吡拉西坦分散片設(shè)備驗(yàn)證的分析方法建立

魏巍 劉宇（東北制藥集團(tuán)沈陽(yáng)第一制藥有限公司，遼寧 沈陽(yáng)110027）

建立行之有效的設(shè)備殘留檢測(cè)的分析方法，非常重要。紫外法一般采用吸光度法，靈敏度不高，適用范圍窄［1］，高效液相法的定量檢測(cè)則靈敏度較高，適用于大多數(shù)化學(xué)類制劑產(chǎn)品。

1 儀器

日本島津高效液相色譜儀（SPD-20A型紫外可見(jiàn)檢測(cè)器）

分析天平：Sartorius 公司，型號(hào)：ME235S（量程230 g，可讀性：0.01 mg）

數(shù)顯恒溫水浴鍋：國(guó)華電器有限公司，型號(hào)：HH-4

紫外儀：北京市六一儀器廠，型號(hào)：WD-9403B

2 試劑試藥及對(duì)照品

吡拉西坦對(duì)照品（來(lái)源：中國(guó)食品藥品檢定研究院，批號(hào)：100386-200706，含量：100%）

吡拉西坦（來(lái)源：東北制藥集團(tuán)股份有限公司，批號(hào)：0301308046，含量：99.84%）

30%過(guò)氧化氫、氫氧化鈉（分析純）、鹽酸（分析純）：國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司

甲醇（色譜純）：賽默飛世爾科技（中國(guó)）有限公司

3 方法建立［2］

3.1色譜條件

流動(dòng)相：以甲醇-水（10：90）為流動(dòng)相；色譜柱：安捷倫品牌

TC-C18 4.6×250mm；

檢測(cè)波長(zhǎng)：210nm；流速：1.0ml/min；進(jìn)樣體積：10μl；柱溫：30℃；理論板數(shù)按吡拉西坦峰計(jì)算不低于2000。

3.2專屬性——光照、高溫、氧化、酸堿破壞試驗(yàn)

稱取吡拉西坦原料約0.03g，置100ml 量瓶中，加入空白輔料，加水溶解，分別在紫外燈下放置2小時(shí)、在60℃水浴中放置2小時(shí)、加0.3%過(guò)氧化氫溶液10ml 放置2 小時(shí)、加1.0mol/L 鹽酸溶液10.0ml放置2小時(shí)、加1.0mol/L氫氧化鈉溶液10.0ml放置2小時(shí)，用水至刻度，混勻后過(guò)濾處理。空白輔料同法操作，空白輔料和雜質(zhì)均不干擾對(duì)本品的檢測(cè)。

3.3 回收率

分別稱取吡拉西坦原料12mg，15mg，18mg，每個(gè)稱樣量3份，分別置50ml 量瓶中，配以空白輔料，加水溶解并稀釋至刻度，混勻，濾過(guò)。精密量取續(xù)濾液5ml，置50ml容量瓶中，加水稀釋至刻度，混勻，作為原液。分別取原液1ml均勻的注到已準(zhǔn)備好的304L不銹鋼板上，風(fēng)干后，進(jìn)行擦拭取樣，將取樣后的棉簽剪斷，分別溶于20ml水中，超聲溶解，放至室溫，濾過(guò)，作為被測(cè)溶液；精密稱取吡拉西坦對(duì)照品約0.015g，置100ml 量瓶中，加水溶解至刻度，混勻，精密量取1ml，置100ml量瓶中，加水至刻度，混勻作為對(duì)照品溶液。進(jìn)樣后按外標(biāo)法計(jì)算回收率，9個(gè)回收率的數(shù)據(jù)均大于50%。滿足回收率應(yīng)≥50%的限度要求，準(zhǔn)確度良好。

3.4 線性

稱取吡拉西坦對(duì)照品約0.015g，精密稱定，置500ml 量瓶中，加水溶解至刻度，混勻，作為母液，分別從儲(chǔ)備液中取出體積制成最終濃度0.9ppm、1.2ppm、1.50ppm、1.80ppm、2.10ppm的樣品溶液，以樣品的濃度為橫坐標(biāo)，樣品的峰面積為縱坐標(biāo)繪制所需的曲線方程。吡拉西坦分散片樣品在濃度0.92ppm 到2.15ppm 范圍內(nèi)與峰面積呈良好的線性關(guān)系，且相關(guān)系數(shù)為0.9992 ＞0.99。吡拉西坦在低濃度下也可準(zhǔn)確的定量檢出。

3.5 系統(tǒng)重復(fù)性

稱取吡拉西坦對(duì)照品約0.015g精密稱定，置100ml量瓶中，加水溶解至刻度，混勻，精密量取1ml，置100ml量瓶中，加水稀釋至刻度，混勻，在上述色譜條件下，連續(xù)進(jìn)樣5次，峰面積變化的RSD為0.15%，說(shuō)明系統(tǒng)能滿足檢測(cè)的要求。

3.6 檢測(cè)限與定量限

稱取吡拉西坦對(duì)照品約0.015g，精密稱定，置100ml 量瓶中，加水溶解至刻度，混勻，精密量取1ml，置100ml量瓶中，加水至刻度，混勻，作為母液。再用稀釋劑（水）稀釋制成不同濃度的稀溶液（在低濃度區(qū)）。各量取10μl檢測(cè)，即可通過(guò)不同濃度的供試品測(cè)出的信號(hào)與空白品測(cè)出的信號(hào)進(jìn)行比較。S/N≈3時(shí)為檢測(cè)限，檢測(cè)限為2.99ppb；S/N≈10 時(shí)為定量限，定量限為14.95ppb。

4 結(jié)語(yǔ)

吡拉西坦分散片雜質(zhì)對(duì)檢測(cè)無(wú)干擾，吡拉西坦分散片在濃度0.92ppm到2.15ppm范圍內(nèi)線性合格，系統(tǒng)重復(fù)性合格，準(zhǔn)確度合格，檢測(cè)限為2.99ppb，定量限為14.95ppb。本方法完全能夠滿足吡拉西坦分散片設(shè)備殘留的檢測(cè)。吡拉西坦對(duì)光、氧化、高溫、酸、堿等環(huán)境均較穩(wěn)定，在操作過(guò)程中僅需認(rèn)真操作，避免出現(xiàn)較大的誤差。