奶牛乳房炎金黃色葡萄球菌的分離鑒定及藥敏試驗研究

錢 坤，張 穎，王 敬，任連泉

（ 1.天津市農業生態環境監測與農產品質量檢測中心 300402； 2.天津市動物疫病預防控制中心 300402）

1 奶牛乳房炎發病率情況

奶牛乳房炎在一定程度上對病畜的產乳量造成影響。 會對奶牛廠造成巨大的經濟損失， 同時也在一定程度上威脅了公共食品衛生安全。 金黃色葡球菌大都呈慢性經過，危害較為嚴重。

相關文獻證實，在上世紀80 年代，對于我國奶牛乳房炎病因和發病情況加以調查，結果證實：金黃色葡球菌所引發的隱性乳房炎以及臨床乳房炎，發病概率分別為17.4%以及18.4%。 在2008 年至2009 年，北京地區一項調查展示出了牛乳房炎發病情況，結果證實：由于金黃色葡球菌所引發的隱性與臨床乳房炎發病概率分別達到了37.8%以及33.3%[1-2]。 由此能夠看出，此類疾病的發生率呈現出了逐年上升的趨勢。 因此有必要使用有效方式，積極鑒定出金黃色葡球菌，進而為疾病的治療作出貢獻。

2 金黃色葡球菌分離以及藥敏試驗具體過程

2.1 制備干燥藥敏片

在此其中包含濾紙片制備以及藥液配制。 則取當前臨床上常用的幾種獸用抗菌制，用藥劑量依照說明書，同時結合各個藥物藥敏紙片純藥物含量水平要求以及抗菌藥物原液內百分比，計算出一份所需要的抗菌藥物原液重量。 在精準測量各類抗菌藥品之后，利用緩沖液與稀釋，將藥物稀釋到所需濃度此后進行含藥物紙片制備。

2.2 收集乳汁樣本

使用有效方法清除所收集樣本內的雜菌。 完成編號之后，放入到冰盒中冷藏保存。 后離心處理，棄去上層油脂以及中層液體，留存底部沉淀物準備檢驗。

2.3 分離乳汁液樣本中病原菌。 詳細內容包含顯微鏡檢查、細菌分離培養細菌、純培養

2.4 細菌生化鑒定

擇取通過純化處理的菌株開展觸酶試驗、 乳膠凝集試驗、甘露醇發酵試驗、藥敏實驗。 觀察具體結果。

3 牛乳房炎乳汁中金黃色葡球菌分離鑒定結果特征

3.1 染色鏡檢特征

通過染色鏡檢可以發現： 菌體呈現為球狀， 直徑規格約在0.5～1.0μm。為葡萄串狀、短鏈狀以及雙球狀排列。不存在莢膜、芽孢。 革蘭染色陽性球菌。 其可疑似為金黃色葡球菌。

3.2 培養特性

營養肉湯質地較為渾濁，在管內存在少量灰白色沉淀物質。輕輕搖晃之后一并消散。 營養瓊脂平板之中配藥實驗樣本，形成圓形，表面光滑度高、濕潤，存在隆起的金黃色菌落菌較大為金黃色。

在血液瓊脂平板之中，菌落較大，為金黃色。 四周存在較為明顯的β 溶血。 而在麥康凱瓊脂平板之上，不存在細菌生長，樣本為葡萄串狀排列，不存在莢膜以及芽孢。

3.3 生化鑒定結果特征

通過觸酶試驗可以發現，受到感染的樣本全部出現氣泡，觸酶試驗結果為陽性[3]。

3.4 乳膠凝集試驗

陽性分離株在2 分鐘之內發生凝集，乳膠凝集試驗為陽性。

3.5 糖發酵試驗

通過糖發酵試驗實驗結果證實：樣本中的海藻糖、果糖、甘露醇、蔗糖、麥芽糖、乳糖、葡萄糖生化反應均為陽性。 而木糖醇、棉子糖、蜜二糖、木糖則為陰性。

4 陽性樣本藥敏試驗結果特征

金黃色葡球菌分離菌株針對于青霉素鈉耐藥率為100%。出現這種現象的原因可能和此類抗菌制劑過度使用存在關聯性。而針對紅霉素、阿莫西林、氨芐西林鈉、土霉素的耐藥率分別為56%、63%、69%、75%。 建議不再使用上述藥物治療，其實對于鹽酸克林霉素、硫酸鏈霉素、硫酸卡那霉素表現為中度敏感，可實現交替用藥。 而針對于硫酸慶大霉素、頭孢噻呋鈉、恩諾沙星以及乳酸環丙沙星敏感性較高。 推薦使用上述抗生素視為奶牛乳房炎病畜的臨床用藥。