奶牛新孢子蟲病研究進展

李小曼，曾 澳，劉炳琦，劉桂池，付宜鑫

(黑龍江八一農墾大學動物科技學院，黑龍江 大慶 163316)

新孢子蟲病是一種全球范圍內廣泛流行的原蟲性寄生蟲病，被認為是引起全世界牲畜墮胎的主要原因之一，可導致乳制品和肉牛業的重大經濟損失[1]。犬科動物被認為是最終的宿主，因為它們可以通過犬科動物糞便將卵囊排入外界環境。

新孢子蟲病是一種由犬新孢子蟲寄生在宿主血液內的原蟲性疾病。該病首次由挪威獸醫學家于1984年在患病幼犬體內發現，初期因其與龔地弓形蟲基因序列相同，故其在1988年才被 Dubey 博士命名為犬新孢子蟲[2]。在我國對新孢子蟲病研究較少，中國農業大學的劉群教授在國內率先開展了奶牛新孢子蟲病的研究。在2001年以來，應用進口的試劑盒，分別在北京、山西、河北、新疆等地區的奶牛(牦牛)血清中檢出了新孢子蟲的存在。據報道，我國各省(市)都有不同程度的新孢子蟲病發生，給當地畜牧養殖行業帶來巨大的經濟損失。研究至今，還沒有效藥物和疫苗用于防治該病。淘汰病牛及定期飼喂驅蟲藥物是目前該病的防治手段。

1 病原學

雖經過幾十年時間對新孢子蟲的生活史進行了研究，但對其生活史的了解并不透徹，因而新孢子蟲的分類地位多年來一直存有爭議，曾經認為是弓形蟲，也有人認為是其它原蟲。1993年 Brindley 等[3]研究發現新孢子蟲和龔地弓形蟲的16s樣rRNA基因序列相同，但新孢子蟲沒有龔地弓形蟲的三種主要同源基因B1，P22和P30，而且新孢子蟲抗血清與弓形蟲、枯氏住肉孢子蟲、艾美耳球蟲、哈氏哈芒球蟲、隱孢子蟲等只有較低的或無交叉反應；隨后應用隨機擴增多態性 DNA(RAPD)法，對新孢子蟲、弓形蟲、枯氏住肉孢子蟲的基因多態性進行比較，發現新孢子蟲的基因不同于弓形蟲與枯氏住肉孢子蟲，因而認為新孢子蟲為一獨立的新屬新種，隸屬于原生動物門(Protozoa)、頂復亞門(Apicomplexa)、孢子蟲綱(Sporozoa)、球蟲亞綱(Coccidomorpha)、真球蟲目(Coccidiida)、新孢子蟲屬(Neospora)。

新孢子蟲在發育階段會出現數種不同的形態：即速殖子、組織胞囊、卵囊、裂殖體、裂殖子等。

速殖子呈卵圓形、圓形或月芽形，并隨分裂期不同而有所差異，大多數速殖子寄生于宿主細胞的胞漿內帶蟲空泡中，反復分裂，可有上百個蟲體存在于蟲體集落內。速殖子對宿主細胞侵入性強，接觸3-5 min即可破入宿主細胞漿質內，快的30 s即可侵入宿主細胞漿，迅速分裂形成蟲體集落。而胞囊主要寄生于腦、脊髓、神經元以及宿主的眼視網膜。呈圓形或卵圓形，大小不等。犬感染該原蟲后通過糞便將新孢子蟲呈卵圓形的卵囊排出[4]。剛被排出的卵囊不具備感染能力，其在外界自然環境中形成孢子化，發育成孢子化卵囊伴隨感染性。

2 流行病學

本病一年四季均可發生，引起的流產呈散發性或地方性流行，同一母畜感染后會造成復發性流產。新孢子蟲病呈世界性分布，北美洲、西歐、亞洲、南非等50多個國家都有流行分布，我國鄰國的日本、韓國、蒙古等國家和我國臺灣地區也有報道[5]。中國農業大學劉群教授在國內率先開展了奶牛新孢子蟲病的研究，對北京94份和河北地區55份奶牛血清樣本進行檢測發現，北京地區奶牛犬新孢子蟲抗體陽性率為18.1 %，河北地區奶牛犬新孢子蟲抗體陽性率為23.6 %[2]。隨后于晉海等[3]分別檢測了來自國內10個省(市、自治區)的312份牛血清，其結果顯示，新孢子蟲抗體陽性率為34.4 %，證明新孢子蟲病在我國奶牛中感染普遍。

3 臨床癥狀病理變化

動物感染新孢子蟲的主要癥狀為流產、死胎、幼畜癱瘓、幼畜發育畸形、幼畜肌縮、并伴隨不同的運動神經癥狀。牛感染后的癥狀：關節無力拘謹、運動性能失調，頭部伴隨神經癥狀，頭蓋骨變形，眼瞼反射遲鈍、眼角膜產生不同程度的混濁等。

病理變化與蟲體的寄生部位有關，病變可在一處或多處出現。在病變部位常可發現速殖子和組織包囊，可作為診斷的指標之一。

4 診斷

當發現母畜流產，幼畜癱瘓，尤其是一群或多群動物中出現此類癥狀時，應懷疑為本病，可根據病原學檢查、病理檢查、血清學診斷、分子生物學檢測等進行綜合診斷。根據新孢子蟲的寄生部位，對新生仔畜的組織進行常規組織學檢查。檢測是否有新孢子蟲速殖子或組織包囊。

5 防治

本病的治療尚處于探索階段，迄今為止，尚未發現治療牛新孢子蟲病特效藥物。由于新孢子蟲的生活史尚未被人們認識，至今還沒有控制該病的有效方法。目前預防奶牛新孢子蟲病的有效措施主要是通過流行病學檢測，凈化牛群，對引進的牛只進行嚴格的檢疫、隔離飼養。并對奶牛場內及其周圍的犬只進行嚴格的管理，禁止犬類進入牛欄，減少奶牛與犬直接接觸的機會；禁止給犬飼喂牛的胎盤、流產的胎牛，以期切斷傳播途徑而達到預防的目的。目前，對新孢子蟲血清學診斷方法的研究有一定進展。檢測牛新孢子蟲抗體的血清學方法主要包括 IFAT、ELISA、凝集試驗以及 Western blot試驗等。其中 IFAT 和 ELISA 應用最廣泛，且檢測結果的特異性和敏感性都較高[6]。

6 展望

新孢子蟲病是近幾年被世界各國學者和畜牧業工作人員廣泛關注和認識的疾病，該病可引起妊娠母牛流產，進而造成巨大的經濟損失[7]。近年來我國養殖業發展迅速，優良品種奶牛及肉牛的引進力度加大，同時越來越多的國外犬種的引入，并飼養量增加，對我國養殖業危害極為嚴重。當前我國對牛新孢子蟲病的研究已取得一定進展，但對該病的流行情況、生活史需要進一步深入研究，除了建立有效的診斷方法之外，還應加大該病疫苗的研究力度，無論是弱毒疫苗或是滅活疫苗，都會從根本上去解決新孢子蟲在畜牧養殖行業的影響，從而建立有效的綜合防制體系，保障養殖業的順利發展[8]。