快速尿素酶試驗(yàn)對幽門螺桿菌感染診斷的作用研究

代顯明 張婷

幽門螺桿菌在1983年被Marshall 與Warren 成功分離,是一種生長在胃黏膜表面的致病菌,其傳播范圍廣泛。幽門螺桿菌在被發(fā)生及提出后,醫(yī)學(xué)界對胃腸疾病的認(rèn)識發(fā)生根本性改變,并將幽門螺桿菌感染納入人類Ⅰ類致癌因子。有相關(guān)研究資料報(bào)道［1］,幽門螺桿菌感染是胃十二指腸疾病的主要致病因子,并為疾病的診治及預(yù)防提供了明確的治療思路。因此,有效檢測幽門螺桿菌,是臨床診治胃腸疾病的前提條件。幽門螺桿菌感染常用檢測方法分為侵入性及非侵入性兩種,細(xì)菌分離培養(yǎng)被認(rèn)為是診斷幽門螺桿菌感染的金標(biāo)準(zhǔn),但因厭氧條件及培養(yǎng)條件的影響,使其診斷敏感性及特異性顯著降低?？焖倌蛩孛冈囼?yàn)是在胃鏡下進(jìn)行胃黏膜取材,進(jìn)行培養(yǎng)實(shí)驗(yàn),但對其應(yīng)用報(bào)道較少?，F(xiàn)本文就分析快速尿素酶試驗(yàn)對幽門螺桿菌感染的診斷價(jià)值,旨為臨床診斷提供依據(jù),報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2018年1月～2019年10月于沈陽市胸科醫(yī)院接受診治的150例伴有上消化道不適癥狀患者,其中男74例,女76例；年齡18～75歲,平均年齡(48.72±10.24)歲；慢性胃炎76例,十二指腸潰瘍56例,復(fù)合潰瘍18例。均因上消化道不適癥狀而接受胃鏡檢查,排除消化道惡性腫瘤、消化道出血患者；入組患者接受研究前4 周均未接受抗菌藥物、鉍劑、質(zhì)子泵抑制劑等藥物治療。所有患者及家屬均對本研究知情,且自愿簽署了同意書。

1.2 方法

1.2.1 診斷儀器與試劑 快速尿素酶試驗(yàn)：幽門螺桿菌尿素酶抗體檢測試劑盒(北京康美天鴻生物科技有限公司)。日本奧林巴斯GIF-XQ-260 型胃鏡,微需氧培養(yǎng)罐(蘇凈集團(tuán)安泰公司制)。13C 呼氣試驗(yàn)：13C 呼氣診斷試劑盒(北京優(yōu)你特藥業(yè)有限公司)。

1.2.2 檢測方法 兩組患者入院行胃鏡檢查,在胃鏡直視下,距離胃竇口5 cm 處以及胃體中段部位分別提取2 塊胃黏膜,2 塊立即進(jìn)行快速尿素酶試驗(yàn)檢測,2 塊胃黏膜置于葡萄糖瓊脂內(nèi),放置4℃冰箱內(nèi)。2 h內(nèi)送入細(xì)菌培養(yǎng)室進(jìn)行幽門螺桿菌培養(yǎng)。①快速尿素酶試驗(yàn)檢測：將鉗取的胃黏膜組織進(jìn)行快速尿素酶試驗(yàn)檢測,嚴(yán)格按照試劑盒操作步驟進(jìn)行,在20～25℃環(huán)境下孵育,30 min 內(nèi)觀察黏膜組織顏色改變,陽性：組織顏色由黃色變成紅色；陰性：顏色未改變。②細(xì)菌培養(yǎng)：培養(yǎng)基為哥倫比亞瓊脂,添加5%～10%山東馬血于80℃溶血,溫度降低于50～60℃時(shí),加入1 U/ml 萬古霉素。胃黏膜無菌劃線接種,置入微需氧袋內(nèi),保存環(huán)境37℃,5～7 d,若無明顯菌落,轉(zhuǎn)種后繼續(xù)培養(yǎng)3 d。幽門螺桿菌菌株鑒定：培養(yǎng)細(xì)菌菌落肉眼見透明針尖樣,直徑為1～2 mm,常規(guī)革蘭染色陰性,油鏡下見幽門螺桿菌呈海鷗狀、短桿菌或S 狀彎曲菌。

1.2.313C 呼氣試驗(yàn) 嚴(yán)格按照試劑盒操作步驟,根據(jù)DOB 判斷結(jié)果,陽性：DOB 數(shù)值≥5；陰性：DOB數(shù)值＜5。

1.3 觀察指標(biāo) 以13C 呼氣試驗(yàn)診斷結(jié)果作為幽門螺桿菌感染檢出金標(biāo)準(zhǔn),①比較快速尿素酶試驗(yàn)、細(xì)菌培養(yǎng)對幽門螺桿菌感染的檢出陽性率；②比較快速尿素酶試驗(yàn)、細(xì)菌培養(yǎng)診斷的敏感性、特異性及準(zhǔn)確性,敏感性=真陽/(真陽+假陰),特異性=真陰/(真陰+假陽),準(zhǔn)確性=(真陽+真陰)/總例數(shù)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS20.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件處理數(shù)據(jù)。計(jì)數(shù)資料以率(%)表示,采用χ2檢驗(yàn)。P＜0.05 表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩種檢測方法對幽門螺桿菌的陽性檢出率比較以13C 呼氣試驗(yàn)診斷結(jié)果作為金標(biāo)準(zhǔn),150例上消化不適患者13C 呼氣試驗(yàn)診斷,幽門螺桿菌感染檢出陽性例數(shù)108例,包括慢性胃炎66例,十二指腸潰瘍24例,復(fù)合潰瘍18例?？焖倌蛩孛冈囼?yàn)檢出陽性例數(shù)84例,包括慢性胃炎53例,十二指腸潰瘍24例,復(fù)合潰瘍7例；細(xì)菌培養(yǎng)檢出陽性例數(shù)59例,包括慢性胃炎31例,十二指腸23例,復(fù)合潰瘍5例。快速尿素酶試驗(yàn)對幽門螺桿菌的陽性檢出率為56.00%(84/150),高于細(xì)菌培養(yǎng)的39.33%(59/150),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=8.352,P＜0.05)。

2.2 兩種檢測方法的敏感性、特異性及準(zhǔn)確性比較快速尿素酶試驗(yàn)檢測陽性84例,真陽性82例,假陽性2例；陰性66例,真陰性40例,假陰性26例；快速尿素酶試驗(yàn)的敏感性為75.93%(82/108)、特異性為95.24%(40/42)、準(zhǔn)確性為81.33%(122/150)。細(xì)菌培養(yǎng)對幽門螺桿菌感染檢測陽性59例,真陽性48例,假陽性11例；陰性91例,真陰性31例,假陰性60例；細(xì)菌培養(yǎng)的敏感性為44.44%(48/108)、特異性為73.81%(31/42)、準(zhǔn)確性為52.67%(79/150)?？焖倌蛩孛冈囼?yàn)的敏感性、特異性、準(zhǔn)確性均高于細(xì)菌培養(yǎng),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。

3 討論

幽門螺桿菌感染是胃十二指腸疾病常見致病因子,也是全球常見的感染細(xì)菌之一。通常幽門螺桿感染與慢性胃炎、消化性潰瘍、胃癌等上消化道疾病密切相關(guān)。我國是幽門螺桿菌感染的主要國家,其中有＞59%人群伴有幽門螺桿菌感染。而上消化道疾病臨床治療時(shí),胃黏膜萎縮、慢性胃炎、胃黏膜糜爛、早期胃癌等疾病是幽門螺桿菌感染必須根除的適應(yīng)證,多數(shù)慢性胃炎患者合并消化性不良癥狀,或長期服用非甾體抗炎藥物等患者,屬于支持幽門螺桿菌根除的適應(yīng)證。因此,為了提高臨床治療效果,根除幽門螺桿菌感染,需準(zhǔn)確檢測幽門螺桿菌感染,早期發(fā)現(xiàn)、及時(shí)根除則顯得十分必要。

細(xì)菌培養(yǎng)是既往檢測幽門螺桿菌感染的金標(biāo)準(zhǔn),但因取材部位、微需氧條件等限制,均會(huì)影響其培養(yǎng)結(jié)果,存在假陰性情況?？焖倌蛩孛冈囼?yàn)具有操作簡單、試劑價(jià)格低廉、結(jié)果獲得迅速等優(yōu)勢,在臨床應(yīng)用日漸廣泛,并獲得患者及臨床醫(yī)師的青睞。但由于幽門螺桿菌感染存在“灶性”特點(diǎn),僅提取1 塊胃黏膜組織,其檢出陽性率較低,敏感性、特異性降低。故此本研究在行快速尿素酶試驗(yàn)時(shí),選擇胃竇與胃體兩塊胃黏膜組織,能夠相應(yīng)提高檢測準(zhǔn)確性。也有研究［2］選擇4 塊胃黏膜組織,以期提高幽門螺桿菌感染檢出率,但4 塊胃黏膜取材創(chuàng)傷大、時(shí)間長,耗費(fèi)一定的人力、財(cái)力,不適合臨床應(yīng)用。故再次肯定提取兩塊黏膜組織的優(yōu)勢。幽門螺桿菌感染采用快速尿素酶試驗(yàn)檢測時(shí),是利用幽門螺桿菌產(chǎn)生的尿素酶水解尿素,而形成二氧化碳、氨氣,氨氣可使快速尿素酶試紙的pH 值增加,提示為幽門螺桿菌感染。

本組研究中,以13C 呼氣試驗(yàn)結(jié)果作為幽門螺桿菌感染的檢出金標(biāo)準(zhǔn),該方法是由受試者口服13C-尿素,尿素被幽門螺桿菌分解,并產(chǎn)生氨與二氧化碳,在肺部呼出后,即可得知是否為幽門螺桿菌感染。另外13C 呼氣試驗(yàn)無放射性,可反復(fù)使用,不會(huì)對人體造成危害。因此,采用快速尿素酶試驗(yàn)檢測幽門螺桿菌感染,具有一定的操作價(jià)值,且具有相應(yīng)的陽性率。研究結(jié)果發(fā)現(xiàn),快速尿素酶試驗(yàn)對幽門螺桿菌的陽性檢出率56.00%高于細(xì)菌培養(yǎng)的39.33%,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。提示與細(xì)菌培養(yǎng)相比,快速尿素酶試驗(yàn)?zāi)軌蛱岣哂拈T螺桿菌檢出率,其結(jié)果與趙媛媛等［3］研究相一致?？焖倌蛩孛冈囼?yàn)的敏感性為75.93%、特異性為95.24%、準(zhǔn)確性為81.33%,均高于細(xì)菌培養(yǎng)的44.44%、73.81%、52.67%,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。提示快速尿素酶試驗(yàn)對幽門螺桿菌感染具有一定診斷價(jià)值,且優(yōu)于細(xì)菌培養(yǎng)。

但在采用快速尿素酶試驗(yàn)診斷幽門螺桿菌感染時(shí),其檢測結(jié)果容易受到取材部位、試驗(yàn)條件及用藥史等因素影響,導(dǎo)致假陽性、假陰性結(jié)果的出現(xiàn)［4］。在快速尿素酶試驗(yàn)檢測時(shí),尿素酶微生物的密度、“灶性”分布,缺乏明確的客觀判斷,會(huì)相應(yīng)降低臨床檢測的敏感性、特異性；同時(shí)用藥史是影響快速尿素酶試驗(yàn)檢測結(jié)果的重要因素。多數(shù)患者在采用快速尿素酶試驗(yàn)檢測時(shí)多存在用藥史,常因服用藥物無效后才就診。而患者服用質(zhì)子泵抑制劑類藥物后,會(huì)相應(yīng)降低幽門螺桿菌的強(qiáng)陽性,弱陽性比例增加,并與陰性比例相一致,導(dǎo)致假陰性的出現(xiàn)［5］?？诜G劑后,或明顯增加幽門螺桿菌陰性比例,降低強(qiáng)陽性結(jié)果。因此在采用快速尿素酶試驗(yàn)檢測幽門螺桿菌感染時(shí),不宜將其作為單獨(dú)一種檢測方法,其陽性、陰性結(jié)果也不作為幽門螺桿菌感染的唯一證據(jù),仍需聯(lián)合其他方法,以此提高幽門螺桿菌感染檢出陽性率,為臨床診治提供科學(xué)、合理的參考依據(jù)［6］。

綜上所述,胃鏡下胃黏膜取材行快速尿素酶試驗(yàn)診斷幽門螺桿菌感染具有顯著效果,具有較高診斷敏感性、特異性,但單獨(dú)取材檢測易受到取材部位、實(shí)驗(yàn)條件等因素的影響,不宜作為單獨(dú)證據(jù),仍需聯(lián)合其他方法,以提高幽門螺桿菌感染的檢出率。