氟啶蟲酰胺對家蠶的毒性測定＊

陳偉國，楊一平，林蔚紅，孫海燕，錢秋杰，張 芬

（海寧市蠶桑技術(shù)服務(wù)站，浙江 海寧 314400）

氟啶蟲酰胺（flonicamid）是日本石原產(chǎn)業(yè)開發(fā)的新型吡啶酰胺類殺蟲劑，具有觸殺和胃毒作用，以及良好的內(nèi)吸和滲透作用，殺蟲機理新穎，對蚜蟲等刺吸式口器害蟲具有快速拒食活性和很好的神經(jīng)毒性，害蟲攝入藥劑后很快停止吮吸，最后饑餓而死，可防治蚜蟲、粉虱、薊馬、葉蟬、飛虱、木虱、介殼蟲等。氟啶蟲酰胺對天敵昆蟲、訪花昆蟲較安全，對水生動植物無影響，100 mg/L對蠶無影響［1～4］。氟啶蟲酰胺在我國登記在水稻、黃瓜、甘藍(lán)、馬鈴薯、蘋果等作物防治稻飛虱、蚜蟲［5］，使用濃度在100 mg/L左右［6～7］，浙江省從 2017 年新增推薦氟啶蟲酰胺用于防治果蔬類溫室煙粉虱、蚜蟲［8］。但氟啶蟲酰胺對非靶標(biāo)昆蟲家蠶的毒性未見相關(guān)研究報道，本試驗測定了氟啶蟲酰胺對家蠶的急性食下毒性和在桑葉上的殘留毒性，為該藥的安全使用提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

1.1.1 試驗農(nóng)藥

10%氟啶蟲酰胺水分散粒劑（日本石原產(chǎn)業(yè)株式會社生產(chǎn)），農(nóng)藥登記證號PD20110324。

1.1.2 供試桑園

海寧市蠶桑站試驗桑園，8年生“農(nóng)桑14號”，中低桿養(yǎng)成，每667 m2桑園栽1000株。

1.1.3 供試家蠶

“白玉×秋豐”，由浙江省海寧市新興蠶種制造有限公司生產(chǎn)。

1.2 試驗方法

1.2.1 氟啶蟲酰胺對家蠶的急性食下毒性測定

在預(yù)備試驗基礎(chǔ)上，將10%氟啶蟲酰胺水分散粒劑稀釋成5～7個梯度濃度，取適熟桑葉分別浸入不同濃度的藥液中1 min，取出后自然晾干，置于保鮮盒內(nèi)，然后給入20頭3齡起蠶，在溫度26.5℃±1℃、相對濕度75%～85%的恒溫室內(nèi)飼喂藥葉，飼喂毒葉24 h后改用新鮮無毒桑葉繼續(xù)飼養(yǎng)至4齡餉食，每天調(diào)查家蠶幼蟲中毒死亡數(shù)，以清水處理為空白對照，重復(fù)3次。采用DPS統(tǒng)計軟件對藥液質(zhì)量濃度對數(shù)與幼蟲死亡率概率值進(jìn)行線性回歸分析［9］，求出致死中濃度（LC50）和95%置信限。

1.2.2 氟啶蟲酰胺在桑葉上的內(nèi)吸傳導(dǎo)毒性和殘毒期測定

（1）將10%氟啶蟲酰胺水分散粒劑稀釋成500倍、1000倍和2000倍液（即氟啶蟲酰胺200、100、50 mg/L）3種不同濃度的藥液備用。

（2）3種濃度處理各選定10株桑樹，在枝條頂端最大葉位處做好標(biāo)記，防止采摘未噴到藥液的新生桑葉；每株供試桑樹各選取1～2根枝條，上半部分套上透明塑料袋臨時密封，將上述3種濃度藥液分別均勻噴灑于供試桑樹的桑葉正反葉面，不同處理間隔2行桑樹作保護(hù)行。待藥液干后撕開套在枝條上的塑料袋頂部并做好固定，防止未噴藥處理的桑葉受污染。

（3）噴藥后每隔1 d采摘供試桑葉喂飼3齡起蠶，直至不再出現(xiàn)中毒癥狀和死亡蠶后結(jié)束。飼養(yǎng)處理分別為500倍、1000倍和2000倍藥液噴灑的桑葉，以及枝條上部套在塑料袋內(nèi)未直接噴藥處理的桑葉，以新鮮無毒桑葉為空白對照，共7個處理，每處理30頭3齡起蠶，重復(fù)3次，共計21個飼養(yǎng)小區(qū)，飼養(yǎng)至4齡起蠶結(jié)束，逐日調(diào)查記載各處理區(qū)中毒死亡蠶頭數(shù)，計算中毒死亡率。

在殘毒試驗飼養(yǎng)采葉時考查各濃度藥液處理對桑葉的藥害情況。

1.2.3 氟啶蟲酰胺對家蠶的中毒癥狀觀察

將10%氟啶蟲酰胺水分散粒劑稀釋成1000倍（100 mg/L）藥液，桑葉在藥液中浸漬約1 min后取出，晾干后飼喂3齡起蠶，定時觀察記錄供試蠶的中毒癥狀。

2 結(jié)果與分析

2.1 氟啶蟲酰胺對家蠶的急性食下毒性

采用浸葉法測定10%氟啶蟲酰胺水分散粒劑對3齡起蠶的急性食下毒性，添毒24 h的毒力回歸方程為Y=-1.9272+6.8639X，相關(guān)系數(shù)r=0.9914，LC50為10.2146 mg/L，95%置信限為9.6972～10.9091 mg/L。參照2014年發(fā)布的《化學(xué)農(nóng)藥環(huán)境安全評價試驗準(zhǔn)則第11部分：家蠶急性毒性試驗》附錄A“農(nóng)藥對家蠶的毒性等級劃分”［10］，10%氟啶蟲酰胺水分散粒劑對家的毒性等級為高毒（0.5＜LC50≤20 mg/L）。

2.2 氟啶蟲酰胺在桑葉上的內(nèi)吸傳導(dǎo)毒性和殘毒期

從表1可見，10%氟啶蟲酰胺水分散粒劑500倍（200 mg/L）稀釋藥液噴于桑樹枝葉，噴藥后3 d采摘藥液處理桑葉飼喂3齡起蠶，死亡率100%，噴藥后5 d的死亡率迅速下降到10.00%，噴藥后9 d不再出現(xiàn)中毒癥狀和死亡蠶；10%氟啶蟲酰胺水分散粒劑1000倍（100 mg/L）稀釋藥液噴于桑樹枝葉，噴藥后1 d采摘藥液處理桑葉飼喂3齡起蠶，死亡率100%，噴藥后3 d的桑葉喂蠶死亡率下降到60.00%，噴藥后7 d不再出現(xiàn)中毒死亡蠶；10%氟啶蟲酰胺水分散粒劑2000倍（50 mg/L）稀釋藥液噴于桑樹枝葉，噴藥后1 d的桑葉喂蠶死亡率為90%，噴藥后3 d不再出現(xiàn)中毒死亡蠶。采摘枝條上部未直接噴藥處理的桑葉飼喂3齡起蠶，10%氟啶蟲酰胺水分散粒劑500倍（200 mg/L）處理區(qū)的噴藥后1 d死亡率為10.00%，3 d和5 d的死亡率為4.44%，7 d后不再出現(xiàn)中毒死亡蠶；10%氟啶蟲酰胺水分散粒劑1000倍（100 mg/L）和2000倍（50 mg/L）處理區(qū)均無中毒癥狀和死亡蠶。試驗結(jié)果表明，10%氟啶蟲酰胺水分散粒劑藥液在桑葉上的殘留毒性降解較快，高濃度藥液噴于桑葉后有一定的向上傳導(dǎo)毒性，但其作用較弱。

表1 10%氟啶蟲酰胺水分散粒劑在桑葉上的殘留毒性和內(nèi)吸毒性測定結(jié)果Table 1 Determination of Residual Toxicity and Systemic Toxicity of 10%Flonicamid Water Dispersible Granule on Mulberry Leaves

2.3 氟啶蟲酰胺對桑樹的藥害

殘毒試驗噴藥后1 d、3 d、5 d和7 d采摘供試桑葉時，分別觀察不同濃度藥液處理區(qū)桑葉的生長情況，均未見異常癥狀，表明10%氟啶蟲酰胺水分散粒劑500倍（200 mg/L）、1000倍（100 mg/L）和2000倍（50 mg/L）3種稀釋濃度對桑樹葉片未產(chǎn)生藥害。

2.4 氟啶蟲酰胺對家蠶的中毒癥狀

10%氟啶蟲酰胺水分散粒劑按常規(guī)使用濃度1000倍（100 mg/L）稀釋藥液處理的桑葉飼喂3齡起蠶，約6 h后食桑減緩；12 h左右部分個體停止食桑，靜伏或側(cè)倒；約24 h后多數(shù)側(cè)倒，體軀伸長，蠶體較軟；48 h左右陸續(xù)死亡。家蠶中毒過程未見胸部膨大、搖頭、吐液、狂燥爬動等癥狀，毒性作用表現(xiàn)較慢。

3 小結(jié)與討論

3.1 氟啶蟲酰胺對家蠶的毒性

10%氟啶蟲酰胺水分散粒劑對3齡起蠶添毒24 h的急性食下毒性（LC50）10.2146 mg/L。10%氟啶蟲酰胺水分散粒劑500倍（200 mg/L）、1000倍（100 mg/L）和2000倍（50 mg/L）液噴灑桑葉，分別在噴藥后9 d、7 d和3 d采摘桑葉連續(xù)喂飼3齡起蠶1個齡期不再表現(xiàn)出中毒癥狀和死亡蠶。10%氟啶蟲酰胺水分散粒劑500倍（200 mg/L）液噴灑桑葉后，枝條上部未噴藥處理的桑葉對3齡起蠶有輕微的毒性。試驗結(jié)果表明，10%氟啶蟲酰胺水分散粒劑對家蠶的毒性等級為高毒，在桑葉上的毒性殘留時間較短，桑葉上的傳導(dǎo)毒性較弱。

氟啶蟲酰胺對螨、雙翅目、鞘翅目和鱗翅目害蟲沒有活性，對咀嚼式口器害蟲沒有毒力，是典型的選擇性殺蟲劑，在推薦劑量下使用，對有益節(jié)肢動物如家蠶、蜜蜂、瓢蟲等無不良影響［11～12］。但本試驗對家蠶毒性測定結(jié)果并不一致，可能因氟啶蟲酰胺的致毒特點以及測定方法不同所致，有關(guān)氟啶蟲酰胺的毒理學(xué)研究幾乎都是針對刺吸式口器昆蟲，也有人推測氟啶蟲酰胺是一種前藥，經(jīng)代謝轉(zhuǎn)化為活性藥物后而起作用［11］，因此對非靶標(biāo)昆蟲如家蠶的毒性可能存在不同途徑。家蠶攝入氟啶蟲酰胺后主要表現(xiàn)為拒食、靜伏或側(cè)倒、體軀伸長、蠶體較軟，其中毒反應(yīng)較為遲緩，死亡時間較長。

3.2 氟啶蟲酰胺防治桑樹害蟲的可能性

氟啶蟲酰胺的殺蟲機理新穎，與目前市售的其他殺蟲劑無交互抗性，刺吸式口器害蟲取食帶有氟啶蟲酰胺的植物汁液后，迅速停止取食，且拒食作用具有不可恢復(fù)性，被阻止吸汁的害蟲最終因饑餓而死亡。氟啶蟲酰胺對害蟲口針的阻塞作用類似于吡蚜酮，但與吡蚜酮的作用機理存在差異，氟啶蟲酰胺對害蟲還具有神經(jīng)毒性。從化學(xué)結(jié)構(gòu)和作物防治譜來看，氟啶蟲酰胺與氟啶蟲胺腈都有太多相似之處［12］。鄧明學(xué)等［13］報道了氟啶蟲酰胺對柑橘粉虱的田間防效優(yōu)于啶蟲脒。而吡蚜酮和氟啶蟲胺腈均對桑薊馬、桑粉虱有良好的防效［14～15］，因此，推測氟啶蟲酰胺有望成為防治桑粉虱、桑薊馬等桑樹微型害蟲的新穎殺蟲劑，而且氟啶蟲酰胺在桑葉上的殘毒期較短更是一大優(yōu)勢。鑒于氟啶蟲酰胺對害蟲的速效性較差，可與烯啶蟲胺等速效性較好的殺蟲劑混配使用加以彌補［16～17］。當(dāng)然，氟啶蟲酰胺用于桑樹害蟲防治，尚須對其田間防效以及對家蠶的經(jīng)濟(jì)性狀等方面進(jìn)一步深入試驗。