法舒地爾聯合丁苯酞對老年急性腦梗死的療效及對血清ApoE、Toll樣受體和氧化應激的影響

袁虎 丁謙謙

(義烏市中心醫院急診科，浙江 義烏 322000)

急性腦梗死是具有高發病率、致殘率和致死率的一種腦血管疾病，且發病率呈逐年增長趨勢，且大部分患者遺留不同程度功能障礙，給患者家庭及社會造成沉重負擔，嚴重威脅患者生命安全及生活質量〔1，2〕。因此，采取及時有效的治療急性腦梗死方法具有重要意義〔3，4〕。丁苯酞主要是我國自主研究的一類治療急性腦梗死化學新藥，可改善缺血區微循環、能量代謝、神經功能和縮小梗死面積〔5〕。法舒地爾是一種鈣離子拮抗劑，具有保護神經元的作用，近年來用于腦血管疾病方面獲得良好療效〔6〕。因此，本研究探討法舒地爾聯合丁苯酞對老年急性腦梗死患者療效及對血清載脂蛋白(Apo)E、Toll樣受體(TLR)4和氧化應激的影響。

1 資料與方法

1.1研究對象 選擇義烏市中心醫院于2016年11月至2017年11月接受診治的老年急性腦梗死患者86例，參照《全國第四屆腦血管病學術會議紀要》中相關診斷標準。根據隨機表法隨機分為對照組43例與觀察組43例。對照組男27例，女16例；年齡65～76〔平均(70.23±5.61)〕歲；發病至入院3～35〔平均(19.73±3.56)〕h。觀察組男26例，女17例；年齡67～75〔平均(70.71±4.82)〕歲；發病至入院2～32〔平均(19.34±3.28)〕h。兩組基線資料比較差異無統計學意義(P>0.05)。

1.2納入與排除標準 納入標準：①經頭磁共振成像(MRI)或者計算機斷層掃描(CT)證實為腦梗死，且患者發病36 h內入院接受治療者；②為首次發病，年齡65～80歲；③臨床資料完整；④簽訂知情同意書。排除標準：①合并嚴重顱腦損傷者；②合并心肺、肝腎嚴重異常；③意識功能障礙或者精神疾病者；④對本研究方案過敏者。

1.3方法 兩組入院采取基礎治療，包括調脂、降糖、降壓、腦保護、改善循環、自由基清除劑及降低顱內壓等。對照組：給予丁苯酞注射液(生產企業：石藥集團恩必普藥業有限公司；規格：100 ml∶25 mg∶0.9 g/瓶；批準文號：國藥準字H201000041)100 ml靜脈滴注，每日2次；觀察組：在對照組基礎上結合法舒地爾(生產企業：山西普德藥業有限公司；規格：2 ml∶30 mg；批準文號：國藥準字H20103208)30 mg靜脈滴注，每日2次。兩組療程均為14 d。

1.4療效判定標準 ①基本痊愈：治療14 d后神經功功能缺損程度采用美國國立衛生研究院腦卒中量表(NIHSS)評分進行評定，該評分減少91%～100%，主要癥狀、體征消失；②顯著進步：患者治療14 d后NIHSS評分減少46%～90%，主要癥狀、體征明顯改善；③進步：NIHSS評分減少18%～45%，主要癥狀、體征改善；④無效：NIHSS評分減少18%以下，主要癥狀、體征無改善。

1.5觀察指標 ①觀察兩組治療前后日常生活活動能力(Barthel指數)評分和神經功能缺損程度(NIHSS評分)變化，Barthel指數評分越高患者日常生活活動能力越好，NIHSS評分越高患者神經功能缺損程度越嚴重。②觀察兩組治療前后血清ApoE水平，分別于治療前與治療14 d末抽取肘靜脈血2 ml，以離心半徑15 cm、3 000 r/min，離心10 min，分離血清，采用酶聯免疫吸附試驗(ELISA)測定ApoE水平。③觀察兩組治療前后TLR4 mRNA表達汪洋，分別于治療前與治療14 d末清晨空腹抽取外周靜脈血3 ml，加肝素抗凝，搖勻，分離得到單個核細胞，保存備用。采用RT-PCR法檢測TLR4 mRNA表達，嚴格依據Invitrogen公司試劑盒說明書提取總RNA，按照試劑盒進行反轉錄反應。TLR4引物設計由上海生物工程有限公司合成，引物序列：上游：5′-TGGATACGTTTCCTTATAAG-3′，下游：5′-GAAATGGAGGCACCCCTT-3′，擴增片段507 bp。PCR反應條件：預變性：95℃ 5 min；循環28次：95℃ 45 s、54℃ 45 s、72℃ 60 s；終末延伸：72℃ 10 min。④觀察兩組治療前后氧化應激水平，分別于治療前與治療14 d末抽取肘靜脈血3 ml，以離心半徑15 cm、3 000 r/min，離心10 min，分離血漿，采用比色法檢測超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)和丙二醛(MDA)水平。

1.6統計學處理 采用SPSS22.0統計軟件進行χ2、t檢驗。

2 結 果

2.1兩組療效比較 觀察組總有效率(91.70%，基本痊愈9例，顯著進步21例，進步9例，無效4例)顯著高于對照組(69.77%，基本治愈5例，顯著進步17例，進步8例，無效13例，χ2=5.939,P<0.05)。

2.2兩組Barthel指數評分和NIHSS評分比較 兩組治療前Barthel指數評分和NIHSS評分比較差異無統計學意義(t=0.307、0.479，均P>0.05)；兩組治療后Barthel指數評分較治療前顯著增加而NIHSS評分較治療前降低(觀察組：t=14.555、26.791，對照組：t=6.435、14.910，均P<0.05)；觀察組治療后Barthel指數評分顯著高于對照組而NIHSS評分顯著低于對照組(t=7.343、10.362，均P<0.05)。見表1。

表1 兩組Barthel指數評分和NIHSS評分比較分,n=43)

與本組治療前比較：1)P<0.05；與對照組治療后比較：2)P<0.05，下表同

2.3兩組血清ApoE水平比較 觀察組與對照組治療前血清ApoE水平比較差異無統計學意義〔(53.42±9.84)mg/L vs (54.08±11.25)mg/L,t=0.290，P>0.05〕；兩組治療后血清ApoE水平較治療前顯著降低〔觀察組：(32.14±6.57)mg/L,t=11.794，對照組：(43.78±7.86)mg/L,t=4.922，均P<0.05〕；觀察組治療后血清ApoE水平顯著低于對照組(t=7.451，P<0.05)。

2.4兩組TLR4 mRNA表達水平比較 觀察組與對照組治療前TLR4 mRNA表達(0.85±0.12，0.83±0.16)比較差異無統計學意義(t=0.656，P>0.05)；兩組治療后TLR4 mRNA表達較治療前顯著降低(觀察組：0.37±0.08，t=21.825，對照組：0.56±0.13,t=8.588，均P<0.05)；觀察組治療后TLR4 mRNA表達顯著低于對照組(t=8.162，P<0.05)。

2.5兩組氧化應激指標水平比較 兩組治療前血漿SOD、GSH-Px和MDA水平比較差異無統計學意義(t=0.757、0.276、0.777，均P>0.05)；兩組治療后血漿SOD和GSH-Px水平較治療前顯著升高，而MDA水平較治療前顯著降低(觀察組：t=22.703、15.753、13.862，對照組：t=12.112、6.398、5.492，均P<0.05)；觀察組治療后血漿SOD和GSH-Px水平顯著高于對照組，而MDA水平顯著低于對照組(t=11.050、10.282、8.576，P<0.05)。見表2。

表2 兩組氧化應激指標水平比較

3 討 論

我國是腦卒中的高發地區，其中最常見為腦梗死，占全部腦卒中80%以上。現代醫學認為，急性腦梗死是有多個、復雜的病理生理反應參與的過程，氧自由基反應、鈣過量內流、興奮性神經介質釋放及能力代謝障礙等一系列缺血性代謝紊亂連鎖反應是引起缺血性腦損害的中心環節〔7，8〕。目前，臨床上針對急性腦梗死患者治療重點主要在于恢復缺血區血液灌注、增加腦組織供血供氧，降低腦細胞損傷。

丁苯酞是人工合成的一種左旋芹菜甲素，其活性成分主要為消旋-3-正丁基苯酞，消旋-3-正丁基苯酞能夠改善微循環和增加缺血區腦血流量，促進缺氧、缺血神經細胞功能的恢復〔9〕。藥理研究表明，丁苯酞具有促進側支循環建立、減少梗死面積及改善微循環；丁苯酞可抑制細胞內鈣超載、自由基的產生及缺血后炎性因子表達，且促進血一氧化氮合成，減少神經細胞損傷，改善神經功能；丁苯酞可抑制血栓、血小板形成，保護線粒體，改善腦組織能力代謝，延緩梗死灶的形成，從而挽救“缺血半暗帶”〔10，11〕。法舒地爾是高效的一種Rho激酶抑制劑，能夠有效抑制在腦部血供氧供不足時，Rho激酶激活對神經元損傷作用〔12〕。此外，法舒地爾還可抑制細胞凋亡，減輕炎癥反應，減輕組織損傷，且可促使血管平滑舒張，擴張血管，促進一氧化氮的生成，保護組織免受損傷〔13〕。本研究表明，法舒地爾聯合丁苯酞對老年急性腦梗死患者療效良好。

ApoE對血脂水平具有一定影響，主要通過調控血脂代謝影響腦梗死發病。研究表明，急性腦梗死患者血清ApoE水平顯著高于健康體檢者〔14〕。TLR4在跨膜信號受體家族TLRs中占重要位置，其可介導細菌內毒素誘導的炎癥反應。中樞神經系統表達TLR4的細胞主要是小膠質細胞，其在炎性狀態下被激活后，發揮強有力的致炎作用。腦梗死時，缺血缺氧所促發的腦組織壞死物質釋放及血管內皮通透性改變，吸收外源性的淋巴細胞、單核/巨噬細胞趨化、聚集，成為加劇炎性損傷效應細胞，而均有豐富的TLR4表達〔15，16〕。本研究表明，法舒地爾聯合丁苯酞可下調老年急性腦梗死患者ApoE水平和TLR4 mRNA表達。腦梗死發生后主要由于局部血液供應障礙引起腦組織缺血、缺氧，從而導致機體氧化-抗氧化反應失衡而產生過多的氧自由基；氧自由基可導致神經元線粒體出現損傷，從而造成神經元細胞死亡；氧自由基能夠導致內皮細胞結構或功能破壞，從而造成內皮細胞通透性增加，促進神經元細胞死亡〔17，18〕。SOD、GSH-Px及MDA是上述氧化應激過程中重要的分子和酶，且間接反映氧自由基的清除能力。本研究表明，法舒地爾聯合丁苯酞可改善老年急性腦梗死患者氧化應激。