替諾福韋酯對乙型肝炎肝硬化患者肝纖維化狀態與Th1/Th2型細胞因子的影響研究

李松 張娟

HBV感染的患者病情進展與肝纖維化、免疫應答失衡息息相關。臨床上單純給予抗病毒藥物干預慢性 HBV 感染，治療效果并不理想，而有效治療干預的對象應包括慢性 HBV 感染狀態下參與病情進展的HBV DNA 高載量、肝纖維化進展和免疫失衡等多種病理過程[1]。抗病毒的核苷酸類似物長時間用藥，HBV病毒易產生耐藥性而使藥物治療效果降低。替諾福韋酯作為一種新核苷酸類似物抗病毒藥物，對耐藥患者的治療有較好療效[2-4]。本研究將探討替諾福韋酯是否可改善HBV感染患者的肝纖維化、Th1/Th2型細胞因子參與的免疫功能，旨在為臨床用藥提供實驗依據。

資料與方法

一、一般資料

選取2015年1月至2018年1月安康市中心醫院收治的150例乙型肝炎肝硬化患者臨床資料進行前瞻性研究。納入標準：①符合《慢性乙型肝炎防治指南(2010年版)》中的診斷標準。②符合 乙型肝炎和肝硬化的西醫診斷標準。排除標準：①合并其他病毒性肝炎以及自身免疫性肝炎、酒精性肝炎、遺傳代謝性肝病、藥物性肝炎等; ②合并其他重大疾病的患者，如癌癥、急性腦卒中、重度心律失常等;③合并精神疾病、心理疾病患者。根據患者入院的先后順序，分為治療組與對照組，每組各75例。其中，治療組75例，男35例，女40例；年齡32～87歲，平均年齡(58.23±10.32)歲。對照組75例，男39例，女36例；年齡31～88歲，平均年齡(59.23±10.98)歲。兩組患者的性別、年齡等一般資料相比差異無統計學意義(P>0.05)。

二、研究方法

(一)治療方法

對照組給予普通護肝治療，具體如下：給予人血白蛋白、肝水解肽、還原型谷胱甘肽、普萘洛爾、安體舒通、呋塞米等常規對癥支持治療。治療組在普通護肝基礎上加用替諾福韋酯治療，口服替諾福韋酯(正大天晴醫藥公司生產)300 mg/d。

(二)檢測方法

治療12周時采血：(1)檢測兩組患者HBV DNA水平，檢測試劑盒購自南京生物建成研究所，采用美國 ABI公司7 500 Real Time PCR System 儀器檢測。(2)檢測兩組患者肝功能指標AST、ALT、總膽紅素(TBil)水平。所有試劑盒均購自南京生物建成研究所，采用ELISA法進行測定。(3)采用放射免疫法檢測肝纖維化指標，包括：Ⅳ型膠原(Ⅳ-C)、層黏連蛋白(LN)、透明質酸(HA)、Ⅲ型前膠原肽(PⅢP)。所有試劑盒均購自南京生物建成研究所。(4)檢測Th1/Th2 細胞因子，包括：干擾素-γ(IFN-γ)、白介素-10(IL-10)、白介素-4(IL-4)、白介素 -2(IL-2)。所有試劑盒均購自南京生物建成研究所，采用ELISA法 進行測定。

三、統計學方法

采用 SPSS 19.0 進行統計學分析，采用t檢驗分析兩組間計量資料的比較。采用χ2檢驗分析兩組間計數資料的比較。

結 果

一、兩組患者HBV DNA水平比較

治療前，兩組患者HBV DNA水平無明顯差別[(6.50±1.35)對(6.51±1.32)lg IU/mL，P>0.05]；治療后，對照組HBV DNA水平較治療前差異無統計學意義，而治療組HBV DNA水平較對照組顯著下降[(2.51±0.32)對(6.21±0.56)lg IU/mL，P<0.05]。

二、兩組患者肝功能指標水平比較

治療后，兩組患者ALT、AST和TBil水平均比治療前降低，且治療組ALT、AST和TBil水平降低幅度比對照組大(P<0.05)。見表 1。

三、兩組患者肝纖維化指標水平比較

治療后，兩組患者Ⅳ-C、LN、HA、PⅢP水平均比治療前降低，且治療組Ⅳ-C、LN、HA、PⅢP水平降低幅度比對照組大(P<0.05)。見表 2。

四、兩組患者Th1/Th2 細胞因子水平比較

治療后，兩組患者IFN-γ、IL-10、IL-4、IL-2水平均比治療前降低，且治療組IFN-γ、IL-10、IL-4、IL-2水平降低幅度比對照組大(P<0.05)。見表3。

討 論

有研究表明[5]，慢性 HBV 攜帶者肝纖維化相關指標HA、Ⅳ -C、P Ⅲ P水平比正常人群升高，當 HBV DNA 載量上升時，上述肝纖維化指標表達亦升高。Th 細胞的兩個主要亞型是Th1、Th2，而Th1參與細胞免疫反應主要是通過分泌 IFN-γ、IL-2發揮作用；Th2參與細胞免疫反應主要是通過分泌IL-10、IL-4發揮作用[6]。正常狀態下，Th1、Th2細胞表達水平處于穩定狀態，但在 HBV 感染后，Th1 細胞大量凋亡，而 Th2 細胞對這種凋亡耐受，結果導致Th1/Th2 細胞失衡，最終引起免疫功能紊亂，削弱了機體清除 HBV病毒的能力。多項研究表明[7-9]，HBV感染的乙型肝炎肝硬化的發生發展與體內Th1/Th2 細胞因子密切相關。

本研究發現，治療后，治療組患者HBV DNA、TBil、AST、ALT水平較對照組顯著下降，表明替諾福韋酯可有效抑制HBV復制，改善肝功能。對于肝纖維化指標，治療后兩組患者HA、LN、PⅢP、IV-C水平均比治療前降低，且治療組上述指標水平降低幅度比對照組大，提示替諾福韋酯可抑制患者肝纖維化狀態。對于Th1/Th2型細胞因子，治療后兩組患者IL-4、IL-10、IFN-γ、IL-2水平均比治療前降低，且治療組上述指標水平降低幅度比對照組大，提示替諾福韋酯對患者具有免疫調節作用。

綜上所述，替諾福韋酯對乙型肝炎肝硬化患者可有效抑制HBV復制，改善肝功能，抑制肝纖維化和調節免疫。本研究的不足之處在于研究的樣本量較少，今后研究中應擴大樣本量，同時更加深入和全面研究其作用的機制。

表1 兩組患者肝功能水平比較(±s)

注：與對照組同時期相比，*P<0.05；與治療前相比，#P<0.05

表2 兩組患者肝纖維化水平比較(±s)

注：與對照組同時期相比，*P<0.05；與治療前相比，#P<0.05

表3 兩組患者Th1/Th2 細胞因子水平比較(±s)

注：與對照組同時期相比，*P<0.05；與治療前相比，#P<0.05