重組干擾素α-2b霧化治療小兒毛細支氣管炎的療效及對免疫功能的影響

李文輝，賈彬，劉俊瑩

（河北省兒童醫院 感染消化科，河北 石家莊 050031）

毛細支氣管炎是小兒常見的呼吸系統疾病，主要由呼吸道合胞病毒（respiratory syncytial virus,RSV）所致[1]。該病發病率高，對患兒健康影響較大[2-3]，早期診治可有效預防哮喘發生[4]。目前，小兒毛細支氣管炎尚無法根治，抗感染藥物復發率高。重組人干擾素α-2b 在毛細支氣管炎的治療中具有增強抗感染和調節免疫的作用[5]。本研究擬探討重組干擾素α-2b 霧化治療小兒毛細支氣管炎的療效及對血清免疫球蛋白G（Immunoglobulin G,IgG）、免疫球蛋白A（Immunoglobulin A,IgA）、免疫球蛋白E（Immunoglobulin E,IgE）及免疫球蛋白M（Immunoglobulin M,IgM）的影響。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2016年5月—2017年11月河北省兒童醫院收治的128 例毛細支氣管炎患兒。采用隨機數字表法分為對照組和觀察組，每組64例。對照組男性31例，女性33 例；年齡2～22 個月，平均（6.35±2.25）個月；病程1～12 d，平均（4.33±2.45）d。觀察組男性 32 例，女性32 例；年齡3～25 個月，平均（7.12± 3.23）個月；病程1～15 d，平均（5.41±3.25）d。納入標準：①所有患兒符合第6 版《實用兒科學》中關于毛細支氣管炎的診斷標準[6]；②患兒家屬同意并簽訂知情同意書；③無心臟病、肝腎功能不全、腫瘤等重大疾病史，無藥物食物過敏史。排除標準：①伴有嚴重的血液系統、免疫系統疾病；②使用過免疫調節劑；③合并慢性肝腎疾病、重度蛋白質-能量營養不良及先天性肺疾病；④不配合治療。本研究通過醫院倫理委員會批準。

1.2 方法

兩組患兒給予止咳、祛痰、平喘、抗感染及抗病毒等常規治療。對照組在常規治療基礎上加用0.5 mg 布地奈德混懸液（瑞典阿斯利康制藥有限公司，國藥準字H20140475，2 ml：1 mg）、0.1 ml 異丙托溴銨溶液（法國Laboratoire Unither 公司，批準文號H20150158，250μg：2 ml）霧化治療，2 次/d。觀察組在對照組基礎上霧化吸入1.2 ml 重組人干擾素α-2b 注射液（北京凱因科技股份有限公司提供，批準文號201601018，3 mIU/0.3 ml），2 次/d。兩組患兒均治療7 d。

1.3 觀察指標

①比較兩組患兒的臨床療效；②比較兩組4 個月內RSV 感染復發率；③比較兩組治療前后IgG、IgA、IgE、IgM 及腫瘤壞死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）的水平；④比較兩組治療前后嗜酸性粒細胞陽離子蛋白（eosinophils cationic protein,ECP）及嗜酸性粒細胞（Eosinophils,EOS）水平。

1.4 檢查方法

治療前1 d 及治療后7 d 清晨空腹分別抽取患兒靜脈血5 和3 ml 置于干燥試管，3 000 r/min 離心15 min 分離血清，將置于凍管內的上清液保存于-70℃冰箱。用酶聯免疫吸附試驗檢測TNF-α，試劑盒由南京森貝伽生物科技有限公司提供。采用免疫散射比濁法測定IgG、IgA、IgE 及IgM，儀器為德國西門子公司的BNII 特種蛋白分析儀，抗體試劑、質控品及定標品均為上海西門子醫學診斷產品有限公司提供。用瑞典Phadia ab 公司ImmunoCAP100E 體外過敏原檢測系統，熒光酶聯免疫吸附法測定血清ECP。將2 ml 靜脈血置于上海涵飛醫療器械有限公司生產的EDTA-K2 采血管，日本希森美康公司XS-500i 全自動血液分析儀檢測EOS 計數。

1.5 療效標準

①控制：患兒5 d 內體溫轉歸，肺部濕啰音和喘鳴音、咳嗽及喘息等臨床癥狀基本消失；②顯效：患兒5 d 后體溫有所下降，肺部濕啰音、喘鳴音、咳嗽及喘息等臨床癥狀減輕；③有效：患兒5 d 后體溫有所改善但仍發熱反復，所有臨床癥狀及體征有所減輕；④無效：患兒5 d 后仍出現發熱，肺部濕啰音、喘鳴音、咳嗽及喘息等臨床癥狀無改善或加重。

1.6 統計學方法

數據分析采用SPSS 21.0 統計軟件。計量資料以均數±標準差（±s）表示，比較用t檢驗；計數資料以率（%）表示，比較用χ2檢驗，P＜0.05 為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 一般資料比較

兩組患兒一般資料比較，差異無統計學意義（P＞0.05），具有可比性。見表1。

表1 兩組一般資料比較 （n =64）

2.2 兩組臨床療效比較

兩組患兒控制+顯效合計率的臨床療效比較，經χ2檢驗，差異有統計學意義（χ2=6.325，P=0.026），觀察組控制+顯效合計率的臨床療效優于對照組。見表2。

2.3 兩組治療前后IgG、IgA、IgE、IgM 及TNF-α水平比較

兩組治療前IgG、IgA、IgE、IgM 及TNF-α 水平比較，差異無統計學意義（P＞0.05）。兩組治療后IgG、IgE 及TNF-α 水平比較，差異有統計學意義（P＜0.05）；觀察組治療后IgE、TNF-α 水平低于對照組，而IgG 水平高于對照組。兩組患者治療后IgA、IgM 水平比較，差異無統計學意義（P＞0.05）。見 表3。

2.4 兩組治療前后ECP、EOS 比較

兩組治療前ECP、EOS 比較，差異無統計學意義（P＞0.05）；而治療后ECP、EOS 比較，差異有統計學意義（P＜0.05）。觀察組治療后ECP、EOS 低于對照組（P＜0.05）。見表4。

2.5 兩組4 個月內RSV 感染復發率比較

隨訪4 個月兩組感染復發率比較，觀察組與對照組患兒RSV 感染復發例數分別為2 和10 例。兩組患兒感染復發率比較（3.13% vs 15.63%），經χ2檢驗，差異有統計學意義（χ2=5.885，P=0.015）；觀察組患兒感染復發率低于對照組。

表2 兩組臨床療效比較 （n =64）

表3 兩組患兒治療前后IgG、IgA、IgE、IgM 及TNF-α 水平比較 （n =64，±s）

表3 兩組患兒治療前后IgG、IgA、IgE、IgM 及TNF-α 水平比較 （n =64，±s）

IgG/（g/L） IgA/（g/L） TNF-α/（pg/ml）治療前 治療后 治療前 治療后 治療前 治療后對照組 3.37±1.02 3.87±1.67 0.37±0.08 0.39±0.11 40.74±4.89 27.24±13.49?觀察組 3.51±1.16 6.43±2.54? 0.36±0.12 0.40±0.14 39.75±5.89 18.63±12.86?t 值 0.725 6.737 0.555 0.449 1.035 3.696 P 值 0.470 0.000 0.580 0.654 0.303 0.000組別

續表3

表4 兩組患兒治療前后ECP、EOS 比較 （n =64，±s）

表4 兩組患兒治療前后ECP、EOS 比較 （n =64，±s）

注：?與治療前比較，P ＜0.05。

ECP/（μg/ml） EOS/（×103/mm3）治療前 治療后 治療前 治療后對照組 25.53±11.16 11.72±4.81? 204.82±71.18 177.18±50.08?觀察組 26.73±11.86 7.22±4.48? 210.58±100.25 124.25±40.49?t 值 0.589 5.477 0.375 6.575 P 值 0.557 0.000 0.708 0.000組別

3 討論

毛細支氣管炎發病年齡多見于1～6 個月，發病率高達80%。患兒可見發熱、咳嗽、喘息及呼吸困難等臨床癥狀，如未能及時治療，患兒可出現肺氣腫、心肌損傷甚至造成呼吸衰竭及心力衰竭等嚴重結局[7]。目前，尚未有根治毛細支氣管炎的方法，臨床多采用抗感染藥物、氧療等治療方法，但往往不能達到理想的療效，病情容易反復發作，嚴重影響患兒身心健康和生命安全。解剖學分析發現，嬰幼兒呼吸道黏膜抵抗力薄弱，容易受到各種病原的感染，且嬰幼兒免疫機制不完善造成局部清除能力有限，從而導致感染向下蔓延引起毛細支氣管炎[8-9]。免疫學研究顯示，體液免疫和細胞免疫共同參與小兒毛細支氣管肺炎發病過程[10]。IgG 是血清中免疫球蛋白的主要成分，約75%血清中免疫球蛋白為IgG，新生兒出生后3 個月開始在體內合成，3～5 歲接近成年人水平，在自然免疫中起重要作用。IgG 的缺陷表現為病毒和細菌感染發生率增加，預示免疫應答的功能缺陷，是導致兒童反復呼吸道感染的原因之一[11]。IgA 分血清型和分泌型2 種，可介導吞噬抗體依賴的細胞介導的細胞毒性作用。毛細支氣管肺炎患兒IgA 含量降低，提示患兒失去IgA 等免疫球蛋白及T 淋巴細胞的保護，容易發生感染性疾病[12]。IgE 參與炎癥介質的釋放，并能加重氣道炎癥反應，促進氣道高反應性。TNF-α 主要由單核巨噬細胞產生，亦可經B 細胞應答病毒后產生。其主要結構是多肽鏈，主要位于肝細胞胞質中，能增強多種黏附分子的表達，從而增強炎癥反應和細胞毒作用。但是TNF-α 的細胞毒作用是通過間接引起白細胞介素-6、白細胞介素-8 等細胞因子的高表達 引起[13]。

血清ECP 是一種具有強大細胞毒性及神經毒性的嗜酸性粒細胞經活化釋放的炎癥介質，其可導致呼吸道炎癥，誘發或加重喘息、氣促等癥狀。因此，血清ECP 可為判斷喘息發作的特異性指標之一。相關研究表明，患兒的EOS 濃度受到病毒感染而上升，從而增加血清ECP 合成分泌，進而趨化EOS、T 淋巴細胞及單核細胞而使炎癥反應加劇[14]。糖皮質激素可有效治療毛細支氣管炎，其對炎癥細胞的活化、遷移、生成及炎癥介質的釋放具有抑制作用，同時抑制平滑肌的收縮。重組干擾素α-2b 主要成分是糖蛋白，該活性蛋白由單核細胞和淋巴細胞產生。是病毒進入機體后誘導宿主細胞產生的反應物，局部應用于病變部位，具有促使病變部位及其鄰近細胞抵抗病毒的感染、影響細胞生長、分化和增強免疫功能的作用[15]。本研究結果顯示，觀察組治療總有效率高于對照組，觀察組患兒治療后IgG 升高，提示免疫應答的功能增強；IgE、TNF-α 水平降低，提示患兒機體炎癥反應降低，ECP、EOS 水平下降，且低于對照組，說明重組干擾素α-2b 可抑制嗜酸性粒細胞水平，對抑制支氣管炎復發有效。隨訪4 個月中，觀察組RSV 復發率低于對照組。

毛細支氣管炎主要因RSV 感染引發，病毒一方面對氣道正常組織產生損害；另一方面造成免疫系統穩態失衡，引發變態反應。病毒侵襲時可誘導T 細胞過度起效，抑制細胞因子的形成與發展，阻礙B 細胞形成免疫球蛋白，因此IgA、IgM 及IgG 的含量不斷降低。重組干擾素α-2b 治療毛細支氣管炎的機制分析：①干擾素可阻礙病毒的活動通路，延緩病毒內基因表達及病毒外殼吸附的進程，促進巨噬細胞、自然殺傷細胞（NK 細胞）發揮作用，調節免疫球蛋白的分泌水平，提升IgA、IgM 及IgG 含量；②干擾素可阻礙細胞免疫發揮作用，抑制T 淋巴細胞起效，降低氣道的反應性，降低IgE、TNF-α 含量；③干擾素與布地奈德有協同作用，可聯合阻止炎癥因子的產生，對免疫蛋白水平進行適當改善，提升免疫系統調節能力，促使免疫系統趨于穩態。

綜上所述，重組干擾素α-2b 霧化治療小兒毛細支氣管炎效果良好。可有效降低機體炎癥反應，調節和增加患兒免疫功能，且不易復發，值得臨床推廣使用。