治愈；兩組患兒的年齡、性別比較，差異無統計學意義(P均>0.05)。

1.2 血清NT-proBNP、hs-cTnT、BMEC、S100B、NSE檢測方法 治療72 h后采外周靜脈血3～5 mL，室溫下放置5～10 min，自然分層后抽取上層清亮液體待測。采用ELISA法檢測S100B、NSE，BioTek酶標儀購自美國伯騰儀器有限公司；采用貝克曼庫爾特UniCel DxI 800化學發光免疫分析儀檢測NT-proBNP、hs-cTnT，EasyBlot ECL化學發光顯色試劑盒購自賽默飛公司；采用磁珠吸附法檢測BMEC，Mini免疫磁珠細胞分選儀購自德國Miltenyi公司。

2 結果

2.1 兩組血清NT-proBNP、hs-cTnT、BMEC、S100B、NSE水平比較 入院治療72 h后，重癥組血清NT-proBNP、hs-cTnT、BMEC、S100B、NSE水平均高于對照組(P均<0.05)。見表1。

表1 兩組血清NT-proBNP、hs-cTnT、BMEC、S100B、NSE比較

注：與對照組比較，P<0.05。

2.2 重癥組不同治療結局患兒血清NT-proBNP、hs-cTnT、BMEC、S100B、NSE水平比較 存活患兒血清NT-proBNP、hs-cTnT、BMEC、S100B、NSE水平均低于死亡患兒(P均<0.05)。見表2。

表2 重癥組不同治療結局患兒血清NT-proBNP、hs-cTnT、BMEC、S100B、NSE水平比較

注：與對照組比較，*P<0.05。

2.3 HFMD患兒血清NT-proBNP、hs-cTnT、BMEC、S100B、NSE水平與PCIS的相關性 相關分析顯示，HFMD患兒血清NT-proBNP、hs-cTnT、BMEC、S100B、NSE水平與PCIS均呈負相關(r分別為-0.774、-0.781、-0.630、-0.695、-0.705，P均<0.05)。

3 討論

HFMD是臨床上較常見的兒童傳染性疾病，病情進展速度較快，累及臟器組織較多，其致殘率維持在較高的水平[6,7]。其中，重癥HFMD患兒臨床預后惡化更顯著，其遠期病死率可超過15%[8]。通過對重癥HFMD患兒臨床預后的預測，能夠在疾病的早期提供臨床治療參考，為免疫球蛋白、抗病毒治療等提供契機。血清學指標具有定量化和動態檢測的優勢，可在心腦血管臟器損傷的病情預測中發揮作用。雖然，心臟超聲或顱腦CT檢查也能評估HFMD臟器損害，但其評估臨床預后的局限性較為明顯，如評估的靈敏度較低、評估的滯后性較為明顯等。本研究對于HFMD患兒血清NT-proBNP、hs-cTnT、BMEC、S100B、NSE的分析，能夠在部分揭露HFMD病情進展機制的同時，為臨床上重癥HFMD患兒的預后提供量化指標。

NT-proBNP是鈉尿肽前體物質，其能夠反映心肌細胞的舒張儲備功能；在心肌細胞順應性下降的過程中，機械性的刺激能夠顯著促進NT-proBNP的釋放[9]。hs-cTnT是心肌酶譜家族成員，其能夠反映心肌細胞膜完整性；在心血管臟器損害的過程中，hs-cTnT的表達可明顯上升[10]。BMEC能夠反映外周血中釋放的腦血管內皮細胞凋亡數量，可以反映腦血管損傷的潛在風險；S100B、NSE是神經細胞凋亡時釋放的糖蛋白，在病毒顆粒浸潤神經細胞的過程中S100B、NSE表達顯著上升[11]。

本研究結果顯示，HFMD重癥組血清NT-proBNP、hs-cTnT、BMEC、S100B、NSE水平均高于對照組，差異有統計學意義，表明HFMD病情加重后NT-proBNP、hs-cTnT、BMEC、S100B、NSE表達水平顯著升高。分析其原因，主要由于HFMD病情加重過程中，體內腸道病毒載量增加，使其能夠透過血腦屏障，最終造成腦組織的損害，導致血清BMEC、S100B、NSE水平升高。重癥HFMD患兒血清NT-proBNP、hs-cTnT上升，主要與EV71對于心肌細胞浸潤和黏附能力的增強有關。有研究也發現，HFMD患兒血清NT-proBNP水平可隨疾病病程延長和病情加重而顯著上升，在心功能下降或心力衰竭的HFMD患兒NT-proBNP可翻倍上升[12～14]。在不同的治療結局患兒中，存活患兒血清NT-proBNP、BMEC、hs-cTnT、S100B、NSE水平低于死亡患兒，差異有統計學意義，表明這些指標的表達異常能夠影響到HFMD患兒的臨床預后。在NT-proBNP、BMEC、hs-cTnT、S100B、NSE水平較高的患兒，其體內病理生理途徑的激活較為顯著，最終促進了多臟器的功能衰竭和患兒死亡的發生。但本研究并未分析NT-proBNP、hs-cTnT、BMEC、S100B、NSE診斷HFMD臨床預后的具體臨界值，在后續研究中可以擴大樣本量進行探討。PCIS是評估患兒病情程度的重要指標。相關分析可見，HFMD患兒血清NT-proBNP、hs-cTnT、BMEC、S100B、NSE水平與PCIS均呈負相關關系，表明這些指標均能夠作為臨床上評估HFMD患兒病情程度的輔助參考依據。而之所以這些指標與PCIS存在負相關關系，主要因其與心腦血管負荷、臟器組織缺血等有關，最終反映HFMD患兒病情的進展[15]。

綜上所述，重癥HFMD患兒血清NT-proBNP、hs-cTnT、BMEC、S100B、NSE水平高于普通HFMD患兒，并且與患兒病情程度或治療結局有一定的關系。這些指標能夠在疾病的早期為臨床治療提供參考，為免疫球蛋白治療、抗病毒治療等提供契機，從而改善HFMD患兒的預后。