西寧地區健康成人網織紅細胞血紅蛋白含量參考區間的建立與驗證*

韓啟福,彭 海,李子安,阿祥仁

(青海省人民醫院醫學檢驗科,青海西寧 810007)

隨著血液分析儀的發展進步,一些新的檢測參數也開始接受臨床實踐的驗證并開始應用于臨床,顯示其獨特的臨床意義。網織紅細胞中血紅蛋白含量(Ret-He)是指Ret胞漿中所含的血紅蛋白量,其含量與機體內貯存鐵的數量密切相關。反映體內鐵蛋白代謝的最新狀態,可用于缺鐵性貧血及鐵利用障礙等慢性功能性貧血的診斷和鑒別診斷[1-3]。檢驗項目的參考區間是臨床醫生對疾病診斷的重要標準,實驗室給臨床提供的參考區間若不合理,必將導致誤診誤治。Ret-He雖然已經廣泛應用于臨床,但大多實驗室引用的參考區間為儀器廠家說明書中提供的,本實驗室在進行參考區間驗證時沒有通過驗證,臨床科室也對本實驗室新增參數的參考區間提出了質疑,為此研究決定對Ret-He項目本實驗室應建立適用于本實驗室健康成年人的參考區間。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2017年6月至2018年12月本院體檢健康者1 742例,男980例,女762例,年齡10～80歲,平均年齡41.67歲。引用中華人民共和國衛生行業標準WS/T402-2012《臨床實驗室檢驗項目參考區間的制定》的要求,建立參考個體篩選標準:(1)出生于西寧市,并生活在西寧周邊,民族為漢族；(2)近1個月內無獻血或未做鐵劑和輸血治療；(3)近1個月未使用甾體類抗炎和抗菌藥物；(4)無吸煙無酗酒；(5)無貧血和血紅蛋白疾病史；(6)女性應避開生理周期；(7)近期未進行外科手術。符合參考個體篩選標準的人群納入研究對象。

1.2方法

1.2.1儀器 采用日本Sysmex公司生產的XN-20[A1]血液分析儀進行測定,所用試劑、質控品、校準品均為原裝配套,儀器按相關規定要求每6個月校準一次,每日做室內質控且質控結果均在控,儀器的操作均按照操作手冊進行。

1.2.2方法 向體檢健康者說明實驗目的并獲得同意后,簽署知情同意書,同時填寫參考個體調查問診表。采集EDTA抗凝全血標本2～4 mL,輕輕顛倒混勻5～8次。在2 h內用Sysmex XN-20[A1]血液分析儀的CBC+DIFF+RET通道進行檢測,收集整理數據。再按實驗室篩查標準:(1)為肝腎功能正常；(2)血尿常規正常；(3)大便潛血陰性；(4)查體無肝、脾腫大；(5)B超檢查未見異常；(6)血清鐵及鐵蛋白均正常；(7)血紅蛋白在正常范圍[4](男性:138～183 g/L,女性:119～157 g/L)。去除參考值以外的數據,將剩余數據分為男女兩組,剔除離群值按性別、年齡(每10歲為一個年齡段)分組用SPSS22.0統計軟件進行描述和分析,建立Ret-He的參考區間。

2 結 果

2.1Ret-He整體分布 符合標準的參考個體數量為1 501例,其中男813例,占54.16%,平均(42.96±12.32)歲；女688例,占45.84%,平均(38.64±12.04)歲；經Kolmogorov-Smirnov正態性檢驗,平均數為33.209 pg,中位數為33.30 pg,眾數為32.5 pg,偏斜度=-0.707,峰度=1.8,平均數大于眾數,本組數據Ret-He呈左偏近似正態分布,見圖1。

2.2Ret-He在不同性別組的結果 男性Ret-He為(33.71±2.12)pg、中位數為33.7 pg,女性Ret-He為(32.62±2.68)pg、中位數為32.6 pg,男性略高于女性。經獨立樣本t檢驗,F=18.407,t=8.612,P=0.000,組間差異有統計學意義(P<0.05),見圖2；因此,應將男女分組。

圖1 1 501例參考個體的Ret-He頻數分布

圖2 Ret-He在不同性別組的結果

2.3Ret-He在不同性別和年齡組的結果 相同性別不同年齡組的均數經非參數多個獨立樣本Kruskal-Wallis,男(P=0.223)、女(P=0.044),男性不同年齡組間差異均無統計學意義,女性不同年齡組間差異有統計學意義,不同性別相同年齡組的平均數經單因素方差分析間差異均有統計學意義(P<0.05),見表1。

表1 不同性別、年齡組的Ret-He水平

2.5參考區間驗證 選擇2019年1月5-7日健康體檢者血常規樣本男20例、女20例,按照衛生行業標準要求對所建立的Ret-He參考區間進行驗證,其檢測結果90%以上在建立的參考區間范圍內,驗證結果符合相關規定的要求。

3 討 論

健康人Ret-He在Ret的整個生命周期中是恒定的,Ret-He是網織紅細胞胞漿中所含的血紅蛋白量,反映體內鐵蛋白代謝的最新狀態。Ret-He是診斷鐵缺乏的新指標,在臨床的應用不斷增加。而不同地區人群由于地理環境、生活方式等差異而導致機體內鐵的含量不同,從而導致不同地區人群Ret-He正常含量有所差異。西寧地區健康人群Ret-He大樣本參考區間研究未見報道。本次研究結果為Ret-He呈左偏近似正態分布,Ret-He在不同性別組的結果男性Ret-He為(33.71±2.12)pg,女性Ret-He為(32.62±2.68)pg,男性略高于女性；經獨立樣本t檢,F=18.407,t=8.612,P=0.000,說明組間差異有統計學意義(P<0.05)。同性別各年齡組的均數經非參數多個獨立樣本Kruskal-Wallis檢驗,男(P=0.223)、女(P=0.044),男性各年齡組間差異均無統計學意義,女性各年齡組間差異有統計學意義,不同性別相同年齡組的平均數經單因素方差分析間差異均有統計學意義；主要是21～40歲不同性別組之間有差異,40～60歲不同性別組之間差異無統計學意義(P>0.05),這可能是由于這一年齡段內女性體內的雌激素水平有關,還有待研究。廠家提供的Ret-He參考區間為(27.00～32.60)pg未按性別分組,本文建立的西寧地區健康成人Ret-He參考區間男性(29.55～37.87)pg,女性Ret-He參考區間為(27.37～37.81)pg。與廠家說明書提供的參考區間相比明顯偏高,唐玉鳳[5]等研究的北京地區成人Ret-He參考區間為男性(29.25～33.83)pg,女性(26.52～30.04)pg,趙麗娟等[6]研究的長春地區成人Ret-He參考區間為男性(30.20～36.00)pg,女性(29.10～35.40)pg低于本地區,歸因于西寧地處西北高原,海拔2 170 m,含氧稀薄,外周血中紅細胞數和血紅蛋白量代償性增加。羅小娟等[7]和石宇等[8]研究未成年人群和老年人群的參考區間也均不相同,章曉燕等[9]研究不同儀器的參考區間也有所不同。

因此,Ret-He的參考區間因為地區、民族、性別、年齡、儀器等眾多因素影響而不同,不同地區各實驗室應根據本地區人群建立適合自己實驗室的正常參考區間,幫助臨床診斷貧血性疾病有著重要意義。本次參考區間調查只針對于西寧地區健康成人,兒童、孕婦或老年人參考區間還需進一步研究。