社區和醫院環境對鼻腔耐甲氧西林金黃色葡萄球菌定植影響研究

徐洲，杜陳，金釗，李旺勝，張楚微，王書菲，肖娜，唐一通

摘要：目的：了解社區和醫院兩種不同環境對鼻腔耐甲氧西林金黃色葡萄球菌（MRSA）定植的影響。方法：用鼻拭子法采集108例未進入臨床實習醫學生和99例正進行臨床實習醫學生鼻腔樣本，用金黃色葡萄球菌顯色培養基培養篩查金黃色葡萄球菌，并通過PCR方法檢測SCCmecA基因，進行MRSA的鑒定。比較兩個群體中MRSA攜帶率的差異，分析社區和醫院環境對MRSA在人鼻腔定植的影響。結果：108例未進入臨床實習醫學生共檢出金黃色葡萄球菌（SAU）菌株44例，MRSA菌株8例，MRSA檢出率7%，99例進入臨床實習醫學生共檢出SAU菌株59例，MRSA菌株21例，MRSA檢出率21%。實習組MRSA攜帶率是未實習組的2.86倍，兩種不同環境下造成的MRSA陽性率不同具有統計學意義（χ2=8.171，P<0.05）。結論：社區和醫院兩種不同環境對鼻腔耐甲氧西林金黃色葡萄球菌定植有顯著影響，長期處于醫院環境可使鼻腔MRSA定值率顯著提高。

關鍵詞：耐甲氧西林金黃色葡萄球菌;鼻拭子;社區;醫院

中圖分類號：C915 ? ? 文獻標志碼：A ? ? 文章編號：1674-9324（2020）01-0110-02

金黃色葡萄球菌（SUA）是常見病原菌之一，由于抗菌藥物的大量使用，耐甲氧西林金黃色葡萄球（MRSA）的感染率不斷攀升[1，2]，嚴重威脅到患者的生命安全，成了臨床治療的一大難題[3]。本研究通過采集處于醫院和社區環境中健康醫學生群體鼻拭子樣本，進行金黃色葡萄球菌和MRSA的培養與鑒定，研究不同環境因素對MRSA在人群鼻腔定植的影響。

一、資料與方法

1.樣本采集。收集處于醫院環境（湖北文理學院附屬醫院）的臨床實習生的鼻拭子樣本99例，同時收集未進入臨床的在校生學生鼻拭子樣本108例，以上樣本均為來自不同個體的非重復性樣本，同時選取ATCC25923和ATCC43300作為SAU和MRSA陽性對照菌株。

2.金黃色葡萄球菌分離培養。按試劑盒要求配制金黃色葡萄球菌顯色培養基（CHROMagarTM法國科瑪嘉），對鼻拭子樣本進行SAU的分離培養，37℃，恒溫培養48小時，紅色或粉紅色菌落為金黃色葡萄球菌，并挑出保存。

3.MRSA菌株鑒定。將篩選金黃色葡萄球菌接種至哥倫比亞血瓊脂平板，37℃，恒溫培養24小時。利用Ezup柱式細菌基因組DNA抽取試劑盒（上海生工）提取基因組，通過Taq PCR擴增試劑盒（上海生工）對提取基因組進行SCCmecA基因擴增，進行MRSA菌株的鑒定[4]。擴增引物為：forward：5-TCCAGATTACAACTTCACC-

AGG-3;Reverse：5-CCACTTCATATCTTGTAACG-3。擴增體系為：模板3μl，引物2μl，2×Master mix 10μl，ddH2O 5μl 。擴增條件為：95℃ 4min;95℃ 45 S，45℃ 45S，72℃ 60S;30循環，72℃ 5min。將擴增產物在2%瓊脂糖凝膠電泳檢測中擴增條帶。

4.統計分析。利用SPSS17.0對兩個群體SA和MRSA的檢出率進行統計，分析社區和醫院環境對耐甲氧西林金黃色葡萄球菌（MRSA）對人鼻腔定植的影響。

二、結果

1.菌株分離培養。在金黃色葡萄球菌固體顯色培養基上長出的紅色或粉紅色菌落為SAU，從99例臨床實習組樣本中篩檢出SAU59例，108例未進入臨床組中篩檢出SAU44例。圖1為兩例在顯色培養基上分離培養的SAU菌株。

1：臨床實習組樣本分離SAU菌株;2：未進入臨床組樣本分離SAU菌株。

2.MRSA基因檢測。對分離SAU菌株提取基因組，進行瓊脂糖凝膠電泳檢測，如圖2所示。提取分離SAU菌株基因組，進行SCCmecA基因擴增，瓊脂糖凝膠電泳檢測以鑒定MRSA菌株。未進入臨床實習組44例SAU中檢出MRSA菌株8例，臨床實習組59例SAU中檢出MRSA菌株21例。圖3所示為MRSA菌株SCCmecA基因擴增電泳檢測結果，基因組能擴增出162 bp的目的片段。

3.統計分析。從99例臨床實習組學生樣本中共檢出金黃色葡萄球菌（SAU）59例，檢出率為59.6%;108例未進入臨床組學生樣本共檢出金黃色葡萄球菌（SAU）樣本44例，檢出率為40.7%。臨床實習組SAU陽性率是未進入臨床組樣本的1.463倍，兩組間具有統計學意義（χ2=7.346，P<0.05）。從99例臨床實習組學生樣本中共檢出MRSA 21例，檢出率為21.2%;從108例未進入臨床組學生樣本檢共出MRSA 8例，檢出率為7.4%。臨床實習組MRSA陽性率是未進入臨床組樣本的2.86倍，兩組間具有統計學意義（χ2=8.171，P<0.05）。

三、討論

金黃色葡萄球菌是常見的革蘭陽性菌之一，致病能力強，長期以來對社區和醫院人群造成嚴重感染[5]。由于各種抗菌藥物的廣泛使用，耐甲氧西林金黃色葡萄球菌的感染率也在逐漸升高。金黃色葡萄球菌廣泛存在于人體的黏膜、皮膚和鼻腔等處，易于傳播。已經有研究表明醫院環境更容易使金黃色葡萄球菌定植在人體上。本研究亦表明，相較于社區環境，醫院環境可以明顯提高SAU和MRSA在人鼻腔的定植率。在醫院環境中，病原菌的感染傳播相比于其他社區等環境下更為容易，對于長期生活于醫院環境的人群，如長期住院的病人等，更應加強對其環境衛生的消毒滅菌，盡量減少患者在醫院內受到感染。臨床醫務人員在工作時應加強對感染衛生和手術步驟，消毒隔離的監控。同時，社區衛生環境與醫院衛生環境之間的建設還應得到加強，盡量控制耐藥菌在醫院與社區之間的傳播。

參考文獻：

[1]黃健云，孫紅.耐甲氧西林表皮葡萄球菌感染情況調查及藥敏分析[J].中國社區醫師（醫學專業），2012，16（14）：48-49.

[2]趙紅慶，徐萍，周聲安，胡守奎.耐甲氧西林金黃色葡萄球菌不同來源株耐藥性及流行特征分析[J].疾病監測，2017，7（31）：603-608.

[3]竇學梅，宋巍，高文旃，等.MRSA醫院感染及耐藥性研究[J].中華醫院感染學雜志，2012，22（9）：1943-1945.

[4]Oliveira DC，de Lencastre H.Multiplex PCR strategy for rapid identification of structural types and variants of the mec Elements in methicillin-resistant Staphylococcus aureus.Antimicrob Agents Chemother，2002，46（7）：2155-2161.

[5]韋柳華，周定，程紅革，等.綜合醫院金黃色葡萄球菌的耐藥性分析[J].中華醫院感染學雜志，2012，22（8）：1712-1713.

Effect of Community and Hospital Environment on Colonization of Methicillin-resistant Staphylococcus Aureus in Nasal Cavity

XU Zhou，DU Chen，JIN Zhao，LI Wang-sheng，ZHANG Chuo-wei，WANG Shu-fei，XIAO Na，TANG Yi-tong*

（Hubei University College of Arts and Science Medical College，Xiangyang，Hubei 441053，China）

Abstract：Objective：to investigate the effects of community and hospital environments on （MRSA） colonization of methicillin-resistant Staphylococcus aureus （MRSA） in nasal cavity.Methods：nasal cavity samples were collected from 108 non-clinical medical students and 99 medical students in clinical practice by nasal swab method.Staphylococcus aureus was screened by culture medium of staphylococcus aureus.The SCCmecA gene was detected by PCR and identified by MRSA.The difference of MRSA carrier rate between two populations was compared，and the influence of community and hospital environment on MRSA colonization in human nasal cavity was analyzed.Results：108 cases There were 44 cases of staphylococcus aureus（SAU），8 cases of MRSA，7% of MRSA，and 59 cases of SAU，21 cases of MRSA and 21% of MRSA.The rate of MRSA was 2.86 times higher than that of the untrained group，and the positive rate of MRSA in the two different environments was statistically significant （Sup2 = 8.171，P <0.05）.Conclusion：the two different environments of community and hospital have significant effect on the colonization of methicillin-resistant Staphylococcus aureus in the nasal cavity.The long-term hospital environment can increase the setting rate of MRSA in the nasal cavity.

Key words：methicillin-resistant Staphylococcus aureus;nasal swab;community;hospital