陳美安,林春花,張欣影
(廣西中醫藥大學,廣西 南寧 530001)
蘭香草為馬鞭草科蕕屬植物蘭香草[Caryopterisincana(Thunb.)Miq.]的全草或帶根全草,別名婆絨花、石母草、段菊等[1],在我國主要分布于廣西、廣東、江蘇、安徽、浙江、福建、江西、湖北、湖南等地[2],具有疏風解表,祛寒除濕,散瘀止痛等功效,可用于治療風寒感冒、百日咳、慢性支氣管炎、肝炎、胃腸炎、皮膚瘙癢、胃痛、腹痛、跌打腫痛、風濕痹痛、外傷出血、產后淤血及瘡癤痛腫等,在民間一般作為草藥使用[3-4]。現代藥理研究表明,蘭香草具有抗菌、止血、鎮咳、祛痰等作用[4-6]。目前國內外針對蘭香草的相關研究甚少,而其化學成分也鮮有報道。中藥化學成分的系統預實驗即是采用定性實驗及薄層層析等方法,對中藥中各類化學成分進行比較全面的檢查,然后進行綜合分析,以初步判斷含有的化學成分類型。因此,本文對蘭香草的化學成分進行系統預實驗,以明確其可能含有的化學成分,為蘭香草活性成分的深入研究奠定基礎,并為蘭香草的開發利用提供理論依據。
蘭香草,采自廣西宜州,經廣西中醫藥大學藥用植物教研室的朱意麟實驗師鑒定為馬鞭草科蕕屬植物蘭香草Caryopterisincana(Thunb.) Miq.的干燥全草,陰干,粉碎成粗粉,備用。
95%乙醇(分析純),成都市科隆化學品有限公司;石油醚(分析純,60~90 ℃),成都市科隆化學品有限公司;其余試劑,包括茚三酮試劑、雙縮脲試劑、Molisch試劑、Fehling試劑、氯化鈉明膠試劑、1% FeCl3試劑、溴甲酚綠試劑、鹽酸-鎂粉試劑、三氯化鋁試劑、乙酸鎂試劑、異羥肟酸鐵試劑、耦合試劑、3,5-二硝基苯甲酸實驗、亞硝酰基鐵氰化鈉試劑、堿性苦味酸試劑、碘化鉍鉀試劑、硅鎢酸試劑、碘化汞鉀試劑等均為自制。
AJ150電子分析天平,瑞士梅特勒;HWS-24型電熱恒溫水浴鍋,上海齊欣科學儀器有限公司;UV_1780型紫外分光光度計,島津(蘇州)有限公司;優普純水儀,四川優普超純科技有限公司。
2.1.1 水提取液的制備
取蘭香草藥材粗粉10 g,置于具塞三角錐型瓶中,加水100 mL,冷浸24 h,濾過,取10 mL濾液為冷水提取液,做氨基酸、多肽、蛋白質的檢查。剩余藥渣在60 ℃水浴鍋上加熱 0.5 h,過濾,得熱水提取液,做糖、多糖、苷類、皂苷、鞣質、有機酸等檢查。
2.1.2 乙醇提取液的制備
取蘭香草藥材粗粉10 g,加95%乙醇100 mL,加熱回流 1 h,過濾,濾液分成兩份,一份作為乙醇提取液,做黃酮、蒽醌、酚、香豆素、內酯、萜類、強心苷、甾體等檢查;另一份將乙醇液濃縮至無醇味,加5% HCl溶解,過濾,得酸水溶液,做生物堿檢查。
2.1.3 石油醚提取液的制備
取蘭香草藥材粗粉1 g,置于具塞三角錐形瓶中,加石油醚10 mL,冷浸3 h,過濾,濾液即為石油醚提取液,做油脂、揮發油檢查。
采用化學反應鑒別法對蘭香草藥材進行化學成分預試,結果如表1~表2所示,蘭香草中可能含有氨基酸、糖、多糖、苷類、皂苷、鞣質、有機酸、黃酮類、蒽醌類、酚類、香豆素類、甾體類、三萜類、生物堿、揮發油等化學成分。
2.2.1 蘭香草水提取液預實驗結果

表1 水提取液預實驗結果
注:“ + ”示有此反應;“ -”示無此反應。
2.2.2 蘭香草乙醇提取液預實驗結果

表2 乙醇提取液預實驗結果
續表2

香豆素與內酯異羥肟酸鐵實驗紫紅色+偶合反應紫色+熒光實驗無熒光-強心苷3,5-二硝基苯甲酸實驗無明顯顏色變化-亞硝酰鐵氰化鈉試液無明顯顏色變化-堿性苦味酸實驗無明顯顏色變化-甾體或三萜類醋酐-濃硫酸實驗產生黃→紅→紫→藍→綠→污綠等顏色變化,最后褪色+氯仿-濃硫酸實驗氯仿層呈青色,濃硫酸層顯綠色熒光+生物堿碘化汞鉀試劑淡黃綠色沉淀+碘化鉍鉀試劑淡黃綠色沉淀+硅鎢酸試劑淡黃綠色沉淀+
注:“ + ”示有此反應; “ -”示無此反應。
2.2.3 蘭香草石油醚提取液預實驗結果
油斑實驗:將樣品石油醚提取液滴在濾紙上,濾紙上有油斑,此油斑加熱后消失,提示樣品可能含有揮發油。
中草藥中所含有的化學成分是相當復雜的,本文通過系統性化學成分預實驗,初步確定了蘭香草藥材中可能含有氨基酸、糖、多糖、苷類、皂苷、鞣質、有機酸、黃酮類、蒽醌類、酚類、香豆素類、甾體類、三萜類、生物堿、揮發油等多種化學成分,為蘭香草進一步活性成分的提取、分離、純化以及藥理活性研究提供實驗依據。
本實驗方法簡便、可行,結果可靠。在操作過程中,① 為了減少實驗的誤差,每個鑒別實驗均平行做3份,以確保結果的準確;② 檢測時,樣品溶液的濃度應達到各反應的靈敏度;③ 水提取液和乙醇提取液顏色較深,有些反應現象不明顯,影響到判斷效果,這時可以考慮適當稀釋,或者進一步提純;④ 某些鑒別反應是幾種不同類型的化學成分所共有的反應,又有些結果由于各化學成分之間可能會產生相互干擾使得結果不夠明顯甚至不正確,這時最好同時做空白實驗。