海蒿子多糖的結構組分及生物活性研究

李溢真, 于志洋, 田 欣, 宋 琳, 3

海蒿子多糖的結構組分及生物活性研究

李溢真1, 于志洋1, 田 欣2, 宋 琳2, 3

(1. 青島農業大學 生命科學學院, 山東 青島 266109; 2. 青島科技大學 海洋科學與生物工程學院, 山東 青島 266071; 3. 無窮食品有限公司, 廣東 饒平 515726)

采用水提醇沉法制備海蒿子多糖, 利用紅外光譜法(FT-IR)和PMP柱前衍生化法研究海蒿子多糖的理化特性及糖元組成, 并采用實時熒光定量PCR法和ELISA法, 研究免疫相關因子和細胞凋亡相關因子的mRNA表達。結果表明, 海蒿子多糖總糖含量為24.32%, 硫酸根含量為5.39%, 具有α糖苷鍵。單糖分析表明, 海蒿子多糖主要由半乳糖、巖藻糖、甘露糖組成。進一步體外免疫實驗結果表明, 海蒿子多糖具有促進小鼠巨噬細胞RAW264.7增殖的作用, 能夠提高巨噬細胞系免疫因子IL-1β、IL-6、iNOS和TNF-α的mRNA表達量。此外, 海蒿子多糖還能抑制肺癌細胞A549的增殖, 提高Bax/Bcl-2的比例, 說明其具有抑制腫瘤的效果。ELISA分析表明, 海蒿子粗多糖能顯著提高RAW264.7分泌NO、IL-1β、TNF-α和IL-6細胞因子。因此, 海蒿子多糖不僅具有免疫增強活性, 還具有一定的抗腫瘤活性。

海蒿子; 多糖; 理化性質; 免疫活性

海蒿子()屬于褐藻門(Rhaeo-phyta), 馬尾藻科(Sargassaceae), 馬尾藻屬(),生長于潮間帶的石沼中和大干潮線下1~4米深處的巖石上, 為多年生海藻[1]。

《中藥大辭典》記載, 海蒿子性苦、咸、寒, 入肺、脾、腎經, 具有軟堅、消痰、利水、瀉熱之功效, 可用于治療瘰癘、癭瘤、積聚、水腫、腳氣和睪丸腫痛等病癥[2]。方飛等[3]證實海蒿子多糖對-OH清除率為26%, 對O2–的清除率為80%, 對過氧化脂的抑制率為40%, 具有明顯的抗氧化作用。張華峰等[4]研究表明, 海蒿子活性多糖能明顯降低高血脂小鼠血清中總膽固醇、甘油三酯的含量。劉斌[5]用不同的提取溫度和不同濃度的乙醇醇沉可以獲得性質不同的褐藻糖膠; 通過離子交換和凝膠柱層析技術分離獲得電荷、分子量均單一的褐藻糖膠組分, 并通過MTT法發現多糖對腫瘤細胞A549, P388具有一定的生長抑制作用。郭利民[6]以小鼠乳腺癌tsFT210細胞、小鼠白血病P389細胞和人白血病K562細胞為材料, 采用流式細胞術、細胞增殖抑制實驗及細胞形態學等方法, 對分離得到的14個化合物進行抗腫瘤活性的初步評價, 發現海蒿子具有一定抗腫瘤作用。Cao等[7]研究微波輔助水相兩相萃取用于同時提取和分離海蒿子多糖, 表現出較好的α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶抑制活性, 并且可以顯著改善胰島素抗性模型細胞中的葡萄糖消耗。然而, 關于水提醇沉法獲得海蒿子多糖的免疫活性和抗腫瘤活性的機理報道甚少。本文就海蒿子粗多糖的結構組分、免疫活性和抗腫瘤活性進行研究, 并探討其免疫活性和抗腫瘤活性的機理, 為進一步探究海蒿子粗多糖的生物活性提供一定理論支持。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

海蒿子保存于中國科學院海洋研究所, 肺癌細胞A549、小鼠巨噬細胞 RAW264.7來自中國水產科學院黃海水產研究所。

氯仿、苯酚、濃硫酸、氯化鋇(分析純, 國藥集團化學試劑有限公司), 甘露糖、葡萄醛酸、鼠李糖、半乳糖、木糖、核糖標準品, 葡萄糖標準品、硫酸鉀標準品(美國Sigma 公司)、1-苯基-3甲基-5吡唑啉酮(PMP)、胰蛋白酶、DMEM培養基、RPMI 1640培養基、磷酸緩沖液、二甲基亞砜(北京索萊寶科技有限公司), Gibco胎牛血清(ThermoFisher scientific公司), 甲醇, 乙腈(色譜純, 德國Merck公司), CCK-8試劑盒(尚寶生物科技有限公司), 明膠(天津市北辰方正試劑廠), 一氧化氮(NO)檢測試劑盒(南京建成生物工程研究所), 鼠源IL-1β、TNF-α和IL-6 ELISA試劑盒(上海朗頓科技有限公司)。

1.2 儀器與設備

3 500 Da透析袋(北京索萊寶科技有限公司), 萬能粉碎機(FW100, 天津市泰斯特儀器有限公司), 旋轉蒸發儀(RE-5205, 上海亞榮儀器有限公司), 多管架平衡離心機(TDZ5-WS, 湘儀離心機儀器有限公司), 冷凍干燥機(SCIENTZ-18N, 寧波新芝生物科技有限公司), 電熱恒溫水浴鍋(HH-2, 國華電器有限公司), 傅里葉變換紅外光譜儀(Thermo scientific Nicolet-360, 美國Thermo公司), 酶標儀(iMarkTM BIO-RAD, 美國BIO-RAD公司), 細胞培養箱(Thermo Forma 3110, 美國Thermo公司), 高效液相色譜儀(Shimadzu-20A, 日本島津公司)。

1.3 海蒿子多糖的制備

跟據李俊卿等[8]的方法, 稍作改動。取適量海蒿子進行粉碎, 經過100目篩, 收集待用。量取4 200 mL蒸餾水, 加熱, 保持水溫在90℃左右, 稱量海蒿子粉末200 g, 倒入蒸餾水中, 浸提5 h。將浸提后的混合物離心(2 000 r/min, 15 min), 棄沉淀, 取上清液, 濃縮到原體積的1/3左右, 經截留分子量為3 500 kDa的透析袋進行透析除去小分子物質, 時間為3天。然后濃縮, 醇沉(按照無水乙醇︰多糖溶液體積比 3︰1),4 ℃過夜。次日, 進行離心(4 000 r/min, 20 min), 棄上清, 收集沉淀, 冷凍干燥并收集多糖(SPPS)。

1.4 海蒿子多糖的化學成分測定

1.4.1 總糖含量

總糖含量采用苯酚-硫酸法[9]測定, 以葡萄糖為標準品, 繪制標準曲線。然后配制0.1%海蒿子多糖溶液, 取100 μL于比色管中, 加入蒸餾水至終體積為1 mL。依次加入1 mL 5%苯酚溶液, 5 mL濃硫酸, 靜置30 min后, 測定485 nm處的吸光度。重復三次, 取吸光度平均值, 帶入葡萄糖標準曲線, 測得海蒿子總糖含量。

1.4.2 硫酸根離子含量

以100~110℃烘烤至充分干燥的K2SO4為標準品, 繪制標準曲線, 根據Bah-ramzadeh[10]的方法, 海蒿子多糖酸水解后, 加氨水中和至pH 6~7。脫色并過濾, 定容至25 mL。然后再取被測樣品100 μL, 加入蒸餾水至200 μL, 然后依次加入0.2 mol/L HCl 3.8 mL, 明膠BaCl2溶液1 mL, 30 min后在500 nm處比濁。最后計算SO42–的濃度。

1.5 單糖組成

根據宋琳[11]的方法, 稱取10 mg海蒿子多糖于安瓿瓶中, 加入1 mL水, 1 mL 4 mol/L的三氟乙酸(TFA), 于105~110 ℃水解2~6 h。樣品用NaOH中和至pH 5~6, 并定容至10 mL, 取0.2 mL樣品, 加入0.2 mL核糖作為內標。從中取0.1 mL加入0.12 mL 0.5 mol/L PMP溶液和0.1 mL 0.3 mol/L NaOH溶液, 混勻, 70℃反應60 min。放至室溫后, 加0.1 mL 0.3 mol/L HCl, 中和混勻, 加0.5 mL氯仿萃取, 離心(7 000 r/min, 5 min), 棄去有機層, 重復3次。吸取上清0.1 mL進行HPLC檢測。色譜柱YMC-Pack ODS-AQ(250 mm×4.6 mm, 5 μm), 柱溫25℃, 流速 1.0 mL/min, 檢測波長254 nm, 流動相A︰0.4%三乙胺水溶液︰乙腈=9︰1。流動相B︰0.4%三乙胺水溶液︰乙腈=4︰6。

1.6 FT-IR分析

采用Seedevi[12]的方法, 稱取2 mg左右的海蒿子多糖, KBr壓片, 在紅外光譜波數范圍4 000~400 cm–1下掃描樣品。

1.7 海蒿子多糖對小鼠巨噬細胞RAW 264.7的增殖作用

根據Nie等[13]的實驗方法, 稍加修改。將RAW 264.7細胞以1×105個細胞/孔接種在96孔板中, 并用不同濃度(25, 50, 100, 200, 400 μg/mL)的海蒿子多糖處理, 空白對照則加入等體積的培養基, 在37℃和5% CO2下培養48小時。培養結束后棄上清, 向每個孔中加入混有20 μL CCK-8溶液的完全培養基, 并繼續孵育4小時, 在450 nm下測量吸光度以評估細胞活力。細胞相對存活率計算公式為:

細胞相對存活率 = (A450實驗組/A450對照組)×100%。

1.8 海蒿子粗多糖對巨噬細胞免疫因子mRNA的表達量的影響

根據王昭晶[14]的方法, 并稍作改變。實驗設置空白組, 待細胞培養48 h后, 利用試劑盒提取總RNA, 反轉錄生成cDNA后, 選擇基因IL-1β, IL-6, iNOS及TNF-β, 進行Q-PCR分析, 根據公式2–ΔΔCT計算免疫相關因子的相對表達量。反應中使用的引物和作為內源參照的β-actin基因序列如下:

β-actin: 5′-GCAGAAGGAGATCACTGCCCT-3′和5′-GCTGATCCACATCTGCTGGAA-3′;

IL-1β: 5′-GGGATGATGATGATAACCTG-3′和5′-TTGTCGTTGCTTGGTTCTCCT-3′;

IL-6: 5′-CATGTTCTCTGGGAAATCGTGG-3′和5′-AACGCAACTAGGTTTGCCGAGTA-3′;

iNOS: 5′-GGTCTTCCTGGGCTCGATCTG-3′和5′-GCCGTGGCCAACATGCTACT-3′;

TNF-α: 5′-GATCTCAAAGCAAACCAACTAGTG-3′和5′-CTCCAGCTGGAAGACTCCCAG-3′。

1.9 海蒿子多糖對A549的抑制作用

采用Wang等[15]的實驗方法, 利用CCK-8檢測海蒿子多糖對A549的抑制作用。將A549細胞以2×104個/mL接種在96孔板中, 每孔100 μL。同時用不同濃度(0, 25, 50, 100, 200, 400 μg/mL)的海蒿子多糖處理, 空白對照組則加入等體積培養基, 并將細胞在37℃和5%CO2下孵育48小時, 棄上清, 每孔中加入混有20 μL CCK-8溶液的完全培養基, 孵育4小時。最后, 在450 nm下測量吸光度以評估細胞活力。

1.10 腫瘤凋亡相關基因的表達

根據Wang等[16]的方法, 并稍作修改。選擇基因Bcl-2和Bax用于研究細胞A549細胞的凋亡。待細胞培養48 h后, 使用總RNA提取試劑盒從A549細胞中提取總RNA, 然后進行反轉錄生成cDNA, 設計引物按照SYBR qPCR master Mix 試劑盒上的說明進行熒光定量PCR分析。反應中使用的引物和作為內源參照的β-actin基因序列如下:

β-actin: 5′-GCAGAAGGAGATCACTGCCCT-3′和5′-GCTGATCCACATCTGCTGGAA-3′;

Bax: 5′-GACCCGGTGCCTCAGGATGC-3′和5′-GTCTGTGTCCACGGCGGCAA-3′;

Bcl-2: 5′-ATCCAGGATAACGGAGGC-3′和5′-CAGCCAGGAGAAATCAAAC-3′。

1.11 海蒿子多糖對小鼠巨噬細胞RAW264.7分泌細胞因子的影響

將處于對數生長期的巨噬細胞RAW264.7 (1×105個/mL)接種于12孔板中, 24?h后棄去培養基, 用PBS沖洗巨噬細胞。然后, 加入含有不同濃度(25, 100, 400?μg/ mL)多糖的1?mL完全培養基?？瞻讓φ諡椴患佣嗵堑呐囵B基。培養24?h后, 收集上清液, 用ELISA試劑盒測定上清液中NO、IL-1β、TNF-α和IL-6的濃度。

2 結果與分析

2.1 化學成分及單糖組成分析

通過表1可以看出, 海蒿子多糖中總糖含量為24.32%, 硫酸根含量為5.39%。由單糖組成結果可知海蒿子多糖主要由半乳糖、巖藻糖、甘露糖組成。

表1 海蒿子多糖的化學組成及單糖摩爾比

注: Man: 甘露糖; Rha: 鼠李糖; Gal: 半乳糖; GlcA: 葡萄糖醛酸; Glc: 葡萄糖; xyl: 木糖; Fuc: 巖藻糖; Nd: 未檢出

2.2 紅外光譜(FT-IR)分析

如圖1所示, 4 000~400 cm–1處的幾個吸收峰是多糖的典型特征峰。在3 498.24 cm–1處的峰吸收帶和在2 932.27 cm–1處的弱吸收峰分別是O–H和C–H的拉伸特征峰。在1 614.57 cm–1和1 418.32 cm–1處的兩個特征吸收峰表示C=O的不對稱伸縮振動和對稱伸縮振動, 表明海蒿子多糖中存在羧基。1 255.73 cm–1處的吸收峰為S=O對稱伸縮振動。1 039.92 cm–1的吸收峰歸因于C–O–H變形振動[17]。831.17 cm–1處的吸收峰說明海蒿子多糖具有α糖苷鍵。

2.3 海蒿子多糖對小鼠巨噬細胞RAW264.7相對存活率的影響

利用CCK-8試劑盒檢測不同濃度海蒿子多糖對巨噬細胞RAW264.7增殖的影響。如圖2所示, 海蒿子多糖在25~400 μg/mL濃度范圍內均表現出增殖效果, 與對照組相比, 增殖效果顯著。在濃度為25 μg/mL時, RAW264.7的增殖率較低, 相對存活率為109.82%, 增殖率隨著濃度的增加而增加, 但增加程度并不明顯。在400 μg/ mL時, 增殖率達到最大, 細胞相對存活率為157.57%, 呈劑量依賴關系。

圖1 海蒿子多糖的紅外圖譜

2.4 海蒿子多糖對免疫因子mRNA相對表達的影響

為了研究海蒿子多糖的免疫增強作用, 使用實時熒光定量PCR檢測了不同濃度海蒿子多糖對iNOS, IL-6和IL-1β和TNF-β的mRNA表達的影響。圖3a、b中的結果顯示與對照組相比, IL-1β與IL-6的mRNA表達量均顯著增加, 并呈現劑量依賴性。400 μg/mL海蒿子多糖處理后IL-1β和IL-6的mRNA表達分別是對照組的20.68倍和2.69倍。同樣, 圖3c、d中與對照組相比iNOS、TNF-α的mRNA表達也顯著增加, 呈劑量相關關系, 多糖濃度在100 μg/mL時, iNOS、TNF-α的mRNA的表達量是分別對照組的3.16倍和2.36倍。在濃度200?μg/mL、400 μg/mL時出現mRNA表達量下降的現象, 但是與空白組相比, 依然能促進iNOS、TNF-α的mRNA表達量增加。以上結果表明, 海蒿子多糖能夠促進免疫相關細胞因子mRNA的顯著表達, 海蒿子多糖具有免疫增強活性。

圖2 SPPS對小鼠巨噬細胞RAW264.7的相對存活率的影響

圖3 不同濃度SPPS對IL-1β (a)、IL-6 (b)、iNOS (c)和TNF-α (d) mRNA相對表達量的影響

2.5 海蒿子多糖對A549的抑制作用

為了研究海蒿子多糖對腫瘤細胞A549的抑制作用, 用不同濃度的海蒿子多糖處理A549, 從圖4中可以看出, 海蒿子多糖的濃度在25~400 μg/mL范圍內, 抑制率呈先上升后先下降的趨勢。100 μg/mL時, 海蒿子多糖對A549抑制率達到40.38%。在濃度200?μg/mL時出現了抑制率首次下降的現象, 但是與空白組相比, 依然能抑制肺癌細胞A549的增殖。表明海蒿子粗多糖具有一定的抗腫瘤的效果。

圖4 SPPS對A549細胞的抑制率的影響

2.6 海蒿子多糖對凋亡相關細胞因子mRNA表達的影響

通過實時熒光定量PCR檢測海蒿子多糖對A549細胞中Bax, Bcl-2 mRNA的表達水平的影響。如圖5所示, 海蒿子多糖濃度為25 μg/mL時, Bax/Bcl-2相對mRNA表達量的比值為1.05。海蒿子多糖濃度為100 μg/mL時, Bax/Bcl-2相對mRNA表達量的比值為2.10。海蒿子多糖濃度為400 μg/mL時, Bax/Bcl-2相對mRNA表達量的比值為1.91。海蒿子多糖通過提高Bax/Bcl-2相對mRNA表達量的比例抑制A549細胞的增殖, 且與CCK-8檢測的結果一致。

圖5 SPPS對Bcl-2(a)、Bax(b) mRNA相對表達量的影響

2.7 免疫相關因子的ELISA分析

本實驗利用ELISA檢測海蒿子多糖對RAW264.7產生NO含量的影響, 從圖6中可以看出, 不同濃度的海蒿子多糖刺激RAW264.7產生的NO量不同, 隨著糖濃度的升高, NO的含量也呈遞增趨勢。在400 μg/mL時, RAW264.7產生的NO含量最高為55.46 μmoL/mL, 且顯著高于對照組。說明海蒿子粗多糖能顯著刺激NO的分泌, 調節RAW264.7的免疫活性。

為了研究SPPS的免疫增強作用, 利用ELISA檢測了不同濃度海蒿子多糖對RAW264.7分泌IL-1β(a)、TNF-α(b)和IL-6(c)的含量的影響。圖7a、b、c中的結果顯示與對照組相比, 添加SPPS后IL-1β、TNF-α與IL-6的濃度均顯著增加, 并呈現劑量依賴性。400 μg/mL SPPS處理后IL-1β、TNF-α和IL-6的含量分別達到87.09 ng/L、1 063.15 ng/L和134.71 ng/L。結果表明, 海蒿子多糖具有免疫增強活性。

圖6 SPPS對RAW264.7分泌NO的影響

3 討論

本研究通過傳統的水提醇沉法來制備海蒿子多糖, 通過化學成分分析和單糖組成分析發現海蒿子多糖含有一定量的硫酸基。Bahramzadeh等[17]研究發現, 來自馬尾藻的褐藻糖膠對巨噬細胞的活化能力與硫酸基團有密切的關系。由此推測, 海蒿子多糖的免疫增強活性與其硫酸基有關。單糖組成分析結果表明, 海蒿子多糖中主要為半乳糖, 巖藻糖和甘露糖。先前的研究[18-19]已經證明多糖的生物活性取決于能否有效的與免疫細胞表面受體的結合, 而含有甘露糖的多糖最有可能被免疫細胞表面受體識別, 引發免疫反應。根據紅外光譜分析結果, 海蒿子多糖中存在硫酸鹽基團[20]、α糖苷鍵。糖結構的特征是吡喃糖結構, 同時α糖苷鍵與半乳糖4-硫酸鹽相匹配[21],這與單糖組成分析一致。劉瑋等[22]研究發現具有α-糖苷鍵的姬松茸多糖具有抗炎癥的效果。由此推測, 海蒿子多糖的免疫活性與其含有的硫酸基團以及α糖苷鍵有關。本研究證明, 海蒿子粗多糖具有一定的免疫增強活性效果。

巨噬細胞與中性粒細胞一起, 構成了宿主防御的第一道防線[23]。其中, 巨噬細胞釋放各種炎癥物質和細胞免疫因子, 如NO, IL-1β, TNF-α和IL-6等, 都是宿主免疫過程中抵抗外來和內部微生物、病原體和細胞所必需的[24]。iNOS是NF-κB誘導的關鍵產物[25], 已有研究表明多糖激活巨噬細胞, Toll樣受體(Toll-like receptors, TRL)接受信號, 激活NF-κB中的轉錄因子, 從而使細胞產生一系列的免疫反應[26]。NO是免疫和炎癥調節的中介物, 可以殺死或抑制許多微生物的生長; NO的合成是巨噬細胞非特異性免疫的重要機制, 參與各種生理和病理過程[27]。IL-1β、IL-6、IL-10和TNF-α等發揮機體的免疫功能, 巨噬細胞在先天性免疫中發揮著重要的作用[28]。海蒿子多糖刺激小鼠巨噬細胞RAW264.7, 促進其增殖, 并顯著提高了免疫相關因子IL-1β, IL-6, iNOS和TNF-α的mRNA相對表達量。刺激小鼠巨噬細胞RAW264.7釋放NO和分泌細胞因子等。本實驗結果表明海蒿子多糖具有較好的免疫增強活性, 在提高機體免疫功能上具有一定研究價值。

圖7 SPPS對RAW264.7分泌IL-1β(a)、TNF-α(b)和IL-6(c)的影響

Bcl-2蛋白家族通過凋亡與抗凋亡蛋白之間的相互作用與線粒體凋亡途徑密切相關。Bcl-2位于線粒體外膜上發揮重要作用并防止細胞凋亡。Bax是位于細胞質基質中的促細胞凋亡因子, 當被凋亡信號刺激時, 它在線粒體上被激活, 破壞線粒體膜的完整性并促進細胞凋亡[29]。細胞凋亡激活后Bcl-2與Bax的比例決定了細胞的存活或死亡, Bax表達占優勢時細胞死亡, Bcl-2 表達占優勢時細胞存活[30]。本研究發現海蒿子多糖可以抑制肺癌細胞的增殖, 并提高Bax/Bcl-2的比例, 表明海蒿子多糖可以通過促進腫瘤細胞凋亡達到抗腫瘤的效果, 在抗腫瘤方面具有一定的活性。

本研究通過海蒿子多糖的結構組分分析, 揭示了其單糖組成和糖苷鍵組成; 以及通過海蒿子多糖對RAW264.7的影響, 表明海蒿子多糖不僅能刺激巨噬細胞, 使TNF-α, iNOS, IL-6和IL-1β的mRNA表達增強, 刺激小鼠巨噬細胞RAW264.7釋放NO和分泌細胞因子等。起到良好的免疫增強作用; 還能抑制腫瘤細胞的增殖, 具有一定的抗腫瘤效果。

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Physicochemical properties and immunomodulatory activities of crude polysaccharides isolated from

LI Yi-zhen1, YU Zhi-yang1, TIAN Xin2, SONG Lin2, 3

(1. College of Life Sciences, Qingdao Agricultural University, Qingdao 266109, China; 2. College of Marine Science and Biological Engineering, Qingdao University of Science and Technology, Qingdao 266071, China; 3. Wuqiong food Co., Ltd, Raoping 515726, China)

polysaccharides (SPPS), a group of natural polysaccharides, were isolated fromthrough water extraction and alcohol precipitation. Infrared spectroscopy (FT-IR) and 1-phenyl-3-methyl-5-pyrazolone (PMP) pre-column derivatization were employed to study the physical and chemical properties, as well as the monosaccharide composition of SPPS. Quantitative real-time Polymerase Chain Reaction (qRT-PCR) and enzyme linked immunosorbent assay (ELISA) techniques were employed to study the mRNA expression of immune-related and apoptosis-related factors. The total sugar content of SPPS was 24.32%, while the sulfate content was 5.39%. The FT-IR spectra analysis indicated that SPPS contain sulfuric acid groups and has α-glycosidic bonds. In regard to the monosaccharide composition, the most abundant components in SPPS were galactose, fucose, and mannose. Bioassays indicated that SPPS significantly enhance the proliferation of RAW264.7 macrophage cells and also stimulate the corresponding mRNA expression of iNOS and interleukins (IL-6, IL-1β, and TNF-α) in a dose-dependent manner. In addition, SPPS effectively suppressed the proliferation of A549 cells and increase the ratio of Bax/Bcl-2, indicating its anti-proliferative activity against A549 cells. The ELISA analysis revealed that the crude SPPS significantly increased the production of NO, IL-1β, TNF-α, and IL-6 cytokines in RAW264.7 cells. These results indicate that SPPS demonstrated both immunomodulatory and anti-tumor activities.

; polysaccharides; physicochemical properties; immunomodulatory activity

Apr. 18, 2020

R932

A

1000-3096(2020)11-0010-09

10.11759/hykx20200418002

2020-04-18;

2020-04-29

山東省自然基金(ZR201702170401); 青島科技大學2019年創新訓練計劃項目(201910426018)

[Natural Foundation of Shandong Province, No. ZR201702170401; 2019 The Innovative Entrepreneurial Training Plan Program of Qingdao University of Science & Technology, No. 201910426018]

李溢真(1991-), 女, 漢族, 山東濟南人, 碩士研究生, 研究方向為海洋活性物質, E-mail: lyzliyizhen@163.com; 宋琳(1987-),通信作者, 女, 漢族, 山東青島人, E-mail: lylinsong@hotmail.com

(本文編輯: 楊 悅)